Fotocolorimetria: Método de Análise de Substâncias

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FOTOCOLORIMETRIA 
 
A fotocolorimetria é um método biofísico 
de análise de substâncias largamente 
utilizado em laboratórios de análises 
clínicas e em laboratórios de pesquisa, 
tendo como principal objetivo a 
determinação da concentração de 
soluções. Esse método baseia-se na 
relação existente entre a absorção de 
radiações eletromagnéticas e a 
concentração da substância em questão. 
 
Quanto mais concentrada a solução, 
mais escura ela é e mais radiação 
eletromagnética (luz) ela absorve. Ou 
seja, a intensidade da luz transmitida 
diminui a medida que a concentração da 
substância aumenta. A relação, entre o 
raio emitido e a concentração da 
substância, é inversa. 
- Raio Incidente: Aquele que é colocado 
sobre a amostra (é oferecido à amostra) 
- Raio Emergente: Aquele que passa 
através da amostra (o raio que sai da 
amostra) 
Relação de Lambert-Beer: Existe uma 
relação direta e exponencial entre a 
concentração da solução e a luz por ela 
absorvida. 
Atenção: Observem que a relação da 
transmissão da luz com a concentração é 
inversamente proporcional. Isso por que 
a relação entre a contração e a absorção 
é inversamente proporcional. Ou seja, 
quanto maior a concentração, mais luz 
incidida é absorvida e a quantidade de 
luz que sai (que emerge) é menor. 
 
 
O equipamento utilizado para a 
realização da prática de fotocolorimetria, 
o ​fotocolorímetro​, é composto pelos 
seguintes itens: fonte de luz, filtro, 
cubeta, fotocélula e miliamperímetro. O 
aspecto externo do fotocolorímetro é 
bastante característico e composto por: 
seletor de filtro, que serve para a escolha 
do comprimento de onda do feixe de luz 
que incidirá sobre a cubeta, sendo o 
aparelho dotado de cinco filtros (410 nm, 
480 nm,520 nm,580 nm e 660 nm); 
porta-cubetas, que é o local onde se 
coloca a cubeta;botões de calibração; 
mostrador de leitura, que apresenta as 
duas grandezas que podem ser medidas 
pelo fotocolorímetro: a absorbância e a 
transmitância. 
 
O fotocolorímetro também é conhecido 
como fotômetro de bolso ou fotômetro de 
mão. O fotocolorímetro é um 
 
equipamento para laboratório comum em 
análises feitas a campo. Destina-se a 
quem precisa de agilidade e praticidade, 
pois traz resultados instantâneos e 
precisos. 
 
O uso do fotocolorímetro é feito de forma 
simples. O usuário zera o aparelho na 
amostra de água, adicionar o reagente, 
colocar a cubeta no fotocolorímetro e 
aperta o botão. Depois, o resultado é 
apresentado de maneira legível e clara. 
 
Alguns modelos de fotocolorímetro são: 
fotocolorímetro verificador de ferro; 
fotocolorímetro verificador de iodo; 
fotocolorímetro verificador de fosfato; de 
cloro total e de cloro livre. 
 
 
 
 
Algumas aplicações 
 
Na ​enzimologia clínica​-é de grande 
importância diagnóstica, principalmente 
em relação às enzimas presentes na 
corrente sangüínea, várias das quais são 
incluídas no estudo do perfil 
enzimático.Utilizando métodos analíticos 
relativamente simples, como a 
fotocolorimetria, ​analisa-se a 
quantidade de produto formado pela 
adição da enzima em uma solução 
com concentração conhecida de 
substrato. A reação ocorre em um 
tempo fixo, em condições determinadas 
de temperatura e pH. Pode ser 
necessária a adição de cofatores, como 
coenzimas ou íons metálicos. Para uso 
na rotina de um laboratório de análises 
existem kits comerciais que oferecem os 
reagentes e o protocolo. 
Na ​avaliação do perfil bioquímico 
protéico de suínos​-o perfil bioquímico 
sanguíneo fornece informações com 
relação ao estado clínico, metabólico e 
produtivo do animal, desta forma 
auxiliando como indicador dos processos 
adaptativos do organismo, no 
metabolismo energético, protéico e 
mineral. ​Analisando a fotocolorimetria 
para analisar proteínas desses 
animais. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Vantagens e Desvantagens