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CRISPR: Uma Ferramenta de Edição Genética

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NAYRA LAIZ MANCUELHO
141.258
CRISPR
O CRISPR é um sistema baseado no sistema das bactérias para se proteger de infecções virais. Ao detectar presença do DNA do vírus, a bactéria produz dois tipos de RNA curto, um dos quais contém uma sequência que corresponde à do vírus invasor. Esses dois RNAs formam um complexo com uma proteína chamada Cas9.
 Cas9 é uma nuclease, um tipo de enzima que pode cortar o DNA. Quando o RNA guia encontra seu alvo dentro do genoma viral, Cas9 corta o DNA alvo, desativando o vírus. Ao longo dos últimos anos, os pesquisadores que estudam o sistema perceberam que ele poderia ser projetado para cortar não apenas o DNA viral, mas qualquer sequência de DNA em um local escolhido com precisão, alterando o RNA guia para corresponder ao alvo. E isso pode ser feito não apenas em um tubo de ensaio, mas também dentro do núcleo de uma célula viva. Uma vez dentro do núcleo, o complexo resultante irá travar em uma sequência curta conhecida como PAM. O Cas9 vai descompactar o DNA e combiná-lo com seu RNA alvo. 
Com a combinação completa, o Cas9 usará duas pequenas tesouras moleculares para cortar o DNA. Quando isso acontece, a célula tenta reparar o corte, mas o processo de reparo está sujeito a erros, levando a mutações que podem desativar o gene, permitindo que os pesquisadores entendam sua função. Essas mutações são aleatórias, mas às vezes os pesquisadores precisam ser mais precisos, por exemplo, substituindo um gene mutante por uma cópia saudável. Isso pode ser feito adicionando outro pedaço de DNA que carregue a sequência desejada. Uma vez que o sistema CRISPR tenha feito um corte, este molde de DNA pode emparelhar com as extremidades cortadas, recombinando e substituindo a sequência original pela nova versão. 
Isso pode ser feito em culturas de células, incluindo células-tronco. Também pode ser feito em um ovo fertilizado, permitindo a criação de animais transgênicos com mutações direcionadas. CRISPR pode ser usado para direcionar muitos genes ao mesmo tempo. Esses métodos estão sendo aprimorados rapidamente e terão muitas aplicações na pesquisa básica, no desenvolvimento de medicamentos, na agricultura e, talvez, eventualmente, no tratamento de pacientes humanos com doenças genéticas.

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