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Citologia Microbiana lll Microbiologia e Imunologia Aula teórica 2 - Bloco 1 Fabiana Dantas Turino - 2018.2 Espiroquetas → Flagelo interno (periplasma), movimentos em meio com alta viscosidade → Os filamentos axiais ao darem voltas dentro do invólucro externo fazem a espiroqueta girar como um saca rolhas → Gancho e anéis → Cada filamento está ligado em uma de suas extremidades a uma extremidade do cilindro citoplasmático que forma o corpo da espiroqueta: Movimentos independentes do flagelo Proteínas de superfície: → Grupo Cytophaga-Flavobacterium → Deslizamento: componentes de superfície celular → Hipótese: interação com ptns citoplasmáticas e ptns de ME (requer força próton-motiva) Movimento para frente Outro tipo de movimento: → Pili do tipo IV: mobilidade independente de flagelo → “twitching”: movimento contração Pseudomonas aeruginosa → “gliding”: deslizamento Myxococcus xanthus Pili e fímbrias Filamentos longos e delgados Principal função: Adesão Quase em todas Gram negativa Possuem base ligada na membrana plasmática em Gram-positivas e na membrana externa em Gram negativas Pili São prolongamentos pequenos e ocos: → Envolvidos com adesão de bactérias a superfícies e não com movimento → 01 pilus é composto por subunidades de pilina *Receptores específicos para pili presentes em células da cavidade oral, intestino, permitem que a bactéria fique aderida prevenindo contra a ação mecânica da saliva, e de líquidos e comida que passam pelo intestino. • 02 tipos de pili: 1) Pili de ligação ou fimbrias → curtos 2) Pili de conjugação, F ou sexuais → longos 1) Pili de ligação ou fimbrias - Ajudam na adesão de bactérias a superfície - Intensifica a colonização e contribuindo para a patogenicidade Ex: Cepas de Neisseria gonorhoeae sem fimbrias raramente causam doença. Cepas com fimbrias são patogênicas e altamente infecciosas pois se aderem as céls epiteliais do sistema urogenital e ao sêmen podendo se disseminar para outro indivíduo. 2) Pili de conjugação, F ou sexuais - Encontrado apenas em alguns grupos de bactérias - Envolvido no processo de conjugação → ligam duas céls fornecendo um caminho para transferência de de material genético (DNA) → contribuição para a variabilidade genética Glicocálix Termo geral para todas as substâncias que contêm polissacarídeos e se encontram além da parede celular = Região rica em carboidratos localizada na superfície externa da célula Cápsula → camada mais espessa e compacta. Moléculas de polissacarídeos, polipeptídeos ou os dois dispostos num gel ou polímero viscoso. Apenas algumas espécies produzem e nem todas as estirpes apresentam cápsula. Dependendo das condições do meio, a bactéria pode não expressar. A composição da cápsula é exclusiva da estirpe que a secreta, Camada limosa → mais delgada e mais frouxa. Cápsula do Glicocálix Cápsula e camada limosa → rígida, espessa → Polissacarídeos ou ptns → Gram + e Gram – → Funções: Fator de virulência: espécies patogênicas; Aplicação: vacinas Camada limosa: + fina - fracamente ligada Funções do Glicocálix Proteger a célula contra danos mecânicos e químicos → Impede a desidratação; maior resistência Ajuda na captação de nutrientes próximos as células Permite a ligação entre bactérias e adesão ao meio (superfícies) → Ex: Formação da placa dental → Biofilme → Doenças periodontais e cárie Pode ser importante nos processos de interação →ligação entre componentes de superfície celular → contribui para a virulência bacteriana (grau com que o patógeno causa doença) Impedem o reconhecimento celular e destruição por céls fagocitárias do sistema imune → propriedade antifagocítica Biofilme Comunidade bacteriana aderida a superfícies inertes ou vivas – embebidas em matriz de exopolissacarídeos Heterogêneos Etapas: 1) Adesão 2) Maturação: aumento de diversidade e complexidade 3) Ruptura de camada externa Colonização de novas superfs. Limitações: o Oxigênio/nutrientes o ↓ pH o Acúmulo metabólitos tóxicos Biofilme -> formação de “comunidades” bacterianas -> necessita a interação célula-célula. Comunicação bacteriana -> autoindutores -> Homoserina lactona-> controle da expressão de fatores de virulência extracelulares (elastase e toxinas). Membrana citoplasmática • Confere às células sua “individualidade”; • Constituídas principalmente de fosfolipídeos e proteínas → Modelo do Mosaico fluido Funções: 1) Permeabilidade seletiva e transporte de solutos; 2) Desempenha funções realizadas por organelas eucarióticas; 3) Transporte de elétrons e fosforilação oxidativa em espécies aeróbias, Contém enzimas que catalizam reações químicas que degradam nutrientes e produzem ATP 4) Ajuda na replicação do DNA, sintetiza componentes da parede celular; 5) Também contém a base dos flagelos e é responsável pelo movimento dessa estrutura Composição: 1- Lipídios Moléculas anfípáticas; → em Bacteria e Eukarya os ácidos graxos estão ligados ao glicerol por ligações ÉSTER → em Archaea, os