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Prova Prática 2 Parasitologia Humana - Helmintos e artrópodes – O diagnóstico da maioria das parasitoses intestinais é realizado por exame de fezes; Estágios geralmente utilizados no diagnóstico: ovos e as larvas de helmintos A identificação dos parasitos é realizada por critérios morfológicos; A coleta mal feita e a má conservação da amostra podem afetar a morfologia dos parasitos; O HPJ é o método mais utilizado no diagnóstico parasitológico de fezes Método HPJ Material: Fezes formadas, recém emitidas, refrigeradas ou armazenadas em conservante; Objetivo: Pesquisar todos os tipos de ovos, cistos e larvas; Parasitos detectados se presentes em grande quantidade: Giardia lamblia, Entamoeba coli, Entamoeba histolytica, Endolimax nana, Iodamoeba butschlii, Tricuris, Ancylostoma/Necator, Ascaris, Enterobius, H. nana, Taenia, etc Procedimento: Colocar cerca de 2g de fezes em um frasco contendo cerca de 20 mL de água filtrada e dissolver bem com bastão de vidro; Filtrar a suspensão com uma gaze dobrada em quatro ou peneira de malha com 100 malhas por cm², para um cálice cônico de 200 ml. Completar o volume do cálice com água filtrada; Deixar a suspensão em repouso por 2 horas. Coletar com um canudinho o sedimento e transferir para uma lâmina Acrescentar uma gota de lugol e espalhar na lâmina. Examinar no mínimo duas lâminas nos aumentos de 100X e 400X. O microscópio deve estar com o condensador abaixado e diafragma pouco aberto. A visualização dos parasitos é melhor em pouca luminosidade; Ovos e larvas são identificados no aumento de 100x; Cistos e trofozoítos são vistos no aumento de 100x e identificados no aumento de 400x. Ovos de Enterobius vermicularis Adulto de Enterobius: Ovos de Trichuris: Adultos de Trichuris Ovos de Ascaris Adultos de Ascaris: Métodos de Baerman-Moraes e Rugai Princípio do método: termo-hidrotropismo positivo; Objetivo: pesquisa de larvas de Strongyloides stercoralis Coletar entre três a cinco amostras, em dias alternados para confirmação da presença de larvas rabditoides; Ocasionalmente, podem ser visualizadas larvas filarióides em fezes envelhecidas ou em casos com ritmo intestinal lento; ou em fezes frescas de indivíduos hiperinfectados; A identificação morfológica correta das larvas é fundamental devido a semelhança com a dos ancilostomídeos; Em fezes diarreicas, na vigência de hiperinfecção, pode-se identificar larvas acompanhadas de ovos de S. stercoralis Material: Fezes formadas frescas; Suporte para funis; peneira, funis, mangueira, gaze, termômetro, béquer, centrífuga, tubos de ensaio e pinça Objetivo: Pesquisar larvas de Strongyloides; Parasitos detectados se presentes em grande quantidade: Strongyloides. Procedimento: Com uma espátula, coletar entre 8 a 10g de fezes. Colocar as fezes em gaze dobrada em quatro partes sobre uma peneira ou parasitofiltro; Colocar o material assim preparado sobre um funil, contendo um tubo de borracha conectado a extremidade inferior de sua haste; Obliterar o tubo de borracha com uma pinça de Hoffhan e adicionar, ao funil, água aquecida (45°C) em quantidade suficiente para entrar em contato com as fezes; Deixar uma hora em repouso; Coletar entre 5 a 7mL da água, em um tubo de centrífuga, abrindo-se a pinça; Centrifugar a 1.000 rpm por um minuto; Coletar o sedimento no fundo do tubo de ensaio e colocar sobre uma lâmina, sem desprezar o líquido sobrenadante; Colocar uma gota de lugol sobre a lâmina contendo a amostra; Examinar ao microscópio nas objetivas de 10x e 40X Ovos de Strongyloides: Larvas de Strongyloides: Adultos de Strongyloides: Ovos de ancilostomídeos Larvas de ancilostomídeos: Método Kato-Katz: Material: Fezes formadas, recém emitidas ou refrigeradas; Diarréia?? Kit contendo membrana de malha, papel