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Uma cadeia de polinucleotídeos é composta por vários nucleotídeos que se ligam através de ligações covalentes fortes chamadas ligações fosfodiéster. Eles se unem ao grupo 5′-fosfato de um nucleotídeo com a 3′-hidroxila do próximo nucleotídeo, formando uma cadeia com açúcares e fosfatos alternados; as bases se projetam a partir do longo eixo da cadeia. Giselle Colares Estudo dirigido 1 GenéticaGenética REPLICAÇÃO DO DNA 1. Explique o modelo de replicação aceito para o DNA O modelo de replicação é o semiconservativo no qual cada fita original de nucleotídeos permanece intacta (conservada); elas se desenrolam e cada uma serve como molde para uma nova molécula de DNA, com uma fita original e uma fita nova. 2. Explique como ocorre a formação de polinucleotídeos, ou seja, como ocorre a ligação entre os nucleotídeos. 3. Quanto ao sentido de orientação da molécula de DNA na replicação, qual é a direção da fita molde que dá origem à fita líder ou contínua? E a molde que origina a fita atrasada ou descontínua? Giselle Colares Fita líder: À medida que o DNA se desenrola, a fita molde exposta no sentido 3′ → 5′ possibilita a síntese contínua da nova fita (no sentido 5′ → 3′). Fita atrasada: A outra fita molde é exposta no sentido 5′ → 3. À medida que a extensão curta do DNA for desenrolada, a síntese deve seguir 5′ → 3′; ou seja, no sentido oposto da fita não desenrolada. Como apenas uma extensão curta de DNA precisa estar não enrolada antes de a síntese na sua fita começar, o maquinário de replicação logo fica sem molde. Nesse momento, mais DNA está desenrolando, fornecendo um novo molde na extremidade 5′ da nova fita. A síntese de DNA deve iniciar novamente na forquilha de replicação e seguir na direção oposta do movimento da forquilha até chegar ao segmento previamente replicado de DNA. Esse processo é repetido várias vezes, então a síntese dessa fita ocorre em explosões curtas, descontínuas. Giselle Colares 5. Conceitue: DNA, cromatina e cromossomo DNA: é uma macromolécula de ácido nucléico polimérica composta de três tipos de unidades: um açúcar com cinco carbonos, a desoxirribose; uma base contendo nitrogênio; e um grupo fosfato. A estrutura anatômica do DNA carrega a informação química que permite a transmissão exata da informação genética de uma célula para suas células-filhas e de uma geração para a próxima. Cromatina: Material encontrado no núcleo eucariótico, composto por DNA e proteínas. Cromossomo: Estrutura composta por DNA e proteínas associadas que carreia e transmite a informação genética. 4. Quantas origens de replicação há no DNA circular dos procariontes? E no DNA dos eucariotos? Nos procariontes, como a E. coli, a replicação tem início em um único sítio denominado origem de replicação ou oriC. Já o DNA eucariótico tem muitas origens de replicação. Em cada origem, um complexo multiproteico de reconhecimento da origem se liga para iniciar o desenrolamento do DNA. Giselle Colares 6. Descreva o processo de replicação nos telômeros e porque essa estrutura é importante nos cromossomos São replicados por uma enzima RNA-proteína chamada telomerase. A parte RNA da enzima tem de 15 a 22 nucleotídios que são complementares à sequência rica em G. Essa sequência pareia com a extremidade 3′ que sobressai do DNA e fornece um molde para a síntese de cópias adicionais de DNA das repetições. Os nucleotídios de DNA são adicionados à extremidade 3′ da fita um por vez e, após vários nucleotídios serem adicionados, o molde de RNA desloca o DNA e mais nucleotídios são adicionados à extremidade 3′. Em geral, são adicionados de 14 a 16 nucleotídios na extremidade 3′ da fita rica em G. Dessa forma, a telomerase pode expandir a extremidade 3′ do cromossomo sem o uso de um molde complementar de DNA. Os telômeros desempenham no mínimo três funções importantes. Eles têm de (1) impedir que desoxirribonucleases decomponham as extremidades das moléculas lineares de DNA, (2) impedir a fusão das extremidades com outras moléculas de DNA e (3) facilitar a replicação das extremidades das moléculas lineares de DNA sem perda de material. Giselle Colares 7. Ordene os seguintes componentes na sequência em que são usados durante a replicação: helicase, proteína ligadora do DNA, DNA girasse e RNA Primase. Explique o que cada enzima faz. A replicação começa quando uma proteína de iniciação se liga à origem da replicação e desenrola um trecho curto sintetizado pela RNA primase que fornece um grupo 3’-OH de DNA ao qual a DNA helicase se fixa. A DNA helicase desenrola o DNA na forquilha de replicação, as proteínas ligadoras de DNA de fita única se ligam a fitas únicas de nucleotídios para evitar estruturas secundárias e a DNA girase (uma topoisomerase) remove a torção à frente da forquilha de replicação que é gerada pelo desenrolamento. 8. Descreva as principais diferenças entre a replicação de eucariotos e procariotos Primeiro, o tamanho muito maior dos genomas eucarióticos exige que a replicação seja iniciada em múltiplas origens. Segundo, os cromossomos eucarióticos são lineares, enquanto os procarióticos são circulares. Terceiro, o molde de DNA está associado a proteínas histonas na forma de nucleossomos, e a montagem dos nucleossomos deve ser feita imediatamente à replicação do DNA.
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