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1 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias – Arqueias e Fungos – Aspectos Teóricos ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES METABOLISMO E CRESCIMENTO MICROBIANO DE BACTÉRIAS – ARQUEIAS E FUNGOS – ASPECTOS TEÓRICOS Metabolismo Microbiano Metabolismo: acumulação e degradação de nutrientes dentro de uma célula. Ele fornece energia e gera substâncias que sustentam a vida. Elementos Essenciais (Mais Frequentes) Os compostos encontrados em uma célula são obtidos ou formados a partir de nutrientes presentes no meio ambiente. Macronutrientes: requeridos pelas células em grandes quantidades. Micronutrientes: requeridos em quantidades muito pequenas (elementos-traço ou fatores de crescimento). Obs.: � O principal elemento-traço é o ferro. Classes Energéticas dos Microrganismos Todos os microrganismos conservam parte da energia liberada nas reações que geram energia, para que possam crescer. A energia pode ser obtida da oxidação de compostos quí- micos ou por meio da luz. • Quimiorganotróficos: oxidam compostos químicos orgânicos para geração de ATP; • Quimiolitotróficos: oxidam compostos químicos inorgânicos para geração de ATP; 5m 2 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias – Arqueias e Fungos – Aspectos Teóricos ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES • Fototróficos: convertem energia luminosa em energia química (ATP): – Fototróficos oxigênicos; – Fototróficos anoxigênicos. Obs.: � Os compostos químicos são sempre oxidados ou utilizam a luz. Vias Metabólicas Enzimas; ATP. Se uma reação resultar em excesso de energia, uma parte dessa energia pode ser captu- rada na forma de ligações de ATP. Assim, uma célula pode quebrar essas mesmas ligações e utilizar a energia liberada para abastecer outras reações. 10m 3 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias – Arqueias e Fungos – Aspectos Teóricos ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES A energia é liberada quando o fosfato terminal é retirado do ATP. As vias catabólicas quebram as macromoléculas em seus componentes mais simples, liberando energia no processo. As vias anabólicas constroem macromoléculas por meio da combinação de moléculas mais simples, utilizando energia no processo. Metabolismo Microbiano As vias metabólicas (sequências de reações químicas) de uma célula são determinadas por suas enzimas, que, por sua vez, são determinadas pela constituição genética da célula. Energia de ativação: quantidade de energia necessária para romper a configuração eletrônica estável de qualquer molécula específica, de forma que os elétrons possam ser rearranjados. 15m 4 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias – Arqueias e Fungos – Aspectos Teóricos ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES A presença de uma enzima reduz a energia de ativação da reação (ver setas). Portanto, mais moléculas do reagente AB são convertidas nos produtos A e B, uma vez que mais molé- culas do reagente AB possuem a energia de ativação necessária para a reação. Taxa de reação: frequência de colisões contendo energia suficiente para desencadear uma reação. Ela depende do número de moléculas reagentes que estejam no nível da energia de ativação ou acima dela. Aumentar a taxa de reação: elevação da temperatura. As moléculas se movem mais rapi- damente, aumentando tanto a frequência das colisões quanto o número de moléculas que atingem o nível da energia de ativação. Nos sistemas vivos, as enzimas aumentam a taxa de reação sem elevar a temperatura. Catalisadores: substâncias que podem acelerar uma reação química sem que ela seja permanentemente alterada. As enzimas são catalisadores biológicos. Cada enzima atua em um substrato(s) específico(s) devido à estrutura de seu sítio ativo e catalisa apenas uma reação. Quando uma enzima e um substrato se combinam, o substrato é transformado e a enzima é recuperada. As enzimas geralmente são proteínas globulares com configurações tridimensionais carac- terísticas. 