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Sandy Caroline • CRESCIMENTO CELULAR E FISSÃO BINÁRIA Crescimento: aumento no número de células À medida que as macromoléculas se acumulam no citoplasma de uma célula, elas são montadas em novas estruturas, como parede celular, membrana citoplasmática, flagelos, ribossomos, corpos de inclusão, complexos enzimáticos e assim por diante FISSÃO BINÁRIA duas células originam-se a partir de uma em uma cultura de bactéria bacilar em crescimento, as células elogam-se até atingirem o dobro do seu comprimento original, quando então formam um septo que separa a célula em duas células filhas geração é quando uma célula se divide em duas, e o tempo requerido para esse processo é chamado de tempo de geração o tempo necessário para uma geração em uma determinada espécie bacteriana é altamente variável, sendo dependente de fatores nutricionais e genéticos PROTEÍNAS FTS E DIVISÃO CELULAR As proteínas Fts são essenciais à divisão celular Ao interagirem, as proteínas Fts formam o aparelho de divisão celular denominado de divisomo O divisomo coordena a síntese do novo material da membrana citoplasmática e da parede celular, denominado septo de divisão, no centro de uma célula bacilar, até que ela atinja o dobro de seu comprimento original SÍNTESE DE PEPTIDEOGLICANO E DIVISÃO CELULAR A camada de peptideoglicano pode ser considerada como um tecido resiste ao estresse A síntese do novo peptideoglicano durante o crescimento envolve a clivagem controlada do peptideoglicano preexistente por autolisinas, com a inserção A junção entre o peptideoglicano novo e o antigo forma um suco na superfície celular de bactérias Gram-positivas, a faixa da parede Durante o crescimento o crescimento bacteriano, nova parede celular é sintetizada pela inserção de novas unidades do tetrapeptídeo glicano à parede preexistente TRANSPEPTIDAÇÃO E PENICILINA É a transpeptidação que forma as ligações cruzadas entre os resíduos de ácido murânico de cadeias adjacentes de glicano A transpeptidação apresenta importância médica, uma vez que corresponde à reação inibida pelo antibiótico penicilina Quando a penicilina se liga às proteínas de ligação à penicilina, elas perdem sua atividade catalítica As reações de transpeptidação completam a ligação cruzada das cadeias de peptideoglicano após a incorporação de novos precursores CRESCIMENTO DE POPULAÇÕES BACTERIANAS O crescimento bacteriano é definido como um aumento do número de células em uma população Durante a divisão celular, uma célula transforma-se em duas. E durante o tempo necessário para que esse processo ocorra (tempo de geração), o número total de células e a massa duplicam-se Em geral, a maioria das bactérias apresentam tempos de geração menores que a maioria dos eucariotos microbianos O tempo de geração de um dado organismo em cultura depende do meio e das condições de incubação utilizados CRESCIMENTO EXPONENCIAL É o padrão de aumento populacional, em que o número de células é duplicado durante um intervalo de tempo constante Sandy Caroline • Inicialmente o aumento do número de células é relativamente lento, mas posteriormente torna-se acelerado O CICLO DE CRESCIMENTO MICROBIANO A curva de crescimento descreve um ciclo de crescimento completo, incluindo a fase lag, fase exponencial, fase estacionária e a fase de morte FASE LAG Quando uma população microbiana é inoculada em um novo meio, o crescimento é iniciado somente após um período de tempo – fase lag – Se uma cultura em crescimento exponencial for transferida ao mesmo meio, nas mesmas condições de crescimento, a fase lag não ocorre Uma fase lag é também observada quando uma população microbiana é transferida de um meio de cultura rico para um mais pobre FASE EXPONENCIAL Durante a fase exponencial de crescimento, cada célula divide-se formando duas células, cada qual também se divide originando mais duas células, e assim por diante, durante um período curto ou longo, dependendo dos recursos disponíveis e de outros fatores A taxa de crescimento exponencial é influenciada pelas condições ambientais (temperatura, composição