POP 2 - Glicídios não redutores em sacarose

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Procedimento Operacional Padrão
POP 1
Glicídios
Data de elaboração: Data de revisão: Versão:
Elaborado por: Andressa Dantas e Eloá Avelino Pg. ___/_____
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1. Método:
Determinação de glicídios não redutores em sacarose
2. Descrição:
Os hidratos de carbono, têm-se os mais variados tipos de substâncias, desde os
monossacarídeos, representados pela glicose, os dissacarídeos, dos quais os mais
frequentes em alimentos são a sacarose e a lactose, até os polissacarídeos, como
amido e celulose. Qualquer que seja o produto a ser analisado, é inicialmente
necessária a obtenção de uma solução dos glicídios presentes, livres de substâncias
que possam interferir no processo escolhido para a sua determinação. Para isso,
usam-se soluções de “clarificadores” (creme alumina, solução neutra de acetato de
chumbo, solução básica de acetato de chumbo, ácido fosfotúngstico) as quais
precipitam as substâncias interferentes.
3. Princípio:
Os métodos de determinação de glicídios estão baseados nas propriedades físicas
das suas soluções ou no poder redutor dos glicídios mais simples (aos quais se pode
chegar por hidrólise, no caso dos mais complexos). Os métodos de redução
resumem-se em pesar ou titular a quantidade de óxido de Cu I precipitado de uma
solução de íons de Cu II por um volume conhecido da solução de glicídios ou medir o
volume da solução de glicídios necessário para reduzir completamente um volume
conhecido da solução de cobre II. Os resultados são calculados mediante fatores e,
geralmente, as determinações de glicídios dos não-redutores são calculadas em
sacarose.
4. Materiais, vidrarias e equipamentos:
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● Balança analítica
● Espátula de metal
● Banho-maria
● Béquer de 100 mL
● Proveta de 50 mL
● Balão volumétrico de 100 mL
● Frasco Erlenmeyer de 250 mL
● Funil de vidro
● Balão de fundo chato de 250 mL
● Pipetas volumétricas de 10 e 20 mL
● Bureta automática de 10 mL
● Buretas de 10 e 25 mL
● Chapa elétrica.
5. Reagentes e soluções
● Ácido clorídrico
● Solução de hidróxido de sódio a 40% m/v
● Carbonato de sódio anidro
● Ferrocianeto de potássio a 6% m/v
● Acetato de zinco a 12% m/v
● Soluções de Fehling A e B tituladas
6. Preparo das amostras
● Amostras sólidas em pó ou grânulos: 1º- Retirar partes representativas da
amostra, em quantidade suficiente para determinações em triplicata e
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repetições; 2º - Fragmentar a amostra. 3º - Transferir com o auxílio de uma
espátula 10 g para um cadinho de porcelana previamente preparado.
● Amostras sólidas: 1º- Retirar , partes representativas da amostra, em
quantidade suficiente pºara determinações em triplicata e repetições; 2º -
Fragmentar a amostra. 3º - Transferir com o auxílio de uma espátula 10 g para
um cadinho de porcelana previamente preparado.
● Amostras líquidas: 1º - Agitar a amostra até homogeneizá-la bem; 2º -
Filtrar, se for necessário; 3º - Transferir, com o auxílio de uma pipeta, um
volume 10 mL da amostra para um cadinho de porcelana previamente
preparado; 4º - Evaporar em banho-maria.
● Sorvetes e gelados: 1º - Deixar em repouso à temperatura ambiente (para
liquefazer a amostra); 2º - Homogeneizar; 3º- Guardar na geladeira em frasco
com rolhas.
● Produtos semi-sólidos ou misturas líquidas ou sólidas: 1º - Ralar
produtos como queijo e chocolate; 2º - Retirar a amostra por quarteamento.
● Pastas semi-viscosas e líquidos contendo sólidos: Seguem um único
passo - Homogeneizar o produto em liquidificador ou multiprocessador
7. Procedimento Experimental (descrição da análise)
1. Transferir com auxílio de uma pipeta, 20 mL de filtrado obtido em glicídios
redutores em glicose, para um balão volumétrico de 100 mL ou pesar 2 a 5 g
da amostra
2. Transferir para um balão volumétrico de 100 mL com auxílio de água.
3. Acidular fortemente com ácido clorídrico (cerca de 1 mL).
4. Colocar em banho-maria a (100 ± 2)°C por 30 a 45 minutos.
5. Esfriar e neutralizar com carbonato de sódio anidro ou solução de hidróxido de
sódio a 40%, com auxílio de papel indicador.
6. Completar o volume com água e agitar.
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7. Filtrar se necessário em papel de filtro seco e receber o filtrado em frasco
Erlenmeyer de 250 mL.
8. Transferir o filtrado para a bureta.
9. Colocar num balão de fundo chato de 250 mL, com auxílio de pipetas de 10
mL, cada uma das soluções de Fehling A e B.
10.Adicionar 40 mL de água.
11. Aquecer até ebulição.
12.Adicionar as gotas, à solução da bureta sobre a solução do balão em
ebulição, agitando sempre, até que esta solução passe de azul a incolor (no
fundo do balão deverá ficar um resíduo vermelho de Cu2O).
Observações:
1. Em caso de amostras com alto teor de proteína: adicione 5 mL de ferrocianeto
de potássio a 6% e 5 mL de acetato de zinco a 12%. Complete o volume com
água, agite e deixe em repouso por 15 minutos. Filtre em papel de filtro seco e
receba o filtrado em frasco Erlenmeyer de 250 mL. Verifique o pH da solução.
Caso esteja ácido, com pH abaixo de 6, coloque algumas gotas de hidróxido
de sódio a 40% ou carbonato de sódio anidro até que a solução se torne
alcalina, com pH próximo de 9,0 e filtre novamente. Transfira o filtrado para
uma bureta.
2. Em caso de amostras com coloração intensa: clarifique a amostra adicionando
solução saturada de acetato neutro de chumbo, até não haver mais
precipitação (cerca de 1,5 mL). Complete o volume com água. Filtre em papel
de filtro seco e receba o filtrado em frasco Erlenmeyer de 250 mL. Adicione
sulfato de sódio anidro, até precipitar o excesso de chumbo. Filtre em papel
de filtro seco e receba o filtrado em outro frasco Erlenmeyer de 250 mL.
Transfira o filtrado para uma bureta.
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3. Em caso de amostras com alto teor de lipídios: adicione à amostra pesada, 50
mL de água e aqueça em banho-maria por 5 minutos. Transfira a solução à
quente para um balão volumétrico de 100 mL. Esfrie, complete o volume e
agite. Filtre em papel de filtro seco e receba o filtrado em frasco Erlenmeyer
de 250 mL. Transfira o filtrado para uma bureta.
8. Cálculo dos resultados
A = no de mL da solução de P g da amostra
a = no de g de glicose correspondente a 10 mL das soluções de Fehling
P = massa da amostra em g ou no de g da amostra usado na inversão
V = no de mL da solução da amostra gasto na titulação
B = no de g de glicose por cento obtido em glicídios redutores, em glicose
9. Referências
Instituto Adolfo Lutz (São Paulo). Métodos físico-químicos para análise de
alimentos/coordenadores Odair Zenebon, Neus Sadocco Pascuet e Paulo Tiglea -
São Paulo: Instituto Adolfo Lutz, 2008. p. 126 a 127.