RESUMO CITOQUÍMICA - LABORATÓRIO DE BIOLOGIA CELULAR - BIO 112

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Resumo Citoquímica 
-Substância imobilizada em sua 
localização original na célula. 
-Produto da reação insolúvel e 
colorido. 
-Reação específica para uma 
determinada substância ou 
grupamento químico. 
 EVIDENCIAR DNA 
-Hidrólise ácida com HCl: 
desnatura DNA e remove as 
bases púricas. Resulta na 
formação de grupos aldeídos 
no lugar antes ocupado pelas 
bases púricas. 
-Coloração: REATIVO DE 
SCHIFF-afinidade por 
grupamentos aldeído. 
 Reativo de Schiff: 
preparado a partir de fucsina 
básica. 
-
1- colocar raízes em solução 
de etanol 70% sob 
refrigeração. 
2-3 banhos consecutivos em 
água destilada p/ remoção do 
excesso de etanol (1 min entre 
eles). 
3- Solução de HCl 3 molar (25 
minutos) 
Obs.: deixar algumas raízes na 
água destilada e não as 
encubar no HCl -> elas serão o 
controle (-). 
4-3 lavagens consecutivas em 
água destilada (1 min entre 
eles). 
5- Reativo de Schiff (30 min). 
Obs2.: transferir também as 
raízes que não sofreram 
hidrólise no HCl. 
Obs.: Reativo de Schiff é 
sensível à luz: deve ser feita 
no escuro. 
6-Algumas raízes coradas e 
outras não. 
 
7- Lavagem em água 
sulfurosa p/ remoção do 
excesso de corante e 
interrupção do processo de 
coloração. 
8- MONTAGEM DA LÂMINA: 
cortar a parte meristemática, 
pingar uma gota de ácido 
acético (CH3COOH), colocar a 
lamínula e realizar a TÉCNICA 
DE ESMAGAMENTO. 
9- Observa-se as fases do 
ciclo celular. 
 PARA MARCAR 
CARBOIDRATOS NEUTROS 
NAS CÉLULAS DE TECIDO. 
-É muito parecido com o 
procedimento da reação de 
Feulgen, mudando a primeira 
etapa. 
1- Cada lâmina é encubada no 
ácido da sua respectiva reação 
(Feulgen e PAS) por 20 minutos 
OBS.: o ácido utilizado na reação 
de PAS é o ÁCIDO PERIÓDICO 
DE SCHIFF (HIO4). 
2- A partir desse ponto as 
etapas são as mesmas que a 
reação de Feulgen, colocando 
as lâminas juntas nos próximos 
recipiente.