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Paola Senatore 106 – BFF I Transporte Através da Membrana Membrana Celular É a barreira que separa o compartimento intracelular dos sinais exteriores da célula Funções • Isolamento físico • Regulação de trocas com o meio • Comunicação entre célula e meio • Suporte estrutural com o citoesqueleto e junções especializadas entre as células Modelo de Mosaico Fluido • Bicamada de fosfolipídios (proteínas parciais e completas + carboidratos na superfície externa) • A quantidade de ptn e lipídios varia dependendo da origem da membrana Constituição das Membranas • Colesterol, fosfolipídios, carboidratos e proteínas - colesterol + fosfolipídios = lipídeos biliares - fosfolipídio + carboidratos = glicolipídios - carboidrato + ptn = glicoproteínas !!! glicolipídios e glicoproteínas = estabilização estrutural, reconhecimento celular e resposta imune Proteínas das Membranas Estruturais • Integrais: atravessam a membrana completamente • Associadas: não atravessam completamente Funções • Transportadoras - carreadoras = muda sua conformação quando recebem um substrato - canais = abertos ou com comportas ❊ as comportas são abertas ou fechadas de forma mecânica (estímulos de pressão), ou sendo voltagem dependentes ou quimicamente sensíveis. • Estruturais: citoesqueleto ou junções celulares • Enzimas: ativadas para o metabolismo celular e transferência de sinais. • Receptores de membrana - associados a um canal (abre e fecha) ou a uma enzima (comunicação celular) Proteínas Transmembrana Movem-se lateralmente direcionadas por fibras do citoesqueleto e dão polaridade à membrana. Transportadores: Proteínas de Canais Utilizadas na difusão simples. Canais de íons podem ser específicos para um ou mais íons (cargas e tamanhos similares). Seletividade do canal é dada pelo diâmetro e pelos aminoácidos que compõem o canal (abre e fecha). Paola Senatore 106 – BFF I Estados dos Canais Proteicos - abertos: passam maior parte do tempo abertos. Íons se movendo sem restrições (poros = passagem contínua) - fechados: permitem regulação do movimento das moléculas entre o fluido intracelular e extracelular (estados: fechado, aberto e inativo) Controle desses canais - moléculas mensageiras intracelulares ou por ligantes extracelulares (quimicamente sensível) - estado elétrico da célula (eletricamente sensível – voltagem) - por mudança física (mecanicamente sensíveis – mudança de temperatura ou tensão) !! os transportes através de canais são passivos por diferença de concentração (difusão simples) Transportadores: Proteínas Carreadoras Jogam uma substância do meio intracelular para o extracelular (vice- versa) mudando sua conformação. Não comunicam diretamente os meios intra e extracel. Possuem sítios de ligações específicos para os substratos. Transporte ativo ou passivo (difusão facilitada). Ex: bomba de sódio e potássio Movimento através das Membranas Água, oxigênio, dióxido de carbono e lipídios movem-se facilmente através das membranas. Apolares passam sem necessitar de proteínas difundindo-se pelos ácidos graxos. Água apesar de polar, passa somente com a ajuda de proteínas. Íons e moléculas polares grandes (proteínas- através de endocitose ou exocitose) encontram dificuldades para atravessar a membrana. Influencia no transporte da membrana: -tamanho da molécula -solubilidade em lipídeos (polaridade) Mecanismos de transporte através da membrana Transportes passivos Sem gasto de energia, usa apenas energia cinética das moléculas. A favor do gradiente de concentração (maior ➝ menor). • Difusão maior conc. ➝ menor conc. - simples: não precisam de um meio (moléculas apolares atravessam por meio de proteínas de canais) - facilitada: precisa de uma proteína carreadora para permitir a passagem (ex: água) Transportes ativos Com gasto de energia (energia cinética das moléculas + ATP). Contra o gradiente de concentração (menor ➝ maior). • Endocitose • Exocitose Paola Senatore 106 – BFF I • Fagocitose • Transporte Ativo Primário - com ajuda de uma proteína - bomba de sódio e potássio • Transporte Ativo Secundário - utiliza o gradiente de concentração criado pelo primário Propriedades da Difusão Simples • Taxa de difusão depende da capacidade da molécula de se dissolver na camada lipídica da membrana. Quanto mais lipofílica maior a taxa. • Taxa de difusão é diretamente proporcional à área de superfície das moléculas. Quanto