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(Questão adaptada de concurso público da UFRJ - Edital 293/2016, cargo: Biólogo- Biologista Molecular.) Em tecnologia de DNA recombinante, 0 biotecnólogo insere um gene de interesse, isolado por meio de reação de transcrição reversa associada à PCR (RT-PCR), em um vetor, e este último em um organismo hospedeiro para expansão do vetor ou expressão do gene. Assinale a alternativa que apresenta e descreve corretamente 0 método utilizado para introduzir plasmídeos em células de bactéria E.coli no laboratório: A Transformação um lisado de células é incubado com 0 DNA e submetido a uma corrente elétrica. B Microinjeção - células são manipuladas ao microscópio e 0 DNA é introduzido com ajuda de uma agulha. C Infecção bacteriófagos são utilizados para a introdução do DNA de interesse. D Transfecção DNA é transferido para um lisado de células, pelo uso de lipofectamina. Transformação células são incubadas com 0 DNA na presença de cálcio e recebem um choque E térmico.
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Lôys Lenne F. Farias

há 2 meses

Respostas

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há 2 meses

Vamos analisar as alternativas apresentadas para identificar o método correto utilizado para introduzir plasmídeos em células de E. coli. A) Transformação: um lisado de células é incubado com o DNA e submetido a uma corrente elétrica. - Esta descrição não está correta, pois a transformação geralmente envolve a incubação de células competentes com DNA e, em seguida, um choque térmico, mas não necessariamente um lisado. B) Microinjeção: células são manipuladas ao microscópio e o DNA é introduzido com ajuda de uma agulha. - Este método é mais utilizado em células eucarióticas, não em E. coli. C) Infecção: bacteriófagos são utilizados para a introdução do DNA de interesse. - Este é um método válido, mas não é o mais comum para a transformação de E. coli. D) Transfecção: DNA é transferido para um lisado de células, pelo uso de lipofectamina. - Transfecção é um termo mais associado a células eucarióticas, não a E. coli. E) Transformação: células são incubadas com o DNA na presença de cálcio e recebem um choque térmico. - Esta é a descrição correta do método de transformação de E. coli, onde as células competentes são tratadas com cloreto de cálcio e, em seguida, submetidas a um choque térmico para facilitar a entrada do DNA. Portanto, a alternativa correta é: E) Transformação: células são incubadas com o DNA na presença de cálcio e recebem um choque térmico.

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