20m 25m 5 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias – Arqueias e Fungos – Aspectos Teóricos ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Classe Tipo de reação química catalisada Exemplos Oxidorredutase Oxidação-redução, na qual oxigênio e hidrogênio são adquiridos ou perdidos Citocromo oxidase, lactato desidrogenase Transferase Transferência de grupos funcionais, como um grupo amino, grupo acetil ou grupo fosfato Acetato-cinase, alanina deaminase Hidrolase Hidrólise (adição de água) Lipase, sacarase Liase Remoção de grupos de átomos sem hidrólise Oxalato descarboxilase, isocitrato liase Isomerase Rearranjo de átomos dentro de uma molécula Glicose fosfato isomerase, alanina racemase Ligase União de duas moléculas (utilizando a energia geralmente derivada da quebra do ATP) Acetil-CoA sintase, DNA-ligase As enzimas são muito eficientes e podem atuar a temperaturas relativamente baixas. Muitas enzimas existem na célula nas formas ativa e inativa e são sujeitas a vários contro- les celulares, inclusive da velocidade com que trocam de uma forma para outra. ���������������������������������������������������������������������������������Este material foi elaborado pela equipe pedagógica do Gran Cursos Online, de acordo com a aula preparada e ministrada pela professora Debora Martins Coelho Juliani. A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo ministrado na videoaula. Não recomendamos a substituição do estudo em vídeo pela leitura exclu- siva deste material. 1 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos II ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES METABOLISMO E CRESCIMENTO MICROBIANO DE BACTÉRIAS - ASPECTOS TEÓRICOS II Metabolismo microbiano Fatores que influenciam a atividade de uma enzima Temperatura: a temperatura ótima para a maioria das bactérias que produzem doenças no corpo humano é entre 35 e 40ºC. A velocidade da reação declina acima da temperatura ótima devido à desnaturação enzimática, a perda de sua estrutura tridimensional característica. A temperatura entre 35 e 40ºC é considerada compatível com a temperatura do corpo humano. A velocidade da reação começa a declinar, pois a enzima é uma proteína e está sujeita a desnaturação devido a sua estrutura molecular. pH: possuem um pH ótimo próprio, no qual elas são mais ativas. Acima ou abaixo desse valor de pH, a atividade enzimática e, portanto, a velocidade da reação, diminui. É por isso que muitos produtos que necessitam de conservação são acidificados para durarem por mais tempo, pois a redução do pH diminui a atividade enzimática, resultando na diminuição da atividade metabólica de micro-organismos. Concentração do substrato: sob condições celulares normais, as enzimas não estão saturadas com substrato(s). Em um determinado momento, muitas das moléculas de enzima se encontram inativas pela falta de substrato; portanto, a velocidade da reação poderá ser influenciada pela concentração do substrato. Via de regra, dentro das células há mais enzimas do que substratos livre para se ligarem na enzima, dessa forma, as enzimas não ficam saturadas. Quanto mais substrato disponível, maior a velocidade da reação, até determinado ponto de saturação das enzimas. 2 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nosem: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos II ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Inibidores: Os inibidores competitivos competem com o substrato normal pelo sítio ativo da enzima. Os inibidores não competitivos atuam em outra parte da enzima ou no cofator, diminuindo a capacidade da enzima de se combinar com o substrato normal. Moléculas com estruturas tridimensionais complementares ao sítio catalítico da enzima, mas a enzima não gera o produto final da reação. A temperatura é ótima na faixa entre 35 e 40ºC. Quando excede a temperatura de 40ºC, ocorre a desnaturação, resultado no decréscimo da atividade enzimática. A faixa de pH ótimo é entre 4 e 6. Quanto maior a concentração do substrato, a atividade da enzima aumenta. Vias metabólicas de produção de energia Os organismos liberam e armazenam energia a partir de moléculas orgânicas através de uma série de reações controladas, em vez de em um único evento. Reações em cadeia em que o produto de uma é o substrato da próxima e assim por diante. Se a energia fosse liberada toda de uma vez na forma de uma grande quantidade de calor, ela não poderia ser utilizada prontamente para impulsionar as reações químicas e, na verdade, danificaria a célula. 5m 3 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos II ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Para extrair energia dos compostos orgânicos e armazená-la em uma forma química, os organismos transferem os elétrons de um composto para outro através de uma série de reações de oxidação-redução. A maioria dos micro-organismos têm no catabolismo (quebra – gera liberação de energia) de carboidratos (glicose) sua fonte primária de energia. A maioria dos micro-organismos será quimiorganotrófica. ATENÇÃO Metabolismo – produção e armazenamento de energia é uma reação em cadeia de oxi- redução por transferência de elétrons. Para a produção de energia a partir da glicose Respiraça o celular Na respiração anaeróbia, o aceptor