do meio de cultura), bem como pelas características genéticas do próprio organismo FASE ESTACIONÁRIA Em uma cultura em batelada, como em um tubo ou frasco, o crescimento exponencial é limitado Eventos que limitam o crescimento: o consumo de um nutriente essencial presente no meio de cultura ou um produto de excreção do organismo acumula0se no meio, inibindo o crescimento É nessa fase que o crescimento exponencial cessa e a população atinge a fase estacionária Na fase estacionaria a taxa de crescimento da população corresponde a zero Em alguns casos, pode haver divisão celular durante a fase estacionária, porém não há aumento líquido no número de células Crescimento críptico: equilíbrio que ocorre devido ao fato de algumas células da população exibirem crescimento, enquanto outras morrem FASE DE MORTE Se uma população que atingiu a fase estacionária permanecer em incubação, as células poderão permanecer vivas e metabolizando, mas eventualmente morrerão Os termos fase lag, fase exponencial, fase estacionária e fase de morte não se aplicam a células individuais, mas somente a populações de células Geralmente há uma fase lag, seguida pelo início do crescimento de forma exponencial. À medida que nutrientes essenciais são depletados ou produtos tóxicos são sintetizados, o crescimento cessa e a população entra na fase estacionária. Caso a cultura continue sendo incubada, as células podem começar a morrer QUIMIOSTATO É o tipo mais comum de equipamento para culturas contínuas No quimiostato, a taxa de crescimento e a densidade populacional de uma cultura podem ser controladas de forma independente e simultânea Com o quimiostato, é possível preparar populações bacterianas misturas ou puras e avaliar-se a competitividade entre diferentes organismos em relação às concentrações de um nutriente em particular Dispositivos de cultura contínua (quimiostato) são uma forma de manter populações celulares em crescimento exponencial por longos períodos de tempo Em um quimiostato, a taxa de diluição da cultura determina a taxa de crescimento TEMPERATURA E CRESCIMENTO MICROBIANO Fatores essenciais para o crescimento dos microrganismos: pH, disponibilidade de água e oxigênio AS TEMPERATURAS CARDEAIS À medida que a temperatura aumenta dentro de uma determinada faixa, há um aumento do crescimento e Sandy Caroline • das atividades metabólicas até um ponto, a partir do qual as reações de desnaturação passam a atuar Para cada microrganismo há uma temperatura mínima, abaixo da qual o crescimento não é possível, uma temperatura ótima, onde o crescimento ocorre rapidamente, e uma temperatura máxima, acima da qual o crescimento torna-se impossível Esses três tipos de temperaturas são denominados de temperaturas cardeais CLASSE TÉRMICAS DE ORGANISMOS Existem quatro grupos de microrganismos, conforme as temperaturas ótimas de crescimento: psicrófilos, com o ponto ótimo situado em baixas temperaturas; mesófilos, com o ponto ótimo, em temperaturas medianas; termófilos, com o ponto ótimo, em altas temperaturas; e hipertermófilos, com o ponto ótimo, correspondendo a temperaturas muito elevadas Os mesófilos são encontrados em animais de sangue quente, assim como em ambientes terrestres e aquáticos de latitudes temperadas e tropicais Psicrófilos e termófilos são encontrados em ambientes de frio e calor incomuns, respectivamente Os hipertermófilos são encontrados em hábitats extremamente quentes, como fontes terminais, gêiseres e fendas hidrotermais no fundo do mar A temperatura é o principal fator ambiental que controla o crescimentomicrobiano. As temperaturas cardeais descrevem as temperaturas mínima, ótima e máxima, nas quais cada organismo é capaz de crescer CRESCIMENTO MICROBIANO EM BAIXAS TEMPERATURAS É natural considerar-se os ambientes muitos frios e muitos quentes como ‘’extremos’’ Os organismos que vivem nesses ambientes são denominados extremófilos MICRORGANISMOS PSICRÓFILOS São os microrganismos cuja temperatura ótima de crescimento situa-se em baixas temperaturas A temperatura ótima de crescimento é de 15ºC ou inferior; e a temperatura máxima situada abaixo