Aula 5_Bio

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Métodos de limpeza, desinfecção e 
esterilização 
Disciplina: Biossegurança 
Professora: Isadora Machado Teixeira Lima 
Introdução 
• Os materiais utilizados em laboratório e os locais 
de manipulação podem veicular agentes 
infecciosos. 
• A limpeza, desinfecção ou esterilização dos 
materiais e a limpeza do 
 ambiente são ações de 
 biossegurança. 
• A conscientização é 
 importante!! 
 
 
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Descontaminação 
• Descontaminação: utilização de processos que 
eliminam total ou parcialmente microorganismos. 
• Objetivo: tornar qualquer material seguro para o 
descarte final ou para reutilização. 
• Processos de descontaminação: 
– Limpeza 
– Desinfecção 
– Esterilização 
 
 
Limpeza 
• Limpeza: conjunto de ações que visa à remoção 
de sujeiras e detritos, com a finalidade de manter 
em estado de asseio objetos e superfícies. 
• Compreende a lavação com água e sabão, 
escovação, fricção ou esfregação e uso de pano 
úmido. 
• Varredura e espanação seca. 
• Treinamentos periódicos. 
 
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Desinfecção 
• Desinfecção: processo de eliminação de 
microorganismos existentes em superfícies e 
objetos inanimados. 
• Exceção: esporos de bactérias ou fungos. 
• Utiliza procedimentos: 
– Químicos: germicidas (desinfetantes) líquidos ou 
gasosos 
– Físicos: calor 
 
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Desinfecção 
• Os níveis de desinfecção são classificados em: 
 
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Esterilização 
• Esterilização: processo de destruição ou 
eliminação total de todos os microorganismos, 
incluindo seus esporos. 
• Utiliza procedimentos: 
– Físicos: EX: calor úmido 
– Físico-químicos: EX: calor + 
 agente químico 
 
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Esterilização 
• Esterilização por calor úmido – Autoclavação: 
– Método físico rápido (15 a 30 min.) realizado em 
autoclaves, a 121oC 
– As autoclaves são equipamentos que realizam o 
processo de esterilização utilizando vapor saturado 
sob pressão 
– Método esporocida mais utilizado e mais confiável 
– Indicado para materiais termorresistentes 
 
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Esterilização 
• Esterilização por calor úmido – Autoclavação: 
 
Modelos de autoclave 
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Esterilização 
• Monitoramento da autoclavação: 
– Realização de testes biológicos periódicos com 
esporos de Bacillus stearothermophilus (indicador 
biológico) 
– Identificação visual dos pacotes com fita 
termossensível (assegurar as altas temperaturas) 
– Controle diário da qualidade do vapor, 
temperatura, pressão e tempo. 
 
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Esterilização 
• Esterilização por calor úmido – Autoclavação: 
 
 
Invólucro do material 
Fita termossensível 
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Esterilização 
• Esterilização por óxido de etileno: 
– Método físico-químico: associa o calor a um 
agente químico (óxido de etileno) 
– O óxido de etileno é um gás incolor, inodoro, 
inflamável, explosivo e carcinogênico. Em geral, é 
associado a CO2 ou hidrofluorcarbonos 
– Utiliza-se uma câmara semelhante a uma 
autoclave, com paredes bem vedadas 
 
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Esterilização 
• Esterilização por óxido de etileno: 
 
Câmaras de esterilização 
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Esterilização 
• Esterilização por óxido de etileno: 
– Etapas: 
• O ar é retirado e o óxido de etileno é injetado 
na câmara 
• Esterilização (tempo mín. 30 a 40 min.) 
• Gás removido para o exterior 
• Longo ciclo de passagem de ar estéril pelo 
material para remover resíduos 
 Duração total: 
48h-72h 
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Esterilização 
• Esterilização por óxido de etileno: 
– Indicada para materiais termossensíveis, pois 
utiliza baixas temperaturas (29oC a 65oC) 
– Alto custo, processo lento, perigoso e 
carcinogênico (requer ambiente isolado/aerado e 
EPI) 
 
