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1 RESPOSTA AGUDA DA LEPTINA SANGUÌNEA APÓS EXERCÍCIO INTERVALADO DE ALTA INTENSIDADE E EXERCÍCIO CONTÍNUO DE MODERADA INTENSIDADE Alesson Rodrigues Furtado Resumo: O exercício físico Iinfluenciar os níveis de leptina de e desta forma contribuir para o controle da obesidade. O objetivo do estudo é analisar a resposta da leptina após exercício aeróbio contínuo de modererada intensidade (ECMI) e exercício aeróbio intervalado de alta intensidade (EAAI). Oito voluntários (6 homens e 2 mulheres) realizaram 3 visitas ao ambiente de coleta de dados para realizar: a) Teste incremental de corrida na esteira até a exaustão voluntária para identificação do pico de velocidade (PV); b) Exercício contínuo de 30 minutos a 70% do PV; c) Exercício intervalado (5 x 2 min a 90% do PV com 2 minutos de recuperação passiva). A leptina foi significativamente reduzida após o EAI (1,66±0,55 ng/ml vs 0,94±0,46 ng/ml; p=0,009) e não apresentou alteração significativa após o ECMI (1,52±0,77 ng/ml vc 1,18±0,53 ng/ml; p=0,12). Palavras-chave: Leptina. Exercício. 1 INTRODUÇÃO Nos últimos anos, a prevalência dos índices de obesidade tem crescido no Brasil e no mundo de forma geral, estima-se que em 8 anos o Brasil será o quinto pais com mais problemas de saúdes ligados a obesidade no mundo.(ROMERO; ZANESCO, 2006). Um dos hormônios diretamente relacionados a obesidade em humanos é a leptina, dos quais apresentam características sacietógenos, e apresentam alta resistência em indivíduos com obesidade, o que inibe seus efeitos no sistema nervoso central. (BENATTI; LANCHA JUNIOR, 2007). Com o tempo, o exercício físico passou a ser diretamente relacionado ao controle da obesidade, com isto passou-se a investigar a relação do exercício físico e os 2 níveis plasmáticos de leptina no sangue, com isto, entender a relação de ambos com a obesidade. Em estudos realizados por Landtet et al (1997) e Tuoeminen et al (1997), foram observadas variações nas concentrações de leptina em indivíduos após treino aeróbico de longa duração de forma intensa. Já, Perusseet al (1997) e Kraemer et al (2003), observaram em seus estudos, mudanças nas concentrações do hormônio em indivíduos após sessões de treinamento aeróbico de curta duração e alta intensidade. Rosa, Mello e Dantas (2011), compararam as alterações do hormônio em dois tipos de exercício, resistido e aeróbico de longa duração em bicicleta ergométrica, com resultados positivos em ambos os exercícios, com pequena vantagem para o grupo que efetuou exercícios de longa duração. O presente estudo visa analisar quais alterações acontecem nos niveis plasmaticos de leptina após uma unica sessão de treinamento de ECMI e EAI, e por comparativo identificar quais estimuloas geram maior resposta a concentração do hormonio. 2 MATERIAIS E MÉTODOS 2.1 TIPO DE PESQUISA A presente pesquisa caracteriza-se como com uma abordagem quantitativa, onde os resultados são demonstrados em números e escores obtidos na pesquisa. Também é classificada como pesquisa descritiva quanto aos seus objetivos onde se descreve sobre a associação de um assunto já conhecido aplicado a uma população especifica. (THOMAS; NELSON; SILVERMAN, 2012). 