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BIOLOGIA CELULAR E HISTOLOGIA Paola Barbosa – FAMED XVII Membrana Plasmática / Plasmalema Estrutura - Bicamada fosfolipídica (hidrofóbico -centro- e hidrofílico –2 superfícies-). - Aspecto trilaminar. - Contem lipídios: glicolipídios e colesterol. - Assimétrica: composição lipídica de cada metade é diferente – proteínas diferentes de acordo com a função (sinal, captação). - Não há gasto de energia na sua organização porque essa se dá por afinidade. - Fosfolipídios não estão ligados – mosaico fluido –, andam livremente na membrana em sua própria monocamada (enzima flippase consegue mudar fosfolipídios de camada). OBS: Substâncias hidrofóbicas passam mais facilmente pela membrana. Proteínas de membrana Funções: - Poros (íons – substâncias com carga tem dificuldade de atravessar a membrana) e receptores (hormônios). Divididas em 2 grupos: - Integrais: incorporadas na estrutura da membrana (só é possível extrair destruindo a célula). - Periférica: fracamente associadas a membrana (podem ser facilmente retiradas ou perdidas). Transmembranas (integrais): atravessam toda a membrana (passagem única ou múltipla). - Aminoácidos da proteína dentro da membrana são, EM MAIORIA, hidrofóbicos, os hidrofóbicos que ficam no meio aquoso causam dobramentos. - Proteínas deslizam sobre a MP (fluida). - Distribuição proteica diferente nas duas camadas. - Porção glicídica → saliência para fora. Síntese de glicoproteína: 1 – Síntese das proteínas da membrana no retículo endoplasmático rugoso. 2 – Transporte em vesícula → aparelho de Golgi (onde estão os glicocálices). 3 – Aumento da porção glicídica (adiciona-se o glicocálice) → transporte para a MP. Superfície externa da MP Estrutura de hidrato de carbono (glicocálice): - Primeira coisa a tocar no encontro de células = comunicação e reconhecimento da interação da célula com o meio extracelular. União com moléculas extracelulares, protege a célula contra ação de enzimas e pH. - Sinalização e inibição por contato: controle no processo de divisão celular (sinaliza contato com outra célula para a célula parar de dividir). OBS: Câncer: um dos mecanismos → células perdem essa proteína e dividem descontroladamente. Fatores que influenciam a fluidez (enzima flipase): - Energia cinética: aumento de temperatura → aumenta fluidez. - Tamanho da calda lipídica: se aumenta o tamanho, diminui a fluidez pro atrito. - Colesterol: diminui a fluidez por ocupar espaço. - Presença de insaturações: calda formada por ácidos graxos saturados, insaturações aumenta a fluidez por afastar as pernas do lipídeo. Troca de substâncias na membrana - Osmose (espontâneo): transporte solvente, água do meio hipotônico em soluto (-) pro meio hipertônico em soluto (+). Passar água de onde tem mais para onde tem menos água. OBS 1: meio hipotônico: meio com mais água e menos soluto que a célula (água entra na célula = equilíbrio). 2: Isotônico: meio igual a célula, sem fluxo efetivo = equilíbrio → SORO. 3: meio hipertônico: meio com mais soluto que a célula (água sai da célula = equilíbrio) - Água = aquaporina: poros na membrana para a passagem de água. - Difusão passiva (soluto): a favor do gradiente de concentração, não usa energia. - Difusão simples: molécula atravessa livremente. - Difusão facilitada: proteínas criam canal para passagem (íons). - Transporte ativo primário (soluto): contra o gradiente de concentração - do menos pro mais - (ex: bomba de sódio e potássio), há gasto de ATP para manter o gradiente de concentração. - Transporte ativo secundário: uma substância a favor do gradiente e outra contra. Transferência de energia pelo gradiente. Ex: sódio entrando possibilita a glicose entrar sem gastar atp – sódio sai para entrar potássio gastando o atp (intestino: mecanismos independentes da insulina) → feito pela energia do próprio gradiente. *glicose do menos pro mais (absorção), sódio + do lado de fora e passa do mais pro menos, perde energia do gradiente do sódio e passa ela pro gradiente de glicose (menos pro mais) acontecer sem gasto de ATP. OBS: SORO: glicose, sódio e água: aumentar concentração de sódio no interior da célula pra água entrar (osmose) mais efetivamente. Endocitose Entrada de macromoléculas e partículas maiores em bloco – modificações visíveis na MP (envolver a substância com a mp). Variedades da endocitose: 1- Pinocitose de fase fluida não seletiva: – Pequenas invaginações na MP → engloba fluido extracelular + substâncias (vesícula) → puxada pelo citoesqueleto → entra no citoplasma → vesícula se funde ao lisossomo (enzimas digestivas) – as vezes passa direto para atender as células mais distantes. 