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Produção de hemocomponentes •Hemocomponente- produto obtido a partir do sangue total por centrifugação e separação dos elementos constituintes. •Hemoderivados- produto industrial pedido por meio do processamento de pools de plasma obtidos a partir do sangue total (concentrado de fator VIII (fatura anti-hemofílico a), concentrado de fator IV (fator anti-hemofílico b), albumina, etc). *Hemocomponente é um componente do sangue que eu consigo separar a partir da doação de uma bolsa de sangue total e nós vamos separar por centrifugação no serviço de Hemoterapia. São hemocomponentes concentrados de hemácia, concentrado de paraquedas, plasma fresco, congelado e crioprecipitado *Hemoderivado já é um produto industrial, no caso do Hemoderivados a hemobrás por exemplo que é a indústria brasileira de Hemoderivados recolhe o plasma que venceu nos hemocentros grandes do nosso país, que já tenha selo de qualidade Internacional, ela recolhe esse plasma que seria desprezado e a partir dele ela vai por meio de equipamentos industriais, ela vai separar derivados do sangue, por exemplo albumina (é uma proteína muito utilizada em pacientes com câncer, quando estou na fase terminal, cirrose hepática) Podem ser obtidos a partir: •doação de sangue total ou coleta por aférese. Os hemocomponentes são: •Concentrado de hemácias (CH) •Concentrado de plaquetas (CP) •Plasma fresco congelado (PFC) •Crioprecipitado (Crio) Crioprecipitado Crio=frio *Crioprecipitado: é a fração de plasma insolúvel em frio, obtido a partir da PFC, contendo glicoproteínas de alto peso molecular, fator VIII, fator von Willebrand, fator XIII e fibrinogênio. *qual é o motivo de fracionarmos, porque nós não usamos a bolsa do jeito que o doador doa? -por muitos anos as bolsas eram usadas apenas a bolsa de sangue total, quais são os inconvenientes disso? Quando se utilizava a bolsa total primeiro que a validade é por um prazo curto, o modo de conservar cada componente do sangue é diferente. por exemplo plaquetas são conservadas de 20 a 24°C os fatores da coagulação para que eles se mantenham viáveis eles têm que ser congelados em 20°C ou -30° C e a bolsa de sangue eu não posso congelar se não as hemácias se hemolisam todas. •Disponibilizar componente específico para a indicação clínica; •Transfundir apenas o que o paciente precisa; •Melhor conservação de cada constituinte (armazenamento e validade diferentes). •Vantagens logísticas, éticas e econômicas. -Ela já fica dentro da bolsa de sangue o que nós vamos usar para fazer a coleta do doador, elas têm cerca de 60 ML de uma solução anticoagulante e conservante, o anticoagulante que nós usamos em hemoterapia, tem um papel diferente do anticoagulante que a gente usa em laboratório e que nós usamos como medicação para quem tem trombose e doenças onde a coagulação é exarcebada. Mais usadas: •ACD- citrato, ácido cítrico e dextrose (mantém as hemácias por 21 dias) •CPD- citrato, fosfato e dextrose (mantém as hemácias por 21 dias) •CPDA1- citrato, fosfato, dextrose e adenina (mantém as hemácias por 35 dias) --> mais usada no Brasil e no mundo -C, é um anticoagulante Quelantes do cálcio o que é o fator 4 -O acido cítrico ele estabiliza a dextrose, que é fonte de energia. -O fosfato previne a redução do PH durante o armazenamento, preservando as células. -Dextrose suporte para a formação de ATP -Adenina também funciona como um substrato para a produção de ATP pelas hemácias •Sistemas de bolsas de sangue que contém a solução anticoagulante/conservante e solução aditiva em uma das bolsas satélites. •Solução que aumenta a sobrevida das hemácias e possibilita a sua estocagem por 42 dias. •Sag-manitol e adsol= cloreto de sódio, adenina, glicose e manitol. Solução aditiva, essa solução se chama sag-manitol, a bolsa se eu posso adicionar o sag-manitol no momento que eu preparo fracionamento dos hemocomponentes. o manitol é um estabilizante de membrana, desse modo essa bolsa de concentrado de hemácias vai ter uma semana a mais de validade, dura 42 dias. •Hemocomponente preparado a partir de uma unidade de sangue total (que nos colhemos do doador) por meio da remoção de 170-250 ml de plasma, e armazenado entre 2°C- 6°C em solução