2.2 SUJEITOS DA PESQUISA A amostra foi composta por 8 jovens estudantes universitários e praticantes de esportes coletivos e individuais, que atenderem aos critérios de inclusão: Adultos entre 18 e 30 anos; Praticar exercicios fisicos ao menos 3 vezes por semana com duração de 60 minutos; Não apresentar lesões musuclo esqueleticas que prejudiquem o desempenho nos testes; Não apresentar nenhuma resposta positiva ao Questionário de Prontidão à prática de 3 Atividade Física (PARQ). Os testes de corrida até a exaustão podem apresentar riscos físicos para sujeitos sedentários e com alguma resposta positiva ao Questionário de Prontidão à Prática de Atividade (PARQ). Essas respostas positivas indicam possível risco de doença cardiovascular e, concomitantemente, maior risco de evento adverso durante a prática de exercício físico de moderada a alta intensidade. No entanto, todos os sujeitos do estudo serão adultos jovens, estudantes de graduação em educação física e praticantes de esportes coletivos e individuais e treinamento resistido e aeróbio em academias, com treinamento sistemático de, no mínimo 3 sessões semanais. Portanto, serão indivíduos familiarizados com exercício de alta intensidade. Além disso, o PARQ foi aplicado previamente para identificar possíveis restrições à realização dos testes físicos. Os sujeitos assinaram o termo de consentimento livre esclarecido apresentado pelo pesquisador. 2.3 INSTRUMENTO DE PESQUISA A pesquisa ocorreu através de analises de sangue venoso, após realizar a sessão de treinamento, obtida através de coleta realizada por laboratório especializado e pesquisadores treinados, uma vez que, o manuseio de tais procedimentos por pessoas desqualificadas podem trazer danos ao participante e a pesquisa. Para a realização dos protocolos de EAI e ECMI foram utilizadas 3 esteiras ergométricas da marca Athletic, com velocidade máxima de 18 km/h e inclinação de 10%.. 2.4 PROCEDIMENTOS DE COLETA DE DADOS Os 8 sujeitos da pesquisa se apresentaram na Academia de Musculação do Complexo Esportivo da Universidade do Sul de Santa Catarina, trajados para a prática esportiva e foram submetidos a 3 testes, em dias separados, com intervalo mínimo de 72 horas entre cada um dos testes. Teste 1: Teste Progressivo em Esteira Rolante: Os participantes foram submetidos a um aquecimento composto por corrida na esteira a 7km/h durante 6 minutos. A seguir iniciaram o teste progressivo de corrida até a exaustão, com a velocidade inicial de 4 8 km/h e incrementos de 1 km/h a cada 1 minuto até a exaustão voluntária. O pico de velocidade (PV) foi considerado a maior velocidade sustentada pelo período de um minuto e, caso algum estágio não fosse completado pelo avaliado, o PV seria ajustado pelo tempo mantido no último estágio conforme proposto por Kuipers et al., (1985). Teste 2: Os participantes foram submetidos a um aquecimento composto por corrida na esteira a 8km/h durante 6 minutos. A seguir realizaram 5 séries de 2 minutos a uma velocidade correspondente a 90% do PV obtido no teste incremental (teste 1). Amostras de sangue foram coletadas antes do início do teste para identificar os valores de leptina em repouso. Após o término do teste os participantes repousaram em uma cadeira, no mesmo ambiente dos testes, e após 30 minutos novas coletas de sangue foram realizadas para identificar os valores de leptina pós exercicio intervalado. Teste 3: Os participantes foram submetidos a um aquecimento composto por corrida na esteira a 8km/h durante 6 minutos. A seguir realizaram 30 minutos de corrida a uma velocidade correspondente a 70% do PV obtido no teste incremental (teste 1). Amostras de sangue foram coletadas antes do início do teste para identificar os valores de leptina em repouso. Após o término do teste os participantes repousaram em uma cadeira, no mesmo ambiente dos testes, e, após 30 minutos novas coletas de sangue foram realizadas para identificar os valores de leptina pós-exercício moderado As amostras de sangue foram obtidas da veia antecubital por meio de técnica asséptica com material de punção venosa Becton Dicknson (BD). Nos testes 2 e 3, 10ml de sangue foram coletados em tubos com um gel separador parasoro (vacuetter, greinerbio- One, Brasil) imediatamente antes o início da sessão, imediatamente após a sessão, e 30 min após o término da