2- Endocitose mediada por receptores (ou pinocitose seletiva): - Ligante: (hormônio) molécula com afinidade pelo receptor (proteína de membrana). - Receptores espalhados em regiões da membrana (fossetas cobertas – CLARATINA principal proteína que molda a membrana para formar vesícula que se fundem ao endossomo). - Ligação receptor-ligante: só entra se interagir com o receptor. Ativa as moléculas do citoesqueleto. → fossetas são arrastadas pelo citoesqueleto e forma vesículas cobertas. - Penetram no citoplasma → perdem o revestimento de claratina (reutilizável), e fundem-se com endossomos (compartimento membranoso -“saquinho”- que recebem as vesículas que foram internalizadas). - Membrana endossomos → bomba de H+ → acidifica o interior da organela (gasto de ATP) → separação, quebra da ligação, do receptor (reutilizável) e seu ligante. OBS1: Endossomo primário: bomba de H+ e separação do receptor-ligante. Endossomo secundário: se liga ao lisossomo (pH ácido) - digerir o ligante na digestão lisossômica. OBS2: pH do citoplasma não é acido como o do lisossomo, então se o lisossomo romper, suas proteínas digestivas desnaturam. OBS3: alguns receptores podem não voltar para a membrana: se tiver um pk baixo, não desligam do ligante e são digeridos junto com ele. - Internalização de LDL: fundamental para manter baixo do LDL do meio extracelular. - LDL (rica em colesterol) tem grande afinidade pelos receptores da MP. - Ligação LDL-receptor → formação de vesículas pela claratina → fusão com endossomo → digestão na fusão com lisossomo. OBS: Interior das lipoproteínas (transportar lipídeo e aumentar a solubilidade) tem lipídeos e uma camada de fosfolipídios por fora (não precisa de duas camadas por que não tem água interna). 3- Fagocitose: - Englobamento e eliminação de bactérias, fungos, protozoários, células danificadas e moléculas do meio extracelular → realizado por leucócitos (macrófagos e neutrófilos). - Ligante aderido ao receptor promove modificações na camada citoplasmática da MP → ativação da proteína gelsolina (Ca+) → transforma gel em sol (fluido) que permite a emissão de pseudópodes (“bracinhos” – filamento de actina) para fagocitose → bordas do peseudópodes se fundem formando o fagossomo (vacúolo intracelular). Exocitose - Fusão de vesículas citoplasmáticas com MP e expulsão do conteúdo de vesículas para fora da célula → sem ruptura da superfície celular. - Ocorre, por exemplo, na expulsão de moléculas armazenadas em vesículas de células secretoras (glândula salivar e pâncreas). - Proteínas fusogênicas – presente na vesícula e na membrana, determina o processo de fusão (vesícula e MP), depende do cálcio. BIOLOGIA CELULAR E HISTOLOGIA Paola Barbosa – FAMED XVII Citoesqueleto Definição: armação proteica filamentosa no citosol (malha tridimensional). Funções: ✓ Mantém a forma da célula; ✓ Fornece rigidez às células; ✓ Determina a posição correta das organelas no citoplasma; ✓ Mobilidade celular (macrófagos, espermatozóide, fibroblastos...) ✓ Contração muscular; ✓ Divisão celular; ✓ Transporte de substâncias e de vesículas no interiorda célula - microtúbulo; ✓ Suporte para estruturas celulares móveis (cílios, flagelos); Principais componentes Filamentos 1- Filamento actina: na membrana (forma da célula, molde, dentro das microvilosidades). 2- Filamentos intermediários: associados aos desmossomos, contribuição no envoltório nuclear. 3- Microtúbulos: centro organizador do mic. (centrossomo) – onde estão os centríolos - movimento. Proteínas acessórias - Proteínas reguladoras: controlam o processo de alongamento e redução dos filamentos. - Proteínas de associação: conectam os filamentos entre si, ou com outros componentes da célula – malha do citoesqueleto, mais rigidez. - Proteínas motoras: transporte de macromoléculas e organelas de um ponto para outro da célula. Mobilidade celular através do deslizamento dos filamentos via interação das proteínas motoras – vesículas do retículo para o golgi. → movimento = microtúbulos + proteínas motoras. Microtúbulo - Longas, retas, rígidas, de aspecto tubular: agem como vias intracelulares. - Localizadas no citoplasma e prolongamentos celulares (cílio e flagelos) – associado as proteínas motoras. - São filamentos do citoesqueleto presentes em quase todas