anticoagulante/preservante. •Constituído de hemácias, pouco plasma (que vai funcionar como um nutriente para as hemácias e vai permitit que essa bolsa não fique tão viscosa e que não consiga correr no paciente), contagem residual de leucócitos e plaquetas. •Obtida através do plasma rico em plaquetas ou por procedimento de aférese. •Constituído de plaquetas, plasma e contagens residuais de eritrócitos e leucócitos. -Cerca de 60 ml de plasma •Consiste da porção fluída do sangue que é separado por meio de programas de centrifugação e armazenado a - 20°C (com validade de 1 ano) ou menos (-30°C) com validade de 2 anos. •Contituído de todos os fatores de coagulação. •É preparado a partir do plasma fresco congelado em até 8 horas, seguido de descongelamento e centrifugação que remove o crioprecipitado. -depois que o plasma foi congelado temperatura inferior a -50° nós colocamos essa bolsa no freezer de 2 às 6graus positivos. como é uma mudança brusca de temperatura essas glicoproteínas de alto peso molecular e o fator VIII, fator de von Willebrand...elas precipitam, formam um precipitado esbranquiçado e então nós vamos centrifugar e vamos deixar nessa bolsa só o crioprecipitado com cerca de 30 ml de plasma que é um nutriente desses fatores e na outra bolsa satélite fica o plasma cobre ou plasma isento de precipitado. -o nosso serviço nós não usamos esse plasma pobre, guardamos durante todo o período de validade, damos preferência para usarmos o plasma fresco congelado que não foi retirado o crioprecipitado, porque nesse caso o plasma vai ter todos os fatores com coagulação e para o paciente é melhor. •Constituído de proteínas plasmáticas (contém glicoproteínas de alto peso molecular, fator VIII, fator de von Willebrand, fator XIII e fibrinogênio) que não se dissolvem no plasma em temperaturas baixas e formam um precipitado de coloração branca. •Captação dos candidatos a doação em populações saudáveis •Triagem clínica criteriosa •Assepsia eficiente do local da venopunção •Bolsas com volume <300ml 9quando eu tenho um doador muito magro e veia com calibre fino, que durante a doação não conseguimos o valor) e >495 ml 9não conseguirá impedir a coagulação)serão desprezadas- desproporção com solução anticoagulante. -são desprezadas porque tem na bolsa de sangue 60 a 80 ml anticoagulante e se eu usar no paciente, se eu fracionar uma bolsa que tem somente 300 ML, hemocomponentes vão ficar fora do padrão de qualidade. •Coleta rápida, não excedendo 15 minutos (se for longa 15 min ou mais, desprezar a bolsa) •Homogeneização da bolsa durante a coleta (para misturar com o anticoagulante). •Ingestão de AAS o anti-inflamatório não hormonal- não preparar CP. Não impede a doação se tiver tomado essa medicação nos últimos 3 dias, mas não podemos produzir plaquetas celular, eu sedimento as hemácias no fundo da bolsa por hemácias são pesadas -A força gravitacional que eu vou usar nesse processo, o tempo que eu vou colocar em cada fase e a temperatura. •Centrifugação diferencial- permite separar diferentes células numa mesma mistura •Centrifugação leve- células de baixa densidade, leves, ficam suspensas. •A preparação dos hemocomponentes ocorre por meio da separação dos constituintes do sangue pelo processo de centrifugação diferencial controlada (tempo, força, gravitacional e temperatura). •Balanceamento das unidades de sangue total. •Introdução das bolsas nas caçapas, par a par. •Ajusteda rotação e o tempo desejado. -Aqui Eu tenho uma bolsa de sangue total, nós queremos produzir concentrado de hemácias, plasma fresco congelado e concentrado de plaqueta, para produzir esses 3 hecomponentes, o programa criado tem 2 fases: *na primeira fase eu coloquei no programa 2500 rpm e é uma centrifugação considerada leve por apenas 4 minutos, a temperatura que eu vou acomodar essa bolsa deve ser de 20 a 24° C, porque é a temperatura que as plaquetas gostam, elas que vão determinar. Rodou nessa temperatura, terminou o tempo nós vamos tirar essa bolsa da centrífuga com muito cuidado, para não misturar as células., na parte de baixo hemácias e na parte de cima fica o plasma rico em plaquetas. *Nós vamos Cortar com uma seladora neste lugar e já selamos automaticamente, então não entra ar na bolsa, antes