final de elétrons é uma substância inorgânica diferente do oxigênio (O2). Respiração aeróbia – aceptor final de elétrons é o oxigênio. Fermentaçao Na fermentação, ATP é gerado somente durante a glicólise. O rendimento de ATP na fermentação é menor que na respiração celular. A glicólise é a oxidação da glicose em ácido pirúvico com a produção de algum ATP e NADH contendo energia. O ciclo de Krebs é a oxidação da acetil-CoA (derivado do ácido pirúvico) em dióxido de carbono, com produção de algum ATP, NADH contendo energia e um outro carreador de elé- tron reduzido, a FADH2 (a forma reduzida da flavina adenina dinucleotídeo). Na cadeia de transporte de elétrons (sistema, NADH e FADH2 são oxidados, cedendo os elétrons que eles transportam dos substratos para uma “cascata” de reações oxidação-redu- ção envolvendo uma série de carreadores de elétrons adicionais. A energia dessas reações é utilizada para gerar uma quantidade considerável de ATP. Na respiração, a maior parte do ATP é gerada por esta terceira etapa. 10m 15m 4 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos II ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES ATENÇÃO Não confunda respiração celular com respiração aeróbica. A respiração é a forma de catabolismo aeróbio ou anaeróbio na qual um doador de elétrons é oxidado com O2 (aeróbio) ou um substituto do O2, como o aceptor terminal de elétrons (anaeróbio). A fermentação é a forma de catabolismo anaeróbio na qual um composto orgânico é tanto doador quanto aceptor de elétrons. Não possui aceptor final de O2. Pode-se considerar a fermentação e a respiração como opções metabólicas alternati- vas: quando o O2 estiver disponível, ocorrerá respiraçao (muito mais ATP é produzido na respiração do que na fermentação). Contudo, se as condições não suportarem a respiração, a fermentaçao pode fornecer energia suficiente para que um organismo possa se desenvolver. 20m 5 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos II ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Crescimento microbiano Divisão celular Crescimento: aumento exponencial (logarítmico) no número de células → resultado da DIVISÃO CELULAR (processo final na vida de uma célula microbiana). ATENÇÃO O crescimento microbiano se refere ao crescimento de quantidade de células e não ao tamanho dela. Fissao binária: processo em que uma célula parental divide-se, originando duas células-filhas. O crescimento microbiano será exponencial em uma potência de base 2. Tempo de geração: tempo necessário para um ciclo de fissão binária → varia de 20 minu- tos, no caso de Escherichia coli, a mais de 18 horas, no caso de Mycobacterium tuberculosis. O tempo de geração influencia na população final de uma bactéria. 25m 30m 6 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos II ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES ATENÇÃO Temos uma célula-mãe (célula procariota que não possui núcleo) e seu material genético dispersa no citoplasma. ���������������������������������������������������������������������������������Este material foi elaborado pela equipe pedagógica do Gran Cursos Online, de acordo com a aula preparada e ministrada pela professora Debora Martins Coelho Juliani. A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo ministrado na videoaula. Não recomendamos a substituição do estudo em vídeo pela leitura exclu- siva deste material. 1 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos III ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES METABOLISMO E CRESCIMENTO MICROBIANO DE BACTÉRIAS - ASPECTOS TEÓRICOS III Crescimento microbiano Ciclo do crescimento O ciclo possui quatro fases. Na fase lag, há pouca divisão celular, porém a atividade metabólica é alta, principalmente porque a bactéria está se preparando para crescer. Na fase log, as bactérias começam a se dividir, é o momento de maior atividade metabólica. Na fase estacionária, há esgotamento de nutrientes. Na fase de morte, o número de mortes passa a ser maior que o número de novas células. Refletem eventos que ocorrem em uma população de células, e não em células individuais. Termos não se aplicam a células individuais, mas somente a populações de células. Quando falamos nas quatros fases do ciclo de crescimento, nos referimos à cultura em batelada (sistema fechado). Em ambiente industrial é utilizado termostato para obter o número exato desejado na população microbiana. 5m 2 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos III ANÁLISES CLÍNICAS Fatores necessários para o crescimento microbiano Temperatura Os micro-organismos possuem faixas ótimas de crescimento de acordo com sua tempera- tura. Eles são divididos em três grupos principais: psicrófilos (piscina – frio – abaixo dos 20ºC), mesófilos (médio – moderada – 35 e 40ºC), termófilos (temperatura – calor – 45 e 80ºC). 10m 15m 3 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias- Aspectos Teóricos III ANÁLISES CLÍNICAS pH Bactérias: 6,5 a 7,5. O metabolismo gera moléculas ácidas que reduzem o pH, resultando em sistema fechado e fase de morte. Fungos: 5 a 6. Pressão osmótica Saturação por sais do meio em que a bactéria está. Quanto maior a saturação maior será a pressão osmótica que a bactéria sofrerá. O crescimento da célula é inibido à medida que a membrana plasmática se afasta da parede celular. Ocorre porque a bactéria está murchando (plasmólise – encolhimento do citoplasma). Pressão osmótica aumentada (meio hipertônico): célula perde água → plasmólise (enco- lhimento do citoplasma). 4 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos III ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES As bactérias halotolerantes toleram algum grau de soluto dissolvido no meio, mas crescem melhor na ausência dele. As bactérias halófilas têm preferência de quantidade de cloreto de sódio. Essa quantidade varia conforme o tipo de bactéria. As bactérias halófilas extremas precisam de grande concentração de soluto para sobreviver. Carbono Átomo mais abundante entre os organismos vivos. Esqueleto estrutural da matéria, necessário para todos os compostos orgânicos que cons- tituem uma célula viva. Metade do peso seco de uma típica célula bacteriana é composta de carbono. Nitrogênio, enxofre e fósforo Síntese de material celular (proteínas, DNA, RNA...). Elementos traço Atuam como cofatores de enzimas. Elementos minerais, como ferro, cobre, molibdênio e zinco. A maioria é essencial às funções de certas enzimas, geralmente como cofatores. Oxigênio É o aceptor final de elétrons. 20m 25m 5 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Aspectos Teóricos III ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Quando se tem um caldo que foi inoculado com bactéria, os aeróbios obrigatórios crescem somente na porção superior do meio de cultura, pois é onde há contato com oxigênio. Os anaeróbicos facultativos crescem, em sua maior parte, na interface do oxigênio mas também há células que crescem em anaerobiose dispersas ao longo do caldo. O oxigênio é tóxico para os anaeróbicos obrigatórios, por isso só crescem distante da interface do oxigênio do meio. ���������������������������������������������������������������������������������Este material foi elaborado pela equipe pedagógica do Gran Cursos Online, de acordo com a aula preparada e ministrada pela professora Debora Martins Coelho Juliani. A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo ministrado na videoaula. Não recomendamos a substituição do estudo em vídeo pela leitura exclu- siva deste material. 1 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metab. e Crescimento Microb. de Bact. - Arqueias e Fungos - Aspectos Teóricos IV ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES METABOLISMO E CRESCIMENTO MICROBIANO DE BACTÉRIAS - ARQUEIAS E FUNGOS - ASPECTOS TEÓRICOS IV CRESCIMENTO MICROBIANO Medida do crescimento microbiano 1. Contagem de células (método de avalição direto no número de células): • Microscópio – total de células: número de células por mililitro de líquido ou grama de material. • Placa – células viáveis: número de unidades formadoras de colônias (UFC), e não o número de células viáveis, uma vez que uma unidade formadora de colônia pode incluir uma ou mais células. 2. Turbidez (avaliação indireto do método de crescimento): • Espectrofotômetro – método indireto: Durante o crescimento exponencial, todos os componentes celulares aumentam proporcionalmente ao aumento do número de célu- las. Quanto maior massa celular, maior a dispersão da luz incidente (maior turbidez). Para Fungos utiliza o método do peso seco: são removidos do meio de crescimento, filtrados para a remoção de outros materiais e secos em um dessecador e pesados. Contagem de células por microscopia direta 5m 10m 2 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metab. e Crescimento Microb. de Bact. - Arqueias e Fungos - Aspectos Teóricos IV ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Contagem de células viáveis (vivas) em placa • Pour plate: microrganismos relativamente sensíveis ao calor podem ser danificados pelo ágar fundido, sendo incapazes de formar colônias e as colônias que se formam abaixo da superfície de uma placa por incorporação não são adequadas para testes de identificação. • Espalhamento em placa: espalha todas as colônias na superfície e evita o contato entre as células e o ágar fundido. Diluição seriada: carga bacteriana muito elevada. Para que se obtenha o número apropriado de colônias, a amostra a ser contada deve quase sempre ser diluída. 15m 3 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metab. e Crescimento Microb. de Bact. - Arqueias e Fungos - Aspectos Teóricos IV ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES Medida de turbidez por espectrofotometria Espectrofotômetro: instrumento que promove a passagem de luz através de uma sus- pensão celular, detectando a quantidade de luz emergente, não dispersa. Quanto maior a quantidade de células maior a dispersão de luz. E com isso, menor será a leitura de chegada de luz na fotocélula. Relacionar um valor de turbidez a um número direto de células: estabelecida uma curva padrão, plotando ambos os parâmetros. 20m 4 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metab. e Crescimento Microb. de Bact. - Arqueias e Fungos - Aspectos Teóricos IV ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES ���������������������������������������������������������������������������������Este material foi elaborado pela equipe pedagógica do Gran Cursos Online, de acordo com a aula preparada e ministrada pela professora Debora Martins Coelho Juliani. A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo ministrado na videoaula. Não recomendamos a substituição do estudo em vídeo pela leitura exclu- siva deste material. 1 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Arqueias e Fungos - Questões ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES METABOLISMO E CRESCIMENTO MICROBIANO DE BACTÉRIAS - ARQUEIAS E FUNGOS - QUESTÕES 1. (FIOCRUZ/2016/TÉCNICO EM SAÚDE PÚBLICA/ANÁLISES CLÍNICAS) Ao considerar- mos a curva de nascimento X morte bacteriana “in vitro”, observe o esquema e considere as afirmativas a seguir: I – Na fase A as bactérias estão dormentes por isso ainda não iniciaram a divisão. II – Na fase Log aproximadamente 100% das bactérias estão em divisão binária. III – A fase C é a mais heterogênea. IV – A Fase de platô ou segunda estacionária é a mais homogênea. V – Na fase D todas as bactérias estão mortas. VI – Na fase Lag as bactérias aumentam de tamanho e realizam intenso metabolismo. VII – A fase B é a mais homogênea e a melhor para realizar um repique. VIII – Na fase de declínio há muita produção de toxina e pouco nutriente. Das afirmativas acima, pode-se dizer que estão corretas somente: a. I, III, VI e VIII. b. II, IV, V e VII. c. II, III, VI, VII e VIII. d. I, IV, e V. e. II, III e VII. 5m 10m 2 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Arqueias e Fungos - Questões ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES COMENTÁRIO Existem quatro fases de crescimento bacteriano: a. Fase lag: período que praticamente não havia divisão celular. As células estavam se preparandopara entrar na fase de divisão, e com isso faziam síntese de enzimas, moléculas. Basicamente é o início da atividade metabólica. b. Fase log (exponencial): máxima atividade metabólica. c. Fase estacionária: equilíbrio entre o número de morte e o número de células novas. d. Morte celular: número de morte é maior que o número de novas células. 2. (IADES/2014/EBSERH/NÍVEL SUPERIOR/BIOMÉDICO) Quanto aos microrganismos termófilos, é correto afirmar que muitos deles apresentam temperatura ótima de cresci- mento na faixa de: a. 50ºC a 60ºC. b. 12ºC a 15ºC. c. 25ºC a 30ºC. d. 30ºC a 37ºC. e. 0ºC a 15ºC. COMENTÁRIO • Psicrófilos: gostam de frio, com temperaturas abaixo de 24º C. • Mesófilos: temperaturas moderadas, na faixa de 35 – 40º C. • Termófilos: gostam de temperaturas acima de 50º C (45 – 80º C). 3. (FIOCRUZ/2016/ANÁLISES CLÍNICAS) O chefe do laboratório de microbiologia entrega ao técnico uma bactéria já isolada para que ele realize o cultivo e avisa que se trata de um microrganismo anaeróbio facultativo, quimiolitotrófico e psicrófilo. O técnico deverá então proceder com a amostra semeando em meio de cultura: a. Rico, realizando em seguida a técnica da vela em recipiente iluminado e incubando na temperatura de 37ºC. b. Seletivo, cultivando-a em jarra de anaerobiose colocada em estufa na temperatu- 15m 3 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Arqueias e Fungos - Questões ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES ra de 28ºC. c. De enriquecimento, por esgotamento e colocar em estufa de CO2 à 45ºC. d. Indicador, na placa de Petri, deixando-a na ausência de luz em temperatura ambiente. e. Enriquecido, usando a técnica do comprimido efervescente, colocando-a, posterior- mente, na geladeira. COMENTÁRIO Anaeróbio facultativo: cresce em anaerobiose, e pode crescer na presença de oxigênio. Quimiolitotrófico: utiliza moléculas inorgânicas em seu metabolismo. Psicrófilo: gosta de frio (abaixo de 20º C). 4. (FIOCRUZ/2016/ANÁLISES CLÍNICAS) O controle de micro-organismos se refere às diferentes formas de se inibir, reduzir, eliminar ou removê-los. O método de escolha, depende do que o técnico pretende fazer e do tipo de material onde o organismo está presente. Este controle pode ser realizado através de métodos físicos ou químicos. Sobre as formas físicas de controle microbiano é correto afirmar que: a. A liofilização é um método de controle que visa retirar toda a água de um determinado material, possibilitando a morte de todos os micro-organismos em um curto período de tempo. b. A filtração consiste na passagem de diferentes substâncias por meio de filtros com po- rosidade muito reduzida. Recentemente para filtragem de bactérias são utilizados filtros de membrana de diferentes materiais, com poros que apresentam tamanho de 1 (µm). c. As baixas temperaturas (0 a 7ºC) possuem efeito bacteriostático sobre a maioria dos micro-organismos. Sua taxa metabólica fica reduzida e eles não se reproduzem ou sintetizam toxinas, uma exceção são os psicrófilos que crescem lentamente em baixas temperaturas. d. O calor úmido é capaz de matar os micro-organismos somente pela desnaturação do DNA, que consiste da ruptura das pontes de hidrogênio que une a dupla hélice. e. A resistência ao calor varia entre diferentes microorganismos, sendo o ponto de morte térmica (PMT) a maior temperatura em que todos os micro-organismos presentes em uma suspensão líquida são eliminados em . 20m 10m 4 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Arqueias e Fungos - Questões ANÁLISES CLÍNICAS A N O TA ÇÕ ES COMENTÁRIO A temperatura é um fator que influencia no crescimento do metabolismo bacteriano. 5. (CESPE/2013/SEGESP/AL/PERITO CRIMINAL/BIOMEDICINA) Acerca dos micro-orga- nismos que causam infecções, julgue o item a seguir. A divisão binária é um modo de divisão celular de bactérias em que o conteúdo genético bacteriano presente no núcleo é dividido igualmente entre as células filhas. COMENTÁRIO Bactéria é procarionte, portanto, não tem organela ou núcleo. O material genético fica disperso no citoplasma. 6. (FGV/2010/FIOCRUZ /TECNOLOGISTA EM SAÚDE/CONTROLE MICROBIOLÓGICO) Assinale a alternativa que indique a sequência correta de procedimentos utilizados no método Pour Plate. a. Homogeneizar as amostras, diluir as amostras, inocular as amostras, adicionar o meio, incubar. b. Homogeneizar as amostras, inocular as amostras, adicionar o meio, incubar. c. Diluir as amostras, inocular as amostras, adicionar o meio, incubar. d. Homogeneizar as amostras, diluir as amostras, adicionar o meio, inocular as amos- tras, incubar. e. Diluir as amostras, homogeneizar as amostras, inocular as amostras, adicionar o meio, incubar. COMENTÁRIO Pour Plate: • Homogeneizar a amostra; • Fazer uma diluição seriada; • Inocular a amostra em uma placa de petri; 25m 5 www.grancursosonline.com.br Viu algum erro neste material? Contate-nos em: degravacoes@grancursosonline.com.br Metabolismo e Crescimento Microbiano de Bactérias - Arqueias e Fungos - Questões ANÁLISES CLÍNICAS • Adicionar o meio fundido; • Incubar. 7. (FIOCRUZ/2016/ANÁLISES CLÍNICAS) Para avaliação da atividade antimicrobiana de um extrato pelo método de micro diluição, utilizou-se inicialmente a concentração de 2 Ming/mL de extrato que foi diluída serialmente em 1:2 até o décimo tubo. Foi introduzido o inóculo bacteriano em turvação correspondente à escala 0,5 de MacFarland e incubado em estufa bacteriológica a 35ºC 1ºC por 24h. A leitura foi realizada e a turbidez apareceu a partir do quinto poço. Tendo em mãos estas informações, podemos afirmar que a CIM do extrato frente à cepa bacteriana testada é de: a. 3x10-3 mg/mL. b. 0,25 mg/mL. c. 0,03 mg/mL. d. 25 μg/mL. e. 0,3 μg/mL. COMENTÁRIO Turbidez indica a massa de célula (crescimento). 2mg/ml 1mg/ml 0,5mg/ml 0,25mg/ml 0,125mg/ml T1 T2 T3 T4 T5 12 12 12 Espectrofotômetro + Crescimento 12 GABARITO 1. c 2. a 3. e 4. c 5. E 6. a 7. b ���������������������������������������������������������������������������������Este material foi elaborado pela equipe pedagógica do Gran Cursos Online, de acordo com a aula preparada e ministrada pela professora Debora Martins Coelho Juliani. A presente degravação tem como objetivo auxiliar no acompanhamento e na revisão do conteúdo ministrado na videoaula. Não recomendamos a substituição do estudo em vídeo pela leitura exclu- siva deste material.
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