maior a superfície maior a taxa. (enfisema pulmonar reduz a área de superfície disponível) • Taxa de difusão é inversamente proporcional à espessura da membrana. Quanto mais espessa a membrana, mais lenta a taxa de difusão. Transporte mediado por carreadores pode ser passivo ou ativo • Passivo: as moléculas se movem a favor do gradiente de concentração (maior ➝ menor) para atingir o equilíbrio = difusão facilitada • Ativo: precisa de energia proveniente do ATP e as moléculas movem-se contra o gradiente de concentração (menor ➝ maior) 3 propriedades pois dependem da interação do substrato com uma proteína: especificidade, competição e saturação Propriedades do Transporte Mediato Passivo ou Ativo 03 propriedades pois dependem da interação do substrato com uma proteína: especificidade, competição e saturação. • Especificidade: quanto mais a substância for parecida com o carreador mais fácil se ligar para promover o transporte (os GLUTs são específicos para hexoses como glicose, galactose, frutose) • Competição: relacionada com a especificidade. Cada um dos GLUTs tem preferencia por uma das hexoses baseada na afinidade da ligação. • Inibição Competitiva: a molécula competidora não é transportada porém bloqueia o transporte. (ex: maltose compete pelo sitio de ligação mas é grande demais para ser transportada) • Saturação: carreadores transportando o substrato em sua taxa máxima. depende da concentração do substrato e do número de moléculas carreadoras disponíveis. - se aumentarmos o número de células carreadoras transportadoras na membrana impedimos a saturação das células - retirando as carreadoras diminui-se o movimento das moléculas Paola Senatore 106 – BFF I Transporte Ativo Através da Membrana Contra o gradiente de concentração então usa energia que vem direta ou indiretamente da ligação fosfato de alta energia do ATP. As substâncias passam através das proteínas carreadoras. Cria um estado de desequilíbrio pois torna as diferenças de concentração mais pronunciadas. • T.A. Primário - usa energia de maneira direta - carreador = proteína com atividade ATPase (quebra o ATP). Ex: Bomba de Sódio Potássio • T.A. Secundário - usa energia indiretamente - usa a molécula que tem o gradiente de concentração maior para jogar uma outra molécula pra dentro da célula ou tirar uma molécula da célula enquanto uma outra entra. • simporte ou co-transporte: quando uma molécula leva outra para o mesmo lado no transporte ativo secundário. • antiporte ou contratransporte: quando uma molécula vai para um lado e outra vai para o outro. Pode ser primário ou secundário(3Na+ pra fora, 2K+ pra dentro). A molécula que transporte deve estar a favor do gradiente de concentração. Bomba de Sódio e Potássio - ATPase Principal transportador proteico das células animais pois mantém o gradiente de concentração de Na+ e K+ através da membrana.Em algumas células essa bomba usa cerca de 30% de todo o ATP produzido pela célula para exportar 3Na+ e importar 2K+. Transporte ativo primário antiporte. As proteínas de membranas só funcionam quando seus sítios de substratos estão ocupados. ______________________________________ Todos os processos movem moléculas através de uma única membrana = membrana plasmática Moléculas que entram e saem do corpo cruzando o epitélio devem atravessar duas membranas celulares = transporte transepitelial ______________________________________ Transporte Transepitelial Moléculas que precisam atravessar duas membranas. As moléculas movem-se através do epitélio usando transporte ativo e passivo. As moléculas cruzam a primeira membrana (membrana apical) quando elas se movem para dentro da célula epitelial, proveniente do ambiente externo. E a segunda Paola Senatore 106 – BFF I quando elas deixam as células epiteliais (membrana basolateral) para entrar no fluido extracelular. Cruzam a membrana apical: meio externo ⟶ dentro da célula epitelial Cruzam a membrana basolateral: célula lateral ⟶ fluido extracelular Células polarizadas do epitélio de transporte = membranas apical e basolateral com diferentes propriedades (proteínas diferentes). Transporte Transepitelial da Glicose Jogando o sódio para fora da célula, o gradiente de concentração de Na+ extracelular aumenta. Uma célula de glicose é levada (contra o grad.) pra dentro da célula junto a molécula de sódio usando esse gradiente. Como agora a concentração de glicose dentro da célula é maior, esta