de cortar eu quebre o lacre, transfiro para ela o plasma rico em tranquetas, agora sim eu corto aqui e selo automaticamente. Tenho meu concentrado de hemácias coloca em freezer em 2 a 6° vamos marcar o número da bolsa, validade, tipo sanguíneo, resultados do teste, etc. *Agora vou centrifugar novamente essa bolsa de plasma líquido e plaquetas, agora eu quero separar a plaqueta que está junto com plasma, deixar plasma uma bolsa e plaqueta na outra, eu tenho só resíduos de leucócitos e hemácias muito pouco, então agora eu vou colocar uma força maior, vou colocar 5000 rpm e rodar 7 minutos. -As plaquetas vamos fazer um botar um plaqueário no fundo da bolsa. -Quebrou o lacre da segunda bolsinha, jogo o plasma e transfiro, extraio o plasma e vai ficar nessa bolsa de plaquetas cerca de 60 ML de plasma e as plaquetas, deixa um pouco para ser os nutrientes da plaquetas, selamos e colocamos a identificação. -agora tenho que deixar essa bolsa de plaquetas em repouso por 1 hora na bancada do laboratório de fracionamento. Agora elas estão quietas e se soltam e voltam a ficar livres no plasma. passou 1 hora essa bolsa de concentrado de plaquetas tem que ficar no homogenizador de plaquetas e devem estar na temperatura de 20 a 24° C. -Vão ficar nesse homogenizador até ser utililizadas pelo paciente, por que se eu deixar quietas elas se agregam e se ativa e perdem o valor terapêutico. -O plasma eu vou congelar em freezer com a temperatura inferior -50° em álcool Plaquetas a validade é de apenas 5 dias, a dose terapêutica é uma bolsa de plaqueta para cada 10 kg de peso. se eu tenho um paciente com 70 kg eu preciso de 7 doadores de sangue para preparar as 7 bolsas de plaquetas, por isso é o hemocomponente mais critico, pois pode faltar se não tiver doador. -Agora falta preparar o crioprecipitado. -A bolsa que nós usamos é tripla Quando vamos preparar, tem que aguardar uns 40 minutos para refrigerar a centrífuga refrigerada para a temperatura de 5° positivos, a centrífuga vai ficar mais ou menos não temperatura de uma geladeira comum. Peso a bolsa, cálculo volume, escolho o programa... Posso usar centrífugação mais pesada e por mais tempo. -Então eu vou deixar a bolsa de concentrado de hemácias separar muito bem e me dar um rendimento maior de plasma. quando tiro da centrífuga ela está mais ou menos metade hemácia e metade plasma, vou quebrar o lacre, selar, extrair o plasma para essa segunda bolsa, centrifugo e agora vamos para outra fase. Eu vou congelar aquela bolsa de plasma fresco congelado em temperatura inferior A 50°C, vou colocar essa bolsa e uma geladeira, freezer de 2 a 6° em banho Maria, como é uma mudança brusca de temperatura, o crioprecipitado, aquelas glicoproteínas de alto peso molecular precipitam e eu vejo um filamento branco, aquele filamento é o crio. Eu centrífugo 4000 rpm por 10 minutos, quebro o lacre, agora eu deixo precipitado nessa bolsa com 30 ml de plasma e aqui fica o plasma isento de crio, que nós evitamos usar. -o crioprecipitado ou o plasma simples eles vão ser armazenados em -20°C e dura um ano -30°C 2 anos. A origem desse termo aféreses significa separar pela força, remover. -nós vamos usar aférese em alguns casos como doação de hemocomponentes ou também podemos fazer aféreses para tratar o paciente que está internado. -aférese terapêutica é quando eu retiro componentes do sangue por que está em excesso e geralmente causando doenças no paciente. -aférese de hemocomponente eu tiro um componente ou mais do sangue do doador ou paciente, para fins de doação. ->para isso nós usamos uma máquina separadora de células que é chamada de máquina de aférese, essas máquinas sofrer um grande evolução tecnológica e hoje nós temos máquinas pequenas. Para fins de doação o procedimento que nós mais realizamos é a plaquetaaférese, é a coleta de plaquetas por aférese, porque eu consigo armazenar por mais tempo hemácias, crioprecipitado e plasma. -Princípio que a aférese usa é a densidade da célula -Ela não sabe que está separando plaquetas, mas sabe que está separando célula que é leve -Em geral é realizado 3 ciclos, pode ser realizado mais se eu tenho um doador com peso corporal grande, nesse caso de aférese nos procuramos pessoas que tem pelo em torno de 80 kg.