Que diferença existe entre a coloração de Gram- da Gram+ ???????

A princípio, há diferentes graus de permeabilidade na parede dos microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos.

As bactérias Gram-positivas retém o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano (polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na região exterior à membrana celular das bactérias) em suas paredes celulares, apresentando-se na cor roxa.

Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptidoglicano mais fina que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final.

Exemplos de bactérias Gram-positivas

Bacillus, Nocardia, Clostridium, Propionibacterium, Actinomyces, Enterococcus, Cornyebacterium, Listria, Lactobacillus, Gardnerella, Mycoplasma, Staphylococcus, Streptomyces, Streptococcus.

Gram-positiva

Exemplos de bactérias Gram-negativas

Escherichia, Helicobcater, Hemophilus, Neisseria, Klebsiella, Enterobacter, Chlamydia, Pseudomonas, Salmonella, Shigella.

Gram-negativa

PASSO A PASSO DA METODOLOGIA DE GRAM

1.  Cubra o esfregaço com violeta-de-metila e logo após deixe por aproximadamente 15 segundos;
2.  Adicione igual quantidade de água sobre a lâmina coberta com violeta-de-metila e então deixe agir por mais 45 segundos;
3.  Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina com lugol diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto;
4.  Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente;
5.  Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não desprenda mais corante;
6.  Lave em um filete de água corrente;
7.  Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos;
8.  Lave em um filete de água corrente;
9.  Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente com o auxílio de um papel de filtro limpo;
10.  Visualize no microscópio. Logo após leia em objetiva de imersão (100 X).

Método de coloração de Gram

APLICAÇÃO E BENEFÍCIOS DA COLORAÇÃO DE GRAM

De fato a metodologia irá ajudar na identificação de uma infecção bacteriana, determinando qual é o tipo de bactéria. Em outras palavras, a diferenciação das bactérias Gram-negativas e Gram-positivas permite ao médico determinar um tratamento eficaz ao paciente, dessa forma aplicando a terapia adequada em cada caso.

Mesmo que nem todas as bactérias possam ser diferenciadas através da coloração de Gram, com certeza a metodologia tem grande aplicação no diagnóstico clínico e pesquisa biológica.

PRODUTOS PARA A METODOLOGIA DE COLORAÇÃO DE GRAM

Lâminas para microscopia

Microscópio

Alças de inoculação

Meios de cultura

Simulação

Por fim, neste site brainpop.com existe um jogo em que você conseguirá simular o passo-a-passo para a realização da coloração de Gram.

Referência

• Ministério da Saúde. Técnica de Coloração de GRAM

Compartilhar 

Veja também

• 
• 17.nov.2020
• Urocultura no Diagnóstico de Infecções do Trato Urinário (ITU)
• 
• 30.out.2020
• Entomologia Forense Além da Investigação Criminal
• 
• 21.set.2020
• Conte com a Kasvi para a realização de extração de DNA/RNA mais rápida e pura

A diferença entre o gram + e o gram - é que o gram + tem uma parede celular que apresenta uma grande quantidade de peptidioglicano, o que leva o corante a ficar retido. Já o gram - apresenta uma fina camada de peptidioglicano a qual não é capaz de reter esse corante.

gram positiva- roxa\ azul

gram negativa- vermelha