Disbiose intestinal e chagas

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Disbiose intestinal na doença de Chagas. 
Uma possível ligação com a patogênese 
 
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DOI: 10.3389 / FCIMB.2020.00402 FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY 
Introdução 
Materiais e métodos 
Resultados 
Discussão 
Sumário 
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Discussão de hoje 
ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
Introdução 
 Período de fase aguda e infecção assintomática crônica (fase indeterminada) 
• Aproximadamente 30-40% dos pacientes: forma determinada (cardíaca ou digestiva) por um período de 20-
30 anos após a infecção inicial. 
• Grupo restante não desenvolverá a doença clinicamente aparente. 
 
A fisiopatologia complexa: resposta imunológica desequilibrada ao parasita, levando à inflamação, estresse 
oxidativo, dano microvascular e fibrose. 
 
Dados anteriores sugerem que o intestino pode desempenhar um papel, não apenas na forma 
digestiva (megacólon) da doença de Chagas, mas também no desenvolvimento da cardiomiopatia: 
• Experimentos usando T. cruzi bioluminescente mostraram que ele circula do intestino para o tecido cardíaco. 
• Além disso, o intestino pode atuar como um reservatório de T. cruzi em infecções recrudescentes 
 
 
 
 
03 
ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
O objetivo deste estudo foi compreender melhor o papel da microbiota intestinal nos 
diferentes fenótipos da doença de Chagas. Foi avaliado o microbioma fecal em 
pacientes com diferentes formas da doença cardíaca, gastrointestinal, indeterminada e 
comparados os resultados com controles saudáveis. 
População de estudo e coleta de amostra 
 
• Diagnóstico de forma cardíaca (n = 30) ou 
indeterminada ( n = 32): foram selecionados de 
um grupo inscrito em uma coorte brasileira 
((REDS II - História Natural da Doença de 
Chagas). 
• Com a forma digestiva (n = 11): em 
acompanhamento no Hospital das Clínicas da 
Universidade de São Paulo e no Instituto de 
Infectologia Emílio Ribas, em São Paulo, Brasil. 
• Soronegativos T. cruzi-doadores de sangue 
(n=31): da Fundação Pró-Sangue foram 
cadastrados como controles. 
• Coletadas em tubos estéreis contendo 12 mL 
de solução de guanidina HCL 6 M / EDTA 0,2 M. 
 
 
Materiais e 
métodos 
Extração de DNA 
 • O DNA genômico foi extraído de 20 g de fezes 
usando o Power Soil DNA Isolation Kit® 
• A quantidade e a pureza do DNA extraído foram 
determinadas fluorometricamente usando o kit 
Qubit® BR dsDNA Assay 
 
Preparação da biblioteca e 
sequenciamento 16S 
 • A região variável 16S rRNA V4 foi amplificada 
usando o conjunto de iniciadores 515/806, 
equenciado usando uma Máquina de Genoma 
Pessoal Ion Torrent ™. 
 
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ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
Análise de dados e análise estatítica 
 
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Resultados 
ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
• O grupo megacólon era composto apenas por 
mulheres. 
• Pacientes com formas cardíacas e 
indeterminadas eram principalmente homens. 
• Os hábitos intestinais relatados no grupo controle 
diferiram ligeiramente dos pacientes com doença 
de Chagas, independentemente do fenótipo da 
doença 
Demografia dos participantes 
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ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
Sequenciamento de métricas 
Resultados 
• Curvas de rarefação demonstrando o número 
estimado de unidades taxonômicas operacionais 
(OTUs) no microbioma de amostras de fezes do 
grupo controle e grupos de doença de Chagas 
(fenótipos indeterminado, cardíaco e megacólon) 
em função do esforço de sequenciamento gerado 
pelo QIIME (Quantitative Insights Plataforma Into 
Microbial Ecology). 
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Resultados 
ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
Caracterização da Microbiota de 
Formas Clínicas 
 
• A composição da microbiota incluiu três gêneros 
predominantes: Bacteroides, Prevotella e 
Faecalibacterium. 
• O grupo cardíaco foi dominado por Prevotella (20,15%). 
• Bacteroides no controle (25,96%), indeterminado 
(14,30%) e megacólon (19,04%), 
• Filo Verrucomicrobia foi mais abundante nos controles 
saudáveis ​ ​do que nos pacientes com a forma cardíaca. 
• Gênero Akkermansia era menos abundante nos 
microbiomas fecais do grupo do fenótipo cardíaco do que 
nos controles saudáveis. 
 
 
• No nível de classe, Alphaproteobacteria e 
Betaproteobacteria foram menos abundantes nos grupos 
cardíaco e megacólon. 
• Pacientes com megacólon chagásico apresentaram 
maiores abundâncias relativas de Rikenellaceae e 
Odoribacteraceae 
 
 
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Akkermansia 
 Associada a um intestino saudável e diminuição 
da inflamação em vários animais. 
O uso de prebióticos que aumentam a 
abundância de Akkermansia no intestino foi 
associado à redução da endotoxemia e da 
resistência à insulina. 
 Este microrganismo também foi associado a 
uma resposta clínica positiva à terapia em 
pacientes com câncer 
 Induz a produção de interleucina (IL) -12, 
favorecendo uma resposta antitumoral. 
Discussão 
ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS 
A diversidade do microbioma intestinal em pacientes com a 
forma cardíaca da doença de Chagas difere dos demais 
fenótipos de Chagas e do grupo controle: 
• Menor abundância do filo Verrucomicrobia nos grupos 
com doença de Chagas. 
• Menor abundância do gênero Akkermansia , 
especialmente entre os pacientes cardíacos. 
 
 
 
 A IL-12 está envolvida na resposta imune ao T. cruzi: Na resposta inata temos IL-12 e 
TNF-α ambos produzidos por macrófagos ou por DCs estimulados por moléculas do T. 
cruzi que interagem com receptores do tipo Toll e com outros receptores reconhecedores 
de (PAMPs). As duas citoninas, juntamente com IFNy, são essenciais para são essenciais 
para o controle inicial pela resposta inata do parasitismo por T. cruzi, 
09 
Os resultados sugerem que a infecção pelo T. cruzi resulta em uma mudança na microbiota intestinal 
em direção a uma comunidade disbiótica, com níveis mais baixos de microrganismos associados à 
saúde, como Akkermansia , especialmente na forma cardíaca da doença. 
 
A associação entre a microbiota intestinal alterada e os diferentes fenótipos da doença de Chagas 
sugere que ele pode desempenhar um papel na patogênese. Isso seria em adição a outros possíveis 
mecanismos multifatoriais, como danos causados ​​por parasitas nos tecidos, resposta imune e distúrbios 
microvasculares e neuronais. 
 No entanto, não se sabe se uma microbiota intestinal já alterada predispõe um sujeito infectado com T. 
cruzi à progressão da doença, ou se a doença estabelecida altera a microbiota intestinal. Mais estudos 
são necessários para determinar os mecanismos subjacentes à associação entre a infecção T. cruzi e a 
microbiota intestinal na doença de Chagas. 
No entanto, os resultados sugerem que a manipulação do microbiota intestinal pode ser uma estratégia 
adicional para controlar o potencial patogênico do T. cruzi em indivíduos infectados. 
 
 
 
 
ESTUDO DA MICROBIOTA DA DOENÇA DE CHAGAS