de 20ºC Organismos capazes de crescer a 0ºC, mas com ótimo entre 20-40ºC, são denominados psicrotolerantes ADAPTAÇÕES MOLECULARES À PSICROFILIA Os psicrófilos produzem enzimas que atuam otimamente no frio, sendo facilmente desnaturadas ou inativadas em temperaturas bastante moderadas Enzimas ativas em baixas temperaturas apresentam maiores quantidades de α-hélices e menores quantidades de ligações fracas Os organismos apresentando temperaturas ótimas baixas são denominados psicrófilos, e os Sandy Caroline • representantes mais extremos habitam ambientes permanentemente frios CRESCIMENTO MICROBIANO EM AL TAS TEMPERATURAS Os termófilos apresentam uma temperatura ótima de crescimento superior a 45ºC, enquanto os hipertermófilos apresentam seu ótimo superior a 80ºC HIPERTERMÓFILOS EM FONTES TERMAIS Uma variedade de hipertermófilos pode ser encontrada em fontes termais ferventes É conhecida uma variedade de tipos morfológicos e fisiológicos de Bacteria e Archaea TERMÓFILOS Organismos procarióticos são capazes de crescer em temperaturas muito superiores àquelas que permitem o crescimento de eucariotos; os procariotos mais termófilos correspondem a certas espécies de Archaea; organismos não fototróficos são capazes de crescer em temperaturas mais altas do que os organismos fototróficos Os termófilos e hipertermófilos são interessantes não somente por questões biológicas básicas, mas por serem vantajosos em processos industriais e biotecnológicos Os organismos com temperaturas ótimas de crescimento entre 45 e 80ºC são denominados termófilos enquanto aqueles com ótimos superiores a 80ºC são denominados hipertermófilos Termófilos e hipertermófilos produzem macromoléculas termoestáveis; nesse caso, os termófilos possuem lipídeos ricos em ácidos graxos saturados (ácidos graxos saturados criam um ambiente mais fortemente hidrofóbico do que os ácidos graxos insaturados, auxiliando na estabilidade da membrana) e os hipertermófilos apresentam hidrocarbonetos, ao invés dos ácidos graxos, e uma monocamada lipídica OUTROS FATORES AMBIENTAIS QUE AFETAM O CRESCIMENTO Outros fatores: pH, osmolaridade e oxigênio CRESCIMENTO MICROBIANO EM PH BAIXO OU ALTO Uma alteração de uma unidade de pH representa uma variação de dez vezes na concentração de íons hidrogênio Cada microrganismo possui uma faixa de pH em que o crescimento é possível e normalmente exibe um pH ótimo de crescimento bem definido ACIDÓFILOS São os organismos que apresentam crescimento ótimo em pH abaixo de 6 As bactérias acidófilas obrigatórias incluem espécies de Acidithiobacillus e vários gêneros de Archaea, incluindo Sulfolobus, Thermoplasma e Ferroplasma ALCALIFÍLICOS São os microrganismos que apresentam pH ótimo de 9 ou superior; encontrados em lagos ricos em carbonato de sódio e em solos contendo alta concentração de carbonato Comum nas espécies de Bacillus, como Bacillus firmus PH INTRACELULAR É do meio extracelular que é medido o pH ótimo para o crescimento de qualquer organismo O pH intracelular deve permanecer relativamente próximo à neutralidade, a fim de evitar a destruição das macromoléculas celulares TAMPÕES Tampões são frequentemente adicionados aos meios de cultura microbianos, visando manter o pH relativamente constante. Diferentes tampões devem ser utilizados em diferentes valores de pH O fosfato de potássio e o carbonato de cálcio são excelentes tampões em faixas de pH próximas a neutralidade EFEITOS OSMÓTICOS NO CRESCIMENTO MICROBIANO A disponibilidade de água é também um importante fator que afeta o crescimento microbiano Sandy Caroline • A atividade de água é o que expressa a sua disponibilidade, podendo variar de 0 a 1 A atividade de água de um hábitat microbiano é controlada pela concentração de solutos dissolvidos HALÓFILOS E ORGANISMOS RELACIONADOS O crescimento de halófilos requer uma determinada quantidade de NaCl, porém o valor ótimo varia conforme o organismo Halófilo discreto: requer baixas concentrações de NaCl (1-6%) Halófilo moderado: requer moderadas concentrações de NaCl (7-15%) Halófilo extremo: requer altíssimas concentrações de sal (15-30%) É chamado