[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] As amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e...

[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] As amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e armazenadas em tubos, ambos "livres" de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse – nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou -80 ºC). Todos os procedimentos devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA, associe os itens, utilizando o código a seguir:

I- Pipeta 25 μl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 μl da amostra de sangue no mesmo tubo, e por último pipete 200 μl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.

II- Pipete 210 μl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, pipete 640 μl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto.

III- Aposentar o Eppendorf da centrífuga, descer o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 μl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem irá utilizar 600 μl no tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo de coleta e centrifugue novamente.

IV- Aposentar o Eppendorf da centrífuga, descer o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 μl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e centrifugue a amostra.

( ) Etapa de Lise.

( ) Etapa de Ligação.

( ) Etapa de Eluição.

( ) Etapa de Lavagem.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:


A) I - II - III - IV.
B) II - III - IV - I.
C) III - IV - I - II.
D) IV - III - II - I.