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FACULDADES OSWALDO CRUZ BIOQUÍMICA PROTEÍNAS Anna Carolina Rodrigues RA: 4018056 Giovanna dos Santos RA: 4018063 Stefani Bolani RA: 4018144 1. Introdução 2. Objetivos O objetivo do experimento é identificar por meio da reação de biureto, reação de precipitação e desnaturação pela ureia, as proteínas. 3. Materiais e Reagentes 3.1 Reagentes Água Glicerina 1% Gelatina 1% Caseína 1% Leite Ovoalbumina 2% Aspartame 0,5% AgNO3 Na2WO4 Ácido Tricoloroacético (TCA) Acetona (NH4)2SO4 Tampão Acetato Cisteína 0,02% Nitroprussiato de Sódio 5% NH4OH 3.2 Materiais Tubos de ensaio Tripé de ferro Bico de Bunsen Bastão de vidro Erlenmeyer Pipeta Pasteur 4. Resultados O primeiro experimento tratava-se da pesquisa por ligações peptídicas através da reação de biureto. O Biureto é o nome dado à estrutura originada a partir da decomposição da ureia. Usaram-se sete tubos de ensaio, contendo diversas substâncias. A reação do biureto é devida às ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com 3 ou mais resíduos de aminoácidos. Dependendo da complexidade do peptídeo, a cor do produto da reação varia substancialmente, ficando a proteína de coloração violeta e os peptídeos de coloração rósea. Tubo de Ensaio Resultado 1ml água Azul 1ml de Gly 1% Azul 1mL de Gelatina 1% Violeta límpido 1mL de caseína 1% Lilás 1mL de Leite Lilás 1mL de Ovoalbumina 2% Lilás 1mL de Aspartame 0,5% Azul O aparecimento de coloração violeta indica que os íons Cu2+ provenientes do CuSO4 formaram complexo com ligações peptídicas presentes na amostra, indica que se trata de uma proteína ou peptídeo. O reagente de Biureto liga-se através de um tripeptídeo, e quanto mais ligações peptídicas há na proteína, maior se torna a intensidade da cor (violeta). O tubo de ensaio que continha gelatina, apresentou maior intensidade da cor. Os tubos de ensaio com água, glicerina e aspartame (edulcorante) apresentaram coloração azul, pois não sofreram reação nenhuma, por ser tratarem de substâncias que não são proteínas e por não apresentarem mais de 2 ligações peptídicas. Interação ligação peptídica / Cu2+ 5. Conclusão 6. Referências • Experimentos de Bioquímica - Reação de Biureto. Disponível em: http://www.fcfar.unesp.br/alimentos/bioquimica/praticas_proteinas/reacoes_coradasdois.htm. Acesso em: 18 de agosto de 2019.
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