celofane embebido em verde malaquita, placa perfurada, espátula; Lâminas de microscopia; Objetivo: Pesquisa de ovos de helmintos: Ascaris lumbricóides, Schistosoma mansoni, Trichuris trichiura, Ancylostoma duodenale/Necator americanus, Taenia sp; Método quantitativo padronizado Procedimento: Retirar uma amostra de fezes com o auxílio de uma espátula e colocar sobre um papel-toalha; Depositar sobre as fezes a tela de nylon (malha de 0,09 mm), comprimindo-a com o auxílio da espátula, o que fará com que partes das fezes passe através das malhas; Recolher as fezes filtradas com a espátula e preencher completamente todo o orifício da placa perfurada (42 mg) que deverá estar sobre uma lâmina de microscopia; Passar a lateral da espátula na placa para retirar o excesso de material; Retirar cuidadosamente a placa perfurada de modo a ficar sobre a lâmina um cilindro de material fecal; Colocar sobre o cilindro de fezes uma lamínula de papel celofane embebida na solução verde-malaquita; Inverter a lâmina sobre uma superfície lisa e fazer pressão com o polegar sobre a região onde se encontra o cilindro de fezes, de modo que o material se espalhe uniformemente entre a lâmina e a lamínula; Deixar a preparação por 60 minutos a temperatura ambiente; Levar a preparação ao microscópio para contagem de ovos de helmintos; Multiplicar o resultado por 23,80 e colocar o resultado em nº de ovos/grama de fezes Ovos de Schistosoma: Adultos de Schistosoma: Larvas de Schistosoma – Miracídio - Larvas de Schistosoma – Cercárias – Hospedeiros intermediários de Schistosoma: Método de Graham Os exames de fezes convencionais muitas vezes não são efetivos para o diagnóstico da enterobiose; A fêmea migra durante a noite do cólon para a região perianal e depositam os ovos nessa região TAMIZAÇÃO: Consiste em colocar a amostra fecal em uma peneira ou parasito-filtro e levá-la em uma pia utilizando jato de água corrente; A tamização é utilizada para busca de proglotes de Taenia solium e Taenia saginata; Ocasionalmente podem ser encontrados vermes adultos de Ascaris lumbricoides, Taenia, Enterobius vermiculares e de ancilostomídeos. Diagnóstico: Clínico: prurido anal noturno e continuado; Laboratorial: O exame de fezes muitas vezes não é efetivo para o diagnóstico da enterobiose; O melhor método é o da fita adesiva transparente (Graham); Método de Graham – PROCEDIMENTO: Recorte um pedaço de 8 a 10 cm de fita adesiva transparente; Coloque a fita adesiva (parte não adesiva) em contato com um tubo de ensaio ou dedo indicador; Insira o tubo contendo a fita adesiva na região perianal do paciente; Coloque a fita adesiva como se fosse uma lamínula sobre uma lâmina de microscopia; Examine ao microscópio nas objetivas de 10 e 40X. O executor do exame deve ter cuidado para não se contaminar A técnica deve ser feita ao amanhecer, antes de a pessoa banhar-se, e repetida em dias sucessivos, caso dê negativo; Se não for possível examinar a lâmina no mesmo dia, a conserve em geladeira, envolta em papel alumínio. Identificação das formas parasitárias de Tênia: PROGLOTES DE Taenia solium: Proglote quadrangular Útero com 7-15 ramificações Dendrítica 80 mil ovos PROGLOTES DE Taenia saginata: Proglote retangular Útero com 15-30 ramificações Dicotômica 160 mil ovos Artrópodes NEMATOCERA - Insetos (A) que possuem antenas longas (mais de seis segmentos), larvas com cabeça bem desenvolvida e pupa nua, que dá nascimento aos adultos através de fenda dorsal em forma de T. CYCLORRAPHA - Moscas (B) que trazem na região frontal da cabeça uma sutura curva (sutura ptilineal) e uma cicatriz, a lúnula voltada para baixo. Larvas acéfalas. BRACHYCERA – Parecem moscas grandes (C), massem lúnula e com 3-4 segmentos antenais; larvas acéfalas.
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