sessão. Durante os 30 min pós-exercício, os participantes permaneceram sentados. A Ingestão de alimentos e bebidas não foram permitidas. Contudo, eles foram autorizados a ler e usar dispositivos eletrônicos. O sangue foi centrifugado por 15 min a 3.600 revoluções porminuto. O soro será então foi separado em alíquotas de 200 microlitros e armazenado a −80◦C para análise. As amostras foram conservadas em tubos de ensaio e armazenadas em maleta específica para coletas e transportadas até o laboratório por meio de veículo motorizado. As amostras foram analisadas no Laboratório de Análises Clínicas Vital, Os níveis de Leptina foram avaliados por kit específico de enzima imunoensaio (ELISA) seguindo instruções do 5 fabricante Immunomat. As amostras de soro foram processadas em duplicata e lidas em espectrofotômetro marca Spectra Max 340 (Molecular Devices, Canadá) e o cálculo da absorbância de cada amostra será executado no software Soft Max (Molecular Devices, Canadá). O laboratório conta com 3 unidades dentro da Grande Florianópolis e atende em media 200 pacientes todos os dias. As amostras foram transportadas imediatamente após coleta para análises, sendo armazenadas em maletas específicas para coleta dentro de seus tubos de ensaio. 2.5 ANÁLISE DE DADOS A normalidade dos dados foi analisada por meio do teste Shapiro-Wilk. Posteriormente, foi aplicada uma ANOVA 2x2 dentre os sujeitos para verificar efeitos do tempo (pré-exercício x pós-exercício), dos tipos de exercício (EAI x ECMI) e a interação entre os dois fatores sobre a leptina plasmática. Para verificar os possíveis efeitos simples foi utilizado o teste T para amostras repetidas. O nível de significância adotado foi p ≤ 0,05. 3 RESULTADOS Na tabela 1 são apresentadas as características físicas dos sujeitos. Tabela 1: Dados quantitativos obtidos durante o teste 1 6 Variável Média ± DP Idade 22,5 ± 3,46 Massa Corporal (kg) 67,3 ± 9,51 IMC 22,5 ± 1,83 FCmáx 193 ± 3,29 PV 14,9 ±1,43 PSEmáx 10 ± 0 70% PV 10, 43 ± 1,07 90% PV 13,41 ± 1,35 Na tabela 2 podemos observar os resultados da ANOVA obtidos após os testes 2 e 3, quantificando os níveis séricos de leptina pré e pós sessão de treinamento. Tabela 2: ANOVA 2x2 entre sujeitos com os fatores exercício e tempo como independentes e leptina como variável dependente Exercício Pré (ng/ml) Pós (ng/ml) T de Student p EAAI 1,63 0,94 0,123 ECMI 1,52 1,18 0,009* *p≤0,01 A leptina foi significativamente reduzida após o EAAI (1,66±0,55 ng/ml vs 0,94±0,46 ng/ml; p=0,009) e não apresentou alteração significativa após o ECMI (1,52±0,77 ng/ml vc 1,18±0,53 ng/ml; p=0,12). Figura 1 – Níveis de Leptina pré e pós EAI e ECMI 7 * Diferença significativa para pré-EAI e pré-ECMI As respostas hormonais agudas recorrentes ao exercício podem estar associadas a manipulação das variáveis, tais como volume, intensidade e intervalo de repouso. Para Benatti et al (2007), o desequilíbrio de energia induzida pelo esforço físico parece ser essencial para possíveis alterações agudas nas concentrações de leptina. O presente estudo mostra que, o exercício físico, mesmo que de forma aguda trás relevâncias sob os níveis séricos de leptina circulante, acima disso, que a intensidade empregada a sessão de treinamento pode influenciar diretamente na redução dos níveis plasmáticos deste hormônio. Segundo o presente estudo, há uma redução nos níveis de leptina para os dois estímulos dos quais foram submetidos os participantes da amostra, entretanto, com maior vantagem estatística para o grupo que realizou EAAI. Os resultados do teste 2 são compatíveis com os resultados por Rosa et al(2001), onde os níveis de leptina sofreram reduções após treinamento de longa duração a 60% da Fcmáx. O mesmo ocorre pelos achados do estudo de Zaiferidis et al, 2000, onde