as células eucariotas. - De acordo com sua localização os microtúbulos podem ser classificados em: ✓ Citoplasmáticos: presentes nas células em interfase (rotas que levam organelas) – instáveis (construído e desconstruído). ✓ Mitótico: formam as fibras do fuso mitótico (mitose) – instáveis (construído e desconstruído). ✓ Ciliares: situado no eixo dos cílios – estáveis (forma fixa). ✓ Centrioláres: localizam-se no corpúsculo basal e formam os centríolos - estáveis (forma fixa). *protofilamento (vertical) – alfa interagindo com beta. *são dinâmicos, podendo polimerizar (produzir microtúbulo) e despolimerizar (- para o centrossomo, e + para fora onde ocorre a maior atividade → requer GTP). *centrossomo – local onde nascem os microtúbulos. Proteínas associadas aos microtúbulos - Vários tipos que tem como função impedir a despolarização dos microtúbulos e auxiliar nos movimentos intracelulares de vesículas e organelas. - Principais proteínas: dineína e quinesina ou cinesina - se ligam aos microtúbulos, as vesículas e organelas. - Cinesinas/quinesina: transporte de organelas e divisão celular. - Dineínas: citoplasmáticas (transporte de organelas na mitose) e ciliares (motolidade). Centríolos - Formado por microtúbulos curtos e especializados. - Cada centríolo → 9 conjuntos de 3 microtúbulos (9 tríades). - Células que não estão em divisão → único par de centríolos (próximo ao núcleo). - Momentos antes da mitose → se duplica (2 pares). - Citocentro ou centrossomo: par de centríolos + material granuloso → localizado próximo ao núcleo (região que contém os centríolos). - Centrossomo: centro organizador dos microtúbulos → auxilia a formação e organização dos microtúbulos duplicação centríolos antes da divisão celular. - Microtúbulos alteram seu comprimento (alongamento ou encurtamento) na extremidade +. - Formação dos microtúbulos – dentro do centrossomo – de onde vão surgir as fibras do fuso mitótico (separa os cromossomos homólogos). OBS: 1-MITOSE: células idênticas (separação das cromátides). 2-MEIOSE: gametas com metade dos gametas (separação dos cromossomos homólogos). Cílios e flagelos - Prolongamentos móveis – proteínas motoras fazem deslizamento de um microtúbulo sobre o outro nos cílios, no flagelo “enverga” e fica “ondulado”. - Microtúbulos na parte central. - Estrutura semelhante entre cílios e flagelos. - Corpúsculo basal: base do cílio ou flagelo. - Região central: microtúbulos (axonema) → 2 microtúbulos centrais + 9 duplas de microtúbulos. - Quando ativados: braços de dineína se ligam ao microtúbulo adjacente promovendo deslizamento (necessidade de ATP). Filamentos de actina - Actina: presente no músculo (filamentos finos). - Composição: subunidades globulares organizada em hélice de 2 fios. - Presente no citoplasma de todas as células em diferentes formas: - Filamentos de actina corticais: delgada rede na superfície interna da membrana plasmática da maioria das células → exocitose, endocitose e migração celular. - Filamentos de actina transeculares: cruza todo o citoplasma → estrutura da célula, transporte de moléculas e organização das organelas. - Cinta de actina e miosina formada no final da mitose → divisão celular. - Filamento de actina nas células musculares → estruturalmente estável. - Filamento de actina nas células não musculares → se dissociam e reorganizam. - Metade das moléculas de actina está na forma de microfilamentos. - Funções: Estrutura celular, servindo de armação para ligação de organelas. Fundamental para a divisão celular. Execução de contrações musculares pelo deslizamento dos filamentos de miosina sobre os de actina. Microvilos - Função: aumentar a superfície celular ou mover partículas. - Pequenas projeções do citoplasma. - Característico de células que exercem intensa absorção → epitélio de revestimento do ID e dos túbulos proximais dos rins → centenas de microvilos - Apresentam glicocálice mais espesso → conjunto glicocálice + microvilos é denominado de borda em escova ou borda estriada. - Apresenta no interior grupos de filamentos de actina. Filamentos intermediários - São os filamentos com tamanho intermediário entre os microtúbulos e filamentos de actina - São filamento estáveis (não polimerizam e despolimerizam facilmente). - São filamento estruturais (sustentação). - Estão presentes em células que sofrem atrito (principalmente onde estão presentes os desmossomos – sustentação e união). *identificação de metástase devido sua especificidade.