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Esterilização 
• Monitoramento da esterilização por óxido de 
etileno: 
– Realização de testes biológicos periódicos com 
esporos de Bacillus subitilis (indicador biológico) 
– Identificação visual dos pacotes usando fita com 
indicador químico 
– Monitoramento no mínimo semanal ou após 
manutenção 
 
 
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Esterilização 
• Monitoramento da esterilização por óxido de 
etileno: 
 
 
Fita (indicador químico) 
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Esterilização 
• Plasma de peróxido de hidrogênio: 
– Método físico-químico: associa o calor a um 
agente químico (peróxido de hidrogênio) 
– Realizado no equipamento Sterrad®100 através de 
ciclos curtos (75 a 85 min.) 
– Ciclo livre de resíduos tóxicos, seguro para 
ambiente e profissionais (vantagem!!) 
– Indicada para materiais termossensíveis, pois 
utiliza baixas temperaturas (45oC a 50oC) 
 
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Esterilização 
• Plasma de peróxido de hidrogênio: 
 
Modelos de Sterrad®100 
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https://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=&url=http://www4.anvisa.gov.br/base/visadoc/REL/REL%5B13103-3-4%5D.PDF&bvm=bv.112766941,d.Y2I&psig=AFQjCNHO9dR-oZQpeMGCv3jJAjsG4oabzg&ust=1454082035628629https://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=&url=https://www.aspjj.com/us/news-and-events/schedule-preventative-maintenance&bvm=bv.112766941,d.Y2I&psig=AFQjCNHO9dR-oZQpeMGCv3jJAjsG4oabzg&ust=1454082035628629
Esterilização 
• Monitoramento da esterilização por peróxido de 
hidrogênio: 
– Realização de testes biológicos periódicos com 
esporos de Bacillus subitilis (indicador biológico) 
– Identificação visual dos pacotes usando fita com 
indicador químico 
– Monitoramento no mínimo semanal ou após 
manutenção 
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Esterilização 
• Esterilização por calor seco: 
 
RDC no 15 / 2012 
(ANVISA) 
Estufa Forno de Pasteur 
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Limpeza e desinfecção 
de superfícies 
Procedimentos de limpeza 
• No laboratório, os pisos não são varridos. 
• Utiliza-se pano úmido (exclusivo para o chão) em 
balde com água e sabão embrulhado no rodo. 
• Outras superfícies fixas (ex: parede, teto, portas) 
podem ser limpos também com água e sabão. 
• As bancadas são desinfetadas 
 com gaze embebida em álcool 
 70% do fundo para a borda (3x). 
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Procedimentos de desinfecção 
localizada 
1) Com o uso de luvas e roupa protetora, retirar o 
excesso da carga contaminante em papel 
absorvente ou pano de limpeza; 
2) Desprezar o papel ou pano em sacos plásticos de 
lixo ou encaminhar para a lavanderia; 
3) Aplicar desinfetante sobre a área atingida e 
deixar o tempo recomendado; 
4) Remover o desinfetante com pano molhado; 
5) Proceder a limpeza com água e sabão no restante 
da superfície. 
 
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Procedimentos de desinfecção 
localizada 
• Observações importantes: 
– Esfregões, panos de limpeza e de chão, baldes 
(etc.) devem ser lavados nos tanques para tal fim. 
– Para os procedimentos de limpeza e desinfecção 
devem ser usados EPIs adequados. 
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Procedimentos de desinfecção 
localizada 
• Utilização de desinfetantes na descontaminação 
de áreas e superfícies: 
– O hipoclorito de sódio é o mais utilizado para piso, 
tetos, paredes, vidraças, bancadas e outras 
superfícies não-metálicas. 
– Para superfícies contaminadas: solução de 
hipoclorito de sódio a 0,5%. 
– Para metais: álcool 70%. 
Desinfecção: antes e 
após procedimentos! 
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