o grupo que realizou sessão de ECMI em bicicleta ergonômica obteve reduções nos níveis plasmáticos de leptina. Em contraponto, os resultados são contrários aos apresentados pelos estudos de Rosa et al(2011), Landt et al (1997) e Tuoeminen et al (1997) onde não houveram modificações nos 8 níveis plasmáticos de leptina lgo após o ECMI, entretanto, a duração da sessão de treinamento fora composta por um tempo relativamente curto, de acordo com o PSE dos participantes, não foram realizadas até a exaustão. Sugere-se, que as modificações nos níveis de leptina circulante sofrem alterações sob manipulação da variável de intensidade, sendo proposto que a magnitude do estresse imposto pelo exercício está diretamente relacionada com as alterações agudas ocasionadas pelo mesmo. No teste 3, o presente estudo mostra uma redução estatística consideravelmente grande (42,25%) nos níveis séricos de leptina após a sessão de treinamento realizada de forma intensa. Os resultados do teste 3 são contraditórios aos resultados apresentados por Kraemer et al (2003), no qual não foram observados aumentos nos níveis de leptina nos participantes do estudo, e nos estudos realizados por Perusse et al (1997), do qual, não foram encontradas modificações nos níveis de leptina após sessão de treinamento. Os resultados obtidos por Rosa et al (2010) e Rosa et al (2011), se contrapõe aos resultados encontrados no presente estudo, visto que, em sua pesquisa, os estudos identificaram reduções estaticamente menores para o grupo que realizou o ECMI em comparativo ao grupo que realizou o EAAI, levando a uma maior redução dos níveis de leptina logo ao termino do teste. 4 CONSIDERAÇÕES FINAIS Os resultados do presente estudo demonstram que podem ocorrer reduções nos níveis de leptina de forma aguda após uma única sessão de treinamento, sem que alterações dietéticas fossem impostas aos participantes. Há redução nos níveis de leptina após exercício aeróbio intervalo de alta intensidade a 90% do PV com séries de 2 minutos de esforço e 2 minutos de pausa. Não foram encontradas alterações significativas nos níveis de leptina do grupo que realizou aeróbio moderado continuo por 30 minutos. Em longo prazo, visando aplicações praticas sob o controle da obesidade o EAI se mostra uma opção mais benéfica, uma vez que, em obesos, a sensibilidade ao hormônio é dificultada, devido a isto, há uma maior secreção do organismo para tentar equilibrar a resposta ao hormônio. De acordo com o presente estudo, o EAI pode produzir uma maior 9 resposta aos níveis de leptina, desta forma, melhorando a sensibilidade ao hormônio, em indivíduos obesos, e assim, contribuindo para um melhor controle da ingesta alimenta, e conseqüentemente a longo prazo, melhora na composição corporal dos indivíduos e doenças ligadas a obesidade. Futuros estudos são necessários para o tema, com uma maior amostra de participantes e controle dietético imposto, uma vez que, a quantidade de calorias ingeridas logo antes da sessão de treinamento pode ocasionar alterações nos níveis do hormônio em âmbito basal. REFERÊNCIAS BENATTI, Fabiana Braga; LANCHA JUNIOR, AntonioH.. Leptina e exercício físico aeróbio: Implicações da adiposidade corporal e insulina. RevBrasMed Esporte, Campinas, v. 13, n. 4, p.263-269, jul. 2007. KUIPERS, H. et al. Variability of aerobic performance in the laboratory and its physiological correlates. International Journal of Sports Medicine, v. 6, p. 197–201, 1985. KRAEMER, R et al. Effects of high-intensity exercise on leptin and testosterone concentrations in well-trained males. Lousiana, ago. 2003. Kraemer WJ, et al. Hormonal and growth factor responses to heavy resistance exercise protocols. J Appl Physiol 1990; 69(4): 1442-1450. KUIPERS, H. et al. Variability of aerobic