lipídios apresentam ligações ÉTER entre o glicerol e suas cadeias hidrofóbicas. * Lipídios de membrana Domínio Archaea (termófilos, termoacidófilos e halófilos) → Glicerolipídios e Glicolipídios → Ligação do tipo ÉTER entre fitanol-saturado e glicerol (↑ estabilidade química e resistência à hidrólise) * do tipo arqueol: formam bicamada típica (diéter) * do tipo cardaquiol: formam monocamada (tetraéter) - resistência e rigidez: sem alteração de insaturação → Principais lipídios: glicerol éter e diglicerol tetra éter Definição * Fina / fluida / envolve a célula Composição * Lipídios, proteínas e carboidratos * Variação entre Bacteria, Archea e Eukarya Transporte de substâncias • Transporte passivo de substâncias pela membrana: o Sem gasto de energia o A favor do gradiente de concentração 1. Difusão Simples ⇒ Água, etanol, uréia, gases (CO2 e O2) e molécs lipofílicas pequenas 2. Difusão Facilitada ⇒ Através de UNIPORTER ou CANAIS PROTÉICOS (Permeases) Ex. K+, H2O, bases nitrogenadas OBS: Osmose = Difusão da água (aquaporinas) • Transporte ativo (uniporte, simporte e antiporte) o Requer energia o Permeases – canal – contra o gradiente – força próton-motiva Citoplasma • 80% é composto por H2O → contendo proteínas, lipídeos, carboidratos, íons • Contêm nucleóide, ribossomos e inclusões • Não apresenta citoesqueleto Nucleóide • Nucleóide = área do núcleo • Ausência de um núcleo individualizado circundado por membrana • Consiste no cromossomo bacteriano →DNA dupla fita circular • Está fixado à membrana plasmática → ptns de membrana ajudam na replicação do DNA e segregação dos cromossomos para as céls filhas • Ptns associadas porém não apresenta histonas • Bactérias frequentemente apresentam plasmídios Plasmídios • Pequenas moléculas de DNA dupla fita, geralmente circulares • São elementos genéticos extracromossômicos → Se replicam independente do DNA cromossômico → tb parece estar associado a ptns de membrana → podem ser transferidos de uma bactéria para outra • Possuem informações genéticas complementares ao cromossomo bacteriano Ex: Resistência a antimicrobianos, tolerância a metais tóxicos, síntese de enzimas e produção de toxinas Ribossomos 70S → contendo uma subunidade menor 30S e uma subunidade maior 50S Locais da síntese protéica → ~15.000 ribossomos → Subunidades: o 50S o 30S • Abundantes no citoplasma, estão frequentemente agrupados em cadeias longas chamadas poliribossomos • Funcionam como local de síntese proteica (alvo seletivo de ação de antibióticos → inibe asíntese de ptns) • Possuem duas subunidades uma grande e outra pequena e são constituídos de ác ribonucléico (rRNA) e ptn Ex: O tamanho relativo dos ribossomos e de suas subunidades pode ser determinado através do coeficiente de sedimentação expresso em unidades Svedberg (S). Os de procariotos são menores 70S que os de eucariotos 80S. Inclusões Inclusões → Depósitos de reserva (armazenamento de nutrientes) em forma de vesículas ou grânulos (substâncias altamente compactadas que não se dissolvem no citoplasma) • Evitam o aumento da pressão osmótica • Existem inclusões comuns e específicas que ajudam na identificação de determinadas espécies (potencial diagnóstico) Exemplos de Inclusões: 1) Inclusões lipídicas → Fonte de C e E (ác. Poli- beta-hidroxibutírico) 2) Grânulos polissacarídicos → glicogênio e amido 3) Vacúolos de gás (direcionam bactéria fotossintéticas para obter quantidade suficiente de luz - fototaxia) 4) Grânulos metacromáticos→ reserva de fosfato inorgânico (polifosfato) 5) Carboxissomos → vesículas contendo a enzima ribulose 1,5-difosfato → enzima necessária para a fixação do CO2 durante a fotossíntese (cianobactérias) 6) Magnetossomos → inclusões de óxido de ferro (Fe3O4) que agem como imãs, servindo para movimentação e decomposição de peróxido de hidrogênio. Endosporos • Estágio de repouso produzido pela célula vegetativa de algumas espécies bacterianas (Ex: Bacillus e Clostridium) • Cada célula produz apenas 01 esporo • Esporo bacteriano →sobrevivência em meio adverso • É diferente do esporo fúngico →reprodução • São formados dentro da célula, possuem muito pouca água • Altamente resistentes ao calor, desidratação, acidez, alcalinidade, desinfetantes e a radiação Obeservação: A escassez de nutrientes leva a esporulação, porém alguns pesquisadores acreditam que a formação dos esporos faça parte do ciclo vital normal das bactérias e que alguns esporos seriam formados mesmo em condições ambientais favoráveis. Formas de vida metabolicamente inertes de Bacillus e Clostridium (Repouso) → Resistência: Calor, dessecamento, ácidos, H2O2, desinfetantes, radiação, lisozima → Sobrevivência por anos Estrutura:do endósporo: o Exospório ⇒ Proteínas o Capa ⇒ Proteínas o Córtex ⇒ Peptídeoglicano frouxo o Núcleo (Desidratado; ↑ [Ác. Dip]) Parede celular Membrana citoplasmática Nucleóide e outros → Ácido dipicolínico (Nu) é exclusivo de esporos Esporulação
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