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Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem s...

Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse – nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todos os procedimentos devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir: I- Etapa de Lise. II- Etapa de Ligação. III- Etapa de Lavagem. IV- Etapa de Eluição. ( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de sangue no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min. ( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. ( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo de coleta e centrifugue novamente. ( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e centrifugue a amostra.Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA: A) II - III - IV - I. B) I - II - IV - III. C) IV - III - II - I. D) I - II - III -

💡 3 Respostas

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Ed Verified user icon

A sequência correta é a alternativa B) I - II - IV - III. Explicação: - A etapa de Lise é representada pela primeira parte da descrição, onde é adicionado o tampão lise S e a Proteinase K para quebrar as células e liberar o DNA/RNA. - A etapa de Ligação é representada pela segunda parte da descrição, onde é adicionado álcool 96% para que o DNA/RNA se ligue a ele e precipite. - A etapa de Eluição é representada pela quarta parte da descrição, onde é adicionado o tampão de eluição S para que o DNA/RNA seja liberado do suporte de coluna. - A etapa de Lavagem é representada pela terceira parte da descrição, onde é adicionado o tampão de lavagem SI e SII para remover impurezas e resíduos do processo de extração.
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Priscilia Fernandes

ESSA RESPOSTA ESTÁ ERRDA, FIZ ASSIM E DEU ERRO. NA VERDADE A RESPOSTA CERTA É 1,2,3,4 NESSA SEQUÊNCIA.


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Matheus Romano


Explicação:

Passos para realizar a Extração e Purificação de DNA

Alguns procedimentos básicos são realizados para isolar e purificar o DNA. São eles:

Etapa de Lise – o primeiro passo consiste em realizar a lise (quebra) da célula para expor o DNA.

Ligação – uma membrana de sílica retém e concentra o DNA.

Etapa de Lavagem – quebrar e emulsionar a gordura e as proteínas que formam a membrana da célula. Isto normalmente é feito utilizando soluções detergentes e por centrifugação. As etapas de lavagem removem estes resíduos contaminantes, restando apenas a membrana com o DNA.

Etapa de Eluição – por fim ocorre a liberação dos ácidos nucléicos (DNA/ RNA) da membrana. Isto proporciona o DNA purificado pronto para ser utilizado em diferentes aplicações.


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