performance in the laboratory and its physiological correlates. International Journal of Sports Medicine, v. 6, p. 197–201, 1985. LANDT, Michael et al. Prolonged exercise decreases serum leptin concentrations. Metabolism., Washington Dc, v. 46, n. 10, p.1109-1012, out. 1997. MOTA, Gustavo R da; ZANESCO, Angelina. Leptina, Grelina eExercício Físico. ArqBrasEndocrinolMetab, Rio Claro, v. 51, n. 1, p.25-33, jan. 2007. PERUSSE, Louis et al. Acute and chronic effects of exercise on leptin levels in humans. Journal Of Applied Physiology, v. 83, n. 1, p.5-10, jul. 1997 REPETTO, Giuseppe; RIZZOLLI, Jacqueline; BONATTO, Cassiane. Prevalência, Riscos e Soluções na Obesidade e Sobrepeso: Here, There, ArqBrasEndocrinolMetab, São Paulo, v. 47, n. 6, p.633-635, dez. 2003. 10 ROMERO, Carla E M; ZANESCO, Angelina. O papel dos hormônios leptina e grelina na gênese da obesidade. Revista de Nutrição. Pontifícia Universidade Católica de Campinas,v.19,n.1,p.85-912006. ROSA, Guilherme et al. Concentraciones séricas de leptina y zinc: efectos agudos de las distintas órdenes de ejecucióndelentrenamientoconcurrente. Archivos de Medicina del Deporte, Rio de Janeiro, v. 28, n. 146, p.414-421, jun. 2011. ROSA, Guilherme; MELLO, Danielli B; DANTAS, Estélio H. M..Níveis séricos de leptina em adultos submetidos a distintas ordens de execução de treinamento concorrente. Revista brasileira de atividade física & saúde, rio de janeiro, v. 16, n. 4, p.304-308, jun. 2011. THOMAS, Jerry R; NELSON, Jack K; SILVERMAN, Stephen J. Métodos de pesquisa em atividades físicas. Artmed, porto alegre,p.391-395,2012. TUOMINEN, J. A. Et Al. Serum Leptin Concentration And Fuel Homeostasis In Healthy Man. Eur J Clin Invest, Helsink, V. 27, N. 3, P.206-211, Mar. 1997. ZAFEIRIDIS A, GOLOI E, PETRIDOU A, DIPLA K, MOUGIOS V, KELLIS S. Effects of low- and high-volume resistance exercise on postprandial lipaemia. The british journal of nutrition. 2007;97(3):471-7. ANEXO A – TCLE TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO Você está sendo convidado(a) como voluntário(a) a participar da pesquisa:RESPOSTA AGUDA DA LEPTINA SANGUINEA APÓS DIFERENTES TIPOS DE EXERCICIO DE ALTA INTENSIDADE: COMPARAÇÃO ENTRE EXERCICIO RESISTIDO E AEROBIO e que tem como objetivo analisar a resposta aguda da leptina sanguinea após diferentes tipos de exercicios de alta intensidade. Acreditamos que ela seja importante para associação dos exercicios de intensidade e sua correlação com o combate a obesidade. 11 Participação do estudo – A minha participação no referido estudo será de participar das sessões de treinamento propostos para analise do estudo, o qual levará o tempo de 4 semanas nas dependencias do Complexo Aquatico Unisul (CAU). Riscos e Benefícios – Fui alertado que, da pesquisa a se realizar, posso esperar um benefícios tal como, indices dos niveis do hormonio leptina presente no organismo, avaliuação fisica detalhada sob os parametros de VO2. Recebi, também que é possível que aconteçam os seguintes desconfortos ou riscos, embora que minimos, como perfuração para coleta de amostras sanguineas, entretanto, fico ciente que todos os instrumentos utilizados no estudos estão esterilizados, manuseados por profisional competente e serão descartados após a coleta. Sigilo e Privacidade – Estou ciente de que a minha privacidade será respeitada, ou seja, meu nome ou qualquer dado ou elemento que possa, de qualquer forma, me identificar será mantido em sigilo. Os pesquisadores se responsabilizam pela guarda e confidencialidade dos dados, bem como a não exposição dos dados da pesquisa. Autonomia – É assegurada a assistência durante toda a pesquisa, bem como me garantido o livre acesso a todas as informações e esclarecimentos adicionais sobre o estudo e suas consequências, enfim, tudo