consegue passar por difusão facilitada para a corrente sanguínea do interstício. A polarização de transportadores ressalta numa única via de movimento de certas moléculas através do epitélio. As células do epitélio renal e intestinal podem alterar sua permeabilidade por seletivamente inserir ou retirar proteínas da membrana. O transporte da glicose pelo epitélio intestinal ou renal envolve transporte ativo com o sódio e difusão facilitada. Distribuição de Água e Solutos do Corpo Difusão acontece até gerar um estado equilíbrio. Poucas substancias no corpo são mantidas em equilíbrio pois a membrana celular e o epitélio capilar atuam como barreira seletiva que impede a difusão de solutos livremente pelo corpo. O transporte ativo ajuda a criar ou manter diferenças na concentração dos solutos. Apesar da água ser polar ela passa praticamente livre em todos os canais iônicos existentes. Distribuição dos solutos nos compartimentos de fluidos corporais Compartimento intracelular = parte líquida do citoplasma Compartimento intersticial = fluido intersticial (espaço entre a pele e os demais órgãos) Compartimento intravascular = plasma Interstício e plasma tem concentração iônica praticamente igual pois os íons (Na+, K+, Ca+) passam livremente pelas membranas dos capilares – osmolaridade iguais pois a água passa livremente. Proteínas e fosfatos não passam livremente do intra para o extracelular. Só passam através de vesículas. Os íons também não passam livremente, eles precisam de proteínas carreadoras. A permeabilidade seletiva das membranas celulares cria um corpo em que compartimentos intracelular e extracelular são quimicamente e Paola Senatore 106 – BFF I eletricamente diferenciados, porém com igual concentração total de solutos. Ou seja, a osmolaridade entre o plasma, o interstício e o meio intracelular são iguais, porém os tipos de células são diferentes fazendo com que o gradiente elétrico seja também diferente. A água movimenta-se livremente entre os compartimentos mantendo o equilíbrio osmótico. Água: a molécula mais importante do organismo Crianças possuem mais água do que os adultos. É essencialmente a única molécula que movimenta-se livremente entre os compartimentos e alcança um estado de equilíbrio. A distribuição uniforme da água através dos compartimentos corporais é conhecida com equilíbrio osmótico. • Osmose : água move-se através de uma membrana semipermeável em resposta a um gradiente de concentração. Sempre da menor concentração para a maior (tentar diluir a região mais concentrada de soluto) para tentar atingir o equilíbrio entre as soluções. A água passa através de canais de membrana (proteínas). Concentrações Concentrações fisiológicas são expressas como osmolaridade. • Osmolaridade = número de partículas/litro de solução (1 mol de glicose = 6,02x1023 partículas) - é expressa em osmoles/litro (OsM) - para soluções fisiológicas muito diluídas: miliosmoles/litro (mOsM) A osmolaridade normal no corpo humano varia de 280 a 296 miliosmoles/litro. • Osmolalidade: concentração expressa como miliosmoles de soluto/kg muito usado em clínica. Tonicidade Se refere a soluções e descreve o que acontece com o volume celular de uma célula que foi colocada em solução. • solução isotônica = célula não muda o seu tamanho • solução hipotônica = célula ganha água e incha • solução hipertônica = célula perde água e murcha [ ] solução > [ ] intracelular : célula perde água – perde volume [ ] solução = [ ] intracelular : a quantidade de água que entra é a mesma quantidade da que sai [ ] solução < [ ] intracelular : a célula ganha água – ganha volume !!! Se a célula e a solução tem concentrações são iguais, são isosmóticas. O que causou a osmose? - os solutos penetrantes que estão na solução Paola Senatore 106 – BFF I Potencial de Membrana Quando o equilíbrio elétrico é interrompido cria-se um gradiente elétrico e um gradiente químico = gradiente eletroquímico (gasto de ATP) Equilíbrio osmótico é mantido porque a água pode passar livremente em resposta ao movimento de soluto. O gradiente elétrico entre o fluido extracelular e o intracelular é conhecido como diferença de potencial de membrana em repouso ou potencial de membrana. Potencial pois o gradiente elétrico criado é uma fonte de energia armazenada ou potencial. Repouso pois o gradiente elétrico é observado em todas as células vivas, mesmo aquelas que aparentam não ter atividade elétrica.