de osmófilos os organismos capazes de sobreviverem em ambientes ricos em açúcar como soluto; enquanto os que crescem em ambientes extremamente secos de água, são chamados de xerófilos Microrganismos são definidos como não halotolerantes, halotolerantes, halófilos e halófilos extremos Para sobreviver em ambientes contendo alta concentração de solutos, os organismos produzem ou acumulam solutos compatíveis, a fim de manter a célula em um equilíbrio aquoso positivo OXIGÊNIO E CRESCIMENTO MICROBIANO Os microrganismos variam quanto as suas necessidades ou a tolerância ao oxigênio, sendo divididos em grupos Aeróbios: organismos capazes de crescer em grandes tensões de oxigênio Microaerófilos: são aeróbios capazes de utilizar o oxigênio somente quando ele está presente em níveis inferiores aos do ar Muitos aeróbios são facultativos, significando que, em condições nutricionais e culturais apropriadas, podem crescer em ambientes tanto óxicos como anóxicos Anaeróbios: organismos que não são capazes de respirar oxigênio Anaeróbios aerotolerantes: conseguem crescer na presença de oxigênio, embora não o utilizem Anaeróbios obrigatórios: são inibidos ou mesmo mortos pelo oxigênio Os aeróbios facultativos são capazes de crescer tanto na presença como na ausência de oxigênio, são capazes de desenvolver em toda a extensão do tubo. Entretanto, o melhor crescimento ocorre próximo à superfície Os Microaerófilos afastam-se da zona mais óxica Anaeróbios aerotolerantes crescem por toda a extensão do tubo, mas o melhor crescimento não ocorre próximo à superfície, uma vez que eles são apenas capazes de realizar fermentações REVISÃO DOS TERMOS ESSENCIAIS Acidófilo: organismo que apresenta melhor crescimento em pH baixo; Aeróbio: organismo capaz de utilizar oxigênio na respiração Alcalifico: organismo que apresenta crescimento ótimo em pH 9 ou superior Anaeróbio: organismo incapaz de utilizar oxigênio na respiração e cujo crescimento é normalmente inibido por oxigênio Sandy Caroline • Anaeróbio aerotolerantes: microrganismo incapaz de respirar oxigênio, porem cujo crescimento não é afetado pelo oxigênio Anaeróbio obrigatório: organismo incapaz de crescer na presença de oxigênio Atividade de água: razão entre a pressão de vapor do ar em equilíbrio com uma solução e aquela da água pura Contagem em placa: método de contagem de viáveis, no qual o número de colônias presentes em uma placa é utilizado como uma medida do número total Crescimento exponencial: crescimento de uma população microbiana, em que o número de células duplicasse em um intervalo de tempo específico Divisomo: complexo proteico que dirige os processos de divisão celular em procariotos Halófilo: microrganismo que requer NaCl para seu crescimento Halófilo extremo: microrganismo que requer enormes quantidade de sal para seu crescimento Halotolerantes: não requer NaCl para o crescimento, porem é capaz de crescer na presença de sal e, em algunscasos, em altas concentrações de sal Hipertermófilo: procarioto que apresenta temperatura ótima de crescimento de 80ºC Mesófilo: organismo que apresenta melhor crescimento em temperaturas entre 20 e 45ºC Microaerófilo: organismo aeróbio capaz de crescer somente quando as tensões de oxigênio são inferiores aquelas encontradas no ar Osmófilos: organismo que apresenta crescimento ótimo na presença de altas concentrações de soluto, normalmente um açúcar Psicrófilos: organismo com temperatura ótima de crescimento de 15ºC ou inferior e temperatura máxima de crescimento abaixo de 20ºC Psicrotolerante: capaz de crescer em baixas temperaturas, mas cuja temperatura ótima de crescimento é superior a 20ºC Termófilo: organismo cuja temperatura ótima de crescimento encontra-se entre 45 e 80ºC Temperaturas cardeais: temperaturas mínima, máxima e ótima para o crescimento de um determinado organismo Tempo de geração: tempo requerido para a duplicação de uma população de células microbianas Transpeptidação: formação de ligações peptídicas cruzadas entre os resíduos de acido murânico durante a síntese de peptideoglicano
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