que eu queira saber antes, durante e depois da minha participação. Declaro que fui informado de que posso me recusar a participar do estudo, ou retirar meu consentimento a qualquer momento, sem precisar justificar, e de, por desejar sair da pesquisa, não sofrerei qualquer prejuízo à assistência que venho recebendo. De igual maneira, caso ocorra algum dano decorrente da minha participação no estudo, seja ele de carater fisico, psiquico e emocional, serei devidamente amparado pela equipe pesquisadora. Devolutiva dos resultados – Os resultados dos estudos serão entregues em relatorio digital, sob o formato PDF via enedereço eletronico a todos os participantes que completarem o estudo até seu desfecho final. Contatos -Pesquisador Responsável: Leonardo de Lucca Telefone para contato: 55 48 996128252 E-mail para contato: leonardodelucca57@gmail.com Pesquisador: Alesson Rodrigues Furtado Telefone para contato: 55 48 988672552 12 E-mail para contato: emaildoalesson@gmail.com Comitê de Ética – O Comitê de Ética em Pesquisa em Seres Humanos (CEP) é composto por um grupo de pessoas que estão trabalhando para garantir que seus direitos como participante sejam respeitados, sempre se pautando das Resoluções 466/12 e 510/16 do CNS. Ele tem a obrigação de avaliar se a pesquisa foi planejada e se está sendo executada de forma ética. Caso você achar que a pesquisa não está sendo realizada da forma como você imaginou ou que está sendo prejudicado de alguma forma, você pode entrar em contato com o Comitê de Ética da UNISUL pelo telefone (48) 3279-1036 entre segunda e sexta-feira das 9 às 17horas ou pelo e-mail cep.contato@unisul.br. Declaração – Declaro que li e entendi todas as informações presentes neste Termo e tive a oportunidade de discutir as informações do mesmo. Todas as minhas perguntas foram respondidas e estou satisfeito com as respostas. Entendo que receberei uma via assinada e datada deste documento e que outra via será arquivada por 5 anos pelo pesquisador. Enfim, tendo sido orientado quanto ao teor de todo o aqui mencionado e compreendido a natureza e o objetivo do já referido estudo, eu manifesto meu livre consentimento em participar, estando totalmente ciente de que não há nenhum valor econômico, a receber ou pagar, por minha participação. Nome e Assinatura do pesquisador responsável: ______________________________ Nome e Assinatura do pesquisador que coletou os dados: ______________________ Eu, _______________________________, abaixo assinado, concordo em participar desse estudo como sujeito. Fui informado(a) e esclarecido(a) pelo pesquisador _____________________________ sobre o tema e o objetivo da pesquisa, assim como a maneira como ela será feita e os benefícios e os possíveis riscos decorrentes de minha participação. Recebi a garantia de que posso retirar meu consentimento a qualquer momento, sem que isto me traga qualquer prejuízo. mailto:cep.contato@unisul.br 13 Nome por extenso: _______________________________________________ RG: _______________________________________________ Local e Data: _______________________________________________ Assinatura: _______________________________________________ ANEXO B – Parecer CEP 14 AGRADECIMENTOS Agradeço ao Prof. Leonardo de Lucca msc, orientador do Trabalho de Conclusão do Curso, pela partilha de conhecimentos, orientações e sugestões. À Profª Elinai Freitas msc, pela sua disponibilidade e atenção despendidas, sem reservas. 15 Um especial agradecimento ao Sr Carlos Nyander Theiss, representante do Laboratório Vital, por patrocinar e apoiar meu estudo com todo material necessário para as amostras. Aos nossos pais poucas palavras, mas de mais valia, por toda educação e carinho desprendido a mim em minha formação e serem, desde sempre, meus maiores apoiadores.