Vamos analisar cada afirmativa: I - A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. Verdadeiro, pois em PCR em tempo real, um menor valor de Ct (threshold cycle) indica que a amostra tem uma maior quantidade inicial do alvo amplificado. II - A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. Falso, um maior Ct indica que há menos material disponível, pois leva mais ciclos para atingir o limiar de detecção. III - A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C. Verdadeiro, se a amostra B ultrapassou o threshold após o ciclo 20, isso sugere que sua quantidade de material está entre as amostras A (com menor Ct) e C (com maior Ct). Com base nas análises, as afirmativas verdadeiras são I e III. Portanto, a alternativa correta que contém todos os itens verdadeiros é: não há uma alternativa correta listada, pois a II é falsa. Se precisar de mais ajuda, é só avisar!