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1 Rúbia Rogovski – Medicina Veterinária UFRGS Microbiologia Clínica - Micologia Características gerais dos fungos INTRODUÇÃO • A parede celular contém quitina e outros polissacarídeos. • Heterotróficos, produzem exoenzimas e obtêm nutrientes por absorção. • Hifas ramificadas e leveduras unicelulares são as duas principais formas. • Reproduzem-se sexuada e assexuadamente com a produção de esporos. • Crescem aerobiamente a 25°C; alguns bolores são aeróbios estritos. • Toleram pressão osmótica alta e pH baixo (inferior a 5); crescem em ágar dextrose Sabouraud de pH 5,5. • Resistentes a drogas antimicrobianas que são eficazes contra bactérias. • A maioria é saprófita; alguns causam infecções oportunísticas. • Dermatófitos são patógenos que causam infecção cutâneas em animais e humanos. FORMAS • Fungos filamentosos (bolores ou mofos – crescem como hifas) e leveduras (forma oval). • Dimórficos ocorrer tanto como bolores ou leveduras. ESPÉCIES • Saprofíticos: decomposição de matéria orgânica; infecções oportunistas. • Dermatófitos parasitas: patogênicos; infecção cutânea. • Mutualistas: associação obrigatória com outros mco; não patogênicos. ESTRUTURA • Parede celular das hifas: quitina • Leveduras: proteína + polissacarídeos • Na bicamada da membrana celular tem-se o ERGOSTEROL – alvo de antimicóticos. CRESCIMENTO, REPRODUÇÃO E FORMAÇÃO DE COLÔNIAS • Esporos fúngicos transportados pelo ar irão germinar em locais com condições favoráveis. Esporos incham e sua atividade metabólica aumenta antes da produção de projeções tubulares que os transformam em hifas 2 Rúbia Rogovski – Medicina Veterinária UFRGS Microbiologia Clínica - Micologia ramificadas. A extensão das hifas e ramificações laterais formam o micélio. • Na reprodução assexuada formam-se 2 esporos: conídios e esporangiósporos. → Os conídios são formados nos conidióforos, e os esporangiósporos são dentro do esporângio, estrutura semelhante a um saco que sustenta uma hifa aérea chamada esporangióforo. • Dermatófitos: macroconídios e microconídios são formados em culturas nas ramificações laterais das hifas. Artroconídios são formados a partir da desintegração de hifas dentro de estruturas queratinizadas. • Na maioria das leveduras a reprodução assexuada se dá por brotamento. CARACTERÍSTICAS GERAIS DAS DOENÇAS FÚNGICAS • Micoses: invasão de tecidos – classificadas de acordo com local de lesão. • Micoses superficiais → Dermatomicoses: infecções oportunísticas da pele ou das junções mucocutâneas resultam do crescimento excessivo de fungos, tais como espécies de 3 Rúbia Rogovski – Medicina Veterinária UFRGS Microbiologia Clínica - Micologia Cândida ou Malassezia pachydermatis. → Dermatofitoses: que são clinicamente mais importantes pela contagiosidade e pelo potencial zoonótico, estão associadas à invasão e à destruição de estruturas queratinizadas por dermatófitos como as espécies de Microsporum e as de Trichophytum. • Micoses subcutâneas resultam da invasão fúngica localizada na derme ou tecido subcutâneo frequentemente após a penetração de um corpo estranho. → Feo-hifomicoses: causada por fungos pigmentados. → Micetomas: lesões granulomatosas semelhantes à tumores causadas por fungos saprofítico. → Pseudomicetomas: micetomas associados à invasão por dermatófitos. • Micoses sistêmicas: frequentemente originadas no trato respiratório ou digestivo após infecções oportunistas por fungos saprofíticos. FATORES QUE PREDISPÔE • Alteração de microbiota por uso prolongado de antimicrobianos • Imunossupressão após terapia com corticosteróides ou infecção viral • Exposição a altas doses infectantes de esporos em espaços confinados. MICOTOXICOSES • Doenças decorrentes da ingestão de toxinas fúngicas pré formadas em alimentos/grãos armazenados. DIAGNÓSTICO • Sinais clínicos e histórico podem indicar um diagnóstico presuntivo, particularmente na dermatofitose. • Os espécimes para diagnóstico incluem pêlos e raspas cutâneas de micoses superficiais e biópsias ou espécimes post-mortem de micoses subcutâneas e sistêmicas. • O exame microscópico de preparações úmidas pode ser confirmatório: → Artrósporos rodeando pêlos infectados ou hifas nos tecidos infectados podem ser demonstráveis após clarificação de espécimes com algumas gotas de KOH a 10% sob uma lamínula por algumas horas; → Cryptococcus neoformans pode ser demonstrado, em fluido cerebrospinal misturado com nanquim ou nigrosina, como células em brotamento com cápsula larga; → Cabeças de esporos podem ser examinadas sob uma lamínula após montagem de uma amostra de uma colônia em uma gota de lactofenol-azul de algodão; outros métodos para exame direto incluem cultura em lâmina e técnicas com fitas adesivas transparentes; as células de leveduras podem ser coradas com azul de metileno ou pelo método de Gram. • Os fungos geralmente são isolados em ágar dextrose Sabouraud (pH 5,5), que inibe o crescimento da maioria das bactérias. • A adição de cloranfenicol e de ciclo- heximida aumenta a seletividade pela 4 Rúbia Rogovski – Medicina Veterinária UFRGS Microbiologia Clínica - Micologia inibição de alguns fungos contaminantes de crescimento rápido, como os zigomicetos. • Para estimular o crescimento da fase de leveduras de fungos dimórficos, há necessidade de meios enriquecidos, como ágar com infusão de cérebro e de coração, mais 5% de sangue e incubação a 37°C. • A demonstração histopatológica de hifas fúngicas ou de formas de leveduras geralmente é necessária para confirmar o significado dos isolados de infecções micóticas profundas. • A reação do ácido periódico de Schiff (PAS) ou a impregnação de prata- metanamina pode ser usada para demonstrar elementos fúngicos em cortes de tecidos. Fungos filamentosos: Leveduras: DIFERENCIAÇÃO DE ESPÉCIES • A forma do estágio sexuado (teleomorfo) é usada para classificar um fungo em um filo. • O exame de cabeças de esporos para o arranjo dos conídios e o tipo e morfologia dos esporos podem permitir a diferenciação inicial. A presença de um esporângio maduro identifica o fungo como sendo um zigomiceto. • As características de hifas vegetativas que podem ser usadas para diferenciação incluem: → presença ou ausência de septo; → hialinas (incolores) ou dematiácias (pigmentadas); → estrutura específica das hifas, como hifas em forma de raquete ou hifas espirais. • Características coloniais: tamanho e aparência após tempo de incubação especificado, cor do anverso e do reverso, superfície com elevação ou depressão. • As leveduras podem ser diferenciadas pela aparência colonial, pelo tamanho e pela forma de células individuais. • Reações bioquímicas também são usadas para diferenciação. • Os fungos dimórficos crescem como bolores quando cultivados em ágar dextrose Sabouraud a 25°C e como 5 Rúbia Rogