Hemoderivados(Hemocomponentes, Método de Cohn, procedimentos de separação e purificação)

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Purificação
Isolamento- Fracionamento
Purificação- Cromatografia
 
 
Formulação- Adição de adjuvantes estabiilzantes
Cortecrioprecipitação
Plasma 
Pobre em crio(Sobrenadante)
centrifuga
refrigerada
Processos de fracionamento
Congelado e estocado
Reator
Rico em crio(Preciptado)
-30ºC
Hemocomponetes x hemoderivados
Bolsa de sangue
Concentrado 
de hemácias
 
Ouro líquido
 
C. de
plaquetas
 
Plasma comum 
PFC
 
Crioprecipitado
 
hemoderivados
Hemocomponentes- Obtidos por processo
físico(centrigugação, congelamento)
Hemoderivados:- Obtidos por processo
físico-químicos (Indústria)
Métodos de producão
Método de Cohn + Cromatografia
Albumina, globulinas,
 fator XVIII, F.IX
Distribuição das proteínas
Plasma
Fração I Fração II + III Fração IV Fração V
Fibrinogênio; 
Fator XVII; 
Fator de van 
de Willenbrand(vWF)
IgA, Igm, IgG, 
f. coagulação
 α, β 
globullina
Albumina
Etapas de producao
Medicamentos dotados de identidade,
especificadade
. Cromatografia
(Muito caro)
 .Cohn+ Ultrafiltração
(Só albumina)
Descongelmento
2-4ºC
3ºC o crio começa 
a se dissolver
Processo
2- Morfologia do precipitado
Interação hidrofóbica
Álcool
Ácido Caprílico (Imunoglobulina, inativação viral))
Polietilenoglicol (PEG)
Sulfato de amônio
Cromatografia
Exlclusão
Troca iônica- mais usada
Afinidade
AGENTES PRECEPITANTES
Agitação
1- Evitar superconcentração de 
agentes precepitantes
 Desnaturação;
Co-precepitação de proteínass
agitação precipitado
Princípios da cromatografia
Fase estacionária (Líquido ou sólido)
Fase móvel- (Líquido ou gás)
Separar as misturas de acordo com a 
afinidade dos seus componentes com uma:
Exclusão
Proteínas menores- penetram nas
partículas porosas da substância
estacionária(resina, geralmente)
 Proteínas maiores- Passam direto com
maior velocidade, logo emergem primeiro
O tampão( fase móvel) empurra as
proteínas atra´ves da resina
Eluição isocrática
 A fase móvel não varia
Eluição gradiente
A fase muda de concentração
100%---50%--20%--
Produtos novos
hemoderivados já definido
Afinidade
Interação de uma proteína alvo, a um ligante
imobilizado na matriz(Fase estacionária-Sólida)
Fase móvel- Líquido
Antígeno--Anticorpo
Hormônio--Receptor
Tipos de interação:
Ec: Fatores de coagulação---Heparina
Ligante competitivo
Alteração de pH
Como vai eluir?
Competição entre os íons
Crioprecipitado não vai pra filtração
 
 
Centrifuga, pois sua consistência é espessa e
viscosa
Ultrafiltração
A resina(na faixa estacionária) na troca iônica pode
estar carregada positivamente ou negativamente, em
uma ampla faixa de pH
Partículas de cargas opostas absorvidas a
superficie da resina esaída da coluna das
moléculas com a mesma carga
Troca iônica
DEAE= Dietilaminaetil-celulose
Atrai cargas -
CM- Carboximetil-celulose
Atrai cargas positivas
2 etapas:
A adição do sal 
Neutralizar a interação proteína-resina
pH:
Também serve, mas pode
 desnaturar
 proteínas e precipitá-las
Purificação final
Osmose reversa- Obtenção de água 
para produção de injetáveis
Os hemoderivados são produtos injetáveis, 
logo necessário vários tipos de filtração
Variação do tipo de membrana
=
tamanho da porosidade
Força motriz- Gradiente de pressão
Albumina
Traços de globulinas
Sais e álcool
Concentrado
Permeado