AULA 8 BIOLOGIA CELULAR

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CENTRO UNIVERSITÁRIO DE CARATINGA GRADUAÇÃO 
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Neste módulo é apresentado algumas técnicas de estudo e identificação das 
estruturas celulares; 
 
 Técnicas de Estudos das Estruturas Celulares. 
 
Os conhecimentos sobre as células se dão pelo aprimoramento e 
aperfeiçoamento dos métodos de investigação e estudo destas. 
O microscópio óptico e também conhecido como microscópio de luz possibilitou 
o descobrimento e o estudo das células e de sua constituição. Além deste tipo de 
microscópio, a tecnologia em torno deste equipamento tem evoluído muito, e hoje os 
cientistas, estudantes e professores, podem contar com diversos aparelhos mais 
modernos de estudo, como por exemplo, microscópio eletrônico de varredura, 
Para que os estudos através do microscópio do sejam possíveis, se faz 
necessário algumas técnicas e fixação e coloração de estruturas celulares, 
conhecidas como técnicas de fixação, histoquímicas ou citoquímicas, ou técnicas que 
visam marcar determinadas estruturas ou moléculas, conhecidas como técnicas de 
fluorescência. 
 
 O microscópio óptico ou microscópio de luz. 
 
Existem duas configurações básicas do microscópio óptico convencional: o 
microscópio simples e o microscópio composto. 
 O microscópio simples, usa uma lente ou conjunto de lentes para ampliar um 
objeto através de ampliação angular sozinho, dando ao espectador uma imagem 
virtual ampliada A utilização de uma única lente convexa ou grupos de lentes ainda se 
encontram em dispositivos de ampliação simples, tais como a lupa, e oculares como 
telescópios e microscópios. Os primeiros estudos da célula com microscópio foram 
realizados por Galileu. O microscópio composto é constituído por três sistemas de 
lentes: o condensador, a objetiva e a ocular. O condensador tem como finalidade 
MÓDULO 8 
 
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projetar um cone de luz sobre as células que estão sendo examinadas no microscópio, 
a objetiva projeta a imagem, e a ocular amplia novamente. O que determina a riqueza 
de detalhes da imagem neste tipo de sistema óptico é o seu limite de resolução, e não 
o seu poder de aumentar o tamanho dos objetos. A propriedade de aumentar apenas 
tem valor prático se acompanhada de um aumento paralelo do poder resolutivo. O 
limite de resolução depende essencialmente da objetiva. A ocular não pode 
acrescentar detalhes à imagem; sua função é apenas aumentar de tamanho a 
imagem, que é projetada em seu plano de foco pela objetiva. 
Os microscópios ópticos possuem poder de resolução, ou seja, uma 
capacidade e limite de separar imagens e detalhes desta, e das células ou estruturas 
em análise. 
 Dependendo do poder de resolução de um microscópio, do feixe de luz 
empregado, do conjunto de sistema óptico em questão, e das técnicas de fixação, ou 
do interesse do estudo, poderá ser empregado no estudo o microscópio de óptico de 
polarização, microscópio de contraste de fase ou microscópio confocal. São diferentes 
tipos de microscópios que possuem finalidades variadas no estudo das células. E 
existe ainda o microscópio digital, que tem sido muito empregado em aulas e 
laboratórios de pesquisa e estudos diversos sobre celular. 
O microscópio digital é aquele que apresenta uma câmera digital que permite 
a observação da amostra com o auxílio de um computador. Outras partes do 
microscópio também podem ser controladas por computadores atingindo maiores e 
mais complexos níveis de automação. A partir da digitalização obtém-se uma melhor 
análise das imagens como, por exemplo, medição de tamanhos e quantificação de 
manchas. 
 
 Microscópio de Eletrônico de Varredura. 
 
Quando pensamos em avançar um pouco mais nos estudos das dimensões 
celulares, suas estruturas em forma tridimensional, pode ser utilizado o microscópio 
eletrônico de varredura (MEV), é um tipo de microscópio eletrônico capaz de 
produzir imagens de alta resolução da superfície de uma amostram, também é útil 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Microsc%C3%B3pio_eletr%C3%B4nico
https://pt.wikipedia.org/wiki/Imagem
https://pt.wikipedia.org/wiki/Resolu%C3%A7%C3%A3o_de_imagem
 
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para verificar a composição e outras características do material que compõem as 
amostras. 
 O princípio de funcionamento do microscópio eletrônico de varredura consiste 
na utilização de um feixe de elétrons, guiado por um sistema de bobinas de deflexão, 
que "varre" a superfície da amostra ponto a ponto e transmite o sinal do detector a 
uma tela catódica. A varredura é sincronizada com aquela do feixe incidente. Este tipo 
de microscópio possui diversos avanços tecnológicos e aplicações, e por isso, 
atualmente existe uma variação grande de opção de modelos, como por exemplo, 
podemos contar com a Microscopia eletrônica de varredura convencional, Microscopia 
eletrônica de varredura de baixo vácuo (LVSEM) Microscopia eletrônica de varredura 
criogênico (Cryo-SEM),Microscópio eletrônico de varredura com feixe focado de íons, 
Microscópio eletrônico de varredura ambiental (ESEM)Microscópio eletrônico de 
varredura a baixa voltagem (MEVBV). 
 
 
 Técnica de Citoquímica. 
 
A Citoquímica é uma técnica de coloração usada em exames citopatológicos 
ou em estudo e pesquisas científicas, e quando usado em exames histopatológicos 
chamada histoquímica. A coloração básica de rotina consiste em substâncias 
conhecidas como: Hematoxilina & Eosina, o H&E na histopatologia ou o Panótico 
rápido na citopatologia. São diversos tipos de colorações especiais, quando elas 
entram em contato com determinadas estruturas da amostra, passam por uma reação 
e tem sua cor alterada 
Por exemplo, t uma amostra que em coloração de rotina mostrou se tratar de 
uma granuloma, mas não fica evidente a causa desse processo, pode-se selecionar 
outros métodos para confirmar a causa da lesão, ou suspeita fúngica, fazer a 
aplicação do método de Grocott, que vai marcar esses microrganismos na cor preta 
e outras estruturas em outras cores. Outra coloração que pode ser utilizada em 
processo fúngico é o Ácido Periódico Schiff (PAS), que é também aplicado para 
marcar glicoproteínas. 
Outra coloração bastante utilizada é o May-Gruenwald-Giemsa, em amostras 
de medula óssea e muito utilizado em amostras citopatológicas de tumores como 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Composi%C3%A7%C3%A3o_qu%C3%ADmica
https://pt.wikipedia.org/wiki/El%C3%A9tron
https://pt.wikipedia.org/wiki/Indutor
https://pt.wikipedia.org/wiki/Detector
https://pt.wikipedia.org/wiki/Tubo_de_raios_cat%C3%B3dicos
 
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Mastocitoma, pois cora muito bem os grânulos dessas células. Ziehl-Neelsen é uma 
coloração muito utilizada para marcação de Bacilos Álcool-Ácido Resistentes (BAAR), 
as micobactérias como por exemplo Mycobacterium tuberculosis, agente da 
tuberculose, e pode ser utilizada em citopatologia e histopatologia. 
 
 Técnica de Microscopia de fluorescência. 
 
A fluorescência é a propriedade que algumas substâncias possuem, que após 
serem excitadas com radiação de baixo comprimento de onda, resulta na emissão de 
radiação de maior comprimento de onda. Assim, determinadas substâncias absorvem 
a energia da luz ultravioleta e emitem depois radiação dentro do espectro de luz 
visível. 
Um dos equipamentos que permite a observação da fluorescência denomina-
se microscópio de fluorescência e a sua descoberta constituiu um enorme 
progresso nos estudos das estruturas celulares e dos seus constituintes. A imagem 
observada é o resultado da radiação eletromagnética emitida pelas moléculas que 
absorveram a excitação primária e reemitiram uma luz com maior comprimento de 
onda. Usa-se para detectar substâncias com autofluorescência(vitamina A) ou 
substâncias marcadas com fluorocromos. Os fluorocromos, que poderão ser 
conjugados com anticorpos, tornam possível a localização e identificação de 
moléculas individuais que reagem com o anticorpo. Esta aplicação, é designada 
por imunofluorescência, sendo uma das mais importantes no contexto 
da microscopia de fluorescência. 
A preparação de amostras para microscopia de fluorescência é semelhante à 
preparação das amostras para os restantes tipos de microscópio. Contudo, existem 
alguns aspectos que devem ser tomados em consideração para a obtenção de bons 
resultados. De ressalvar que é importante evitar usar reagentes ou materiais que 
sejam fluorescentes ou que possam estar contaminados com materiais fluorescentes. 
A técnica de preparação das amostras depende essencialmente do tipo de 
material. O material biológico é geralmente seccionado, em secções muito finas (na 
ordem das 3μm) que são colocadas em lâminas. 
 
ATIVIDADE 8 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Fluoresc%C3%AAncia
https://pt.wikipedia.org/wiki/Luz_ultravioleta
https://pt.wikipedia.org/wiki/Luz_vis%C3%ADvel
https://pt.wikipedia.org/wiki/Luz_vis%C3%ADvel
https://pt.wikipedia.org/wiki/Fluoresc%C3%AAncia
https://pt.wikipedia.org/wiki/Radia%C3%A7%C3%A3o_electromagn%C3%A9tica
https://pt.wikipedia.org/wiki/Mol%C3%A9cula
https://pt.wikipedia.org/wiki/Vitamina_A
https://pt.wikipedia.org/wiki/Fluor%C3%B3foro
https://pt.wikipedia.org/wiki/Anticorpo
https://pt.wikipedia.org/wiki/Imunofluoresc%C3%AAncia
 
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Após a leitura, retire do texto as informações mais importantes. Esse é o 
seu RESUMO das ideias principais. PARA CONTINUAR SEUS ESTUDOS, POSTE 
NO ITEM “APRIMORANDO CONCEITOS – RESUMO 8”. 
 
Observação: Após o término deste módulo, o aluno deverá apresentar o questionário 
1 e 2 resolvidos na plataforma. E após a apresentação destes questionários, realizar 
a avalição final do módulo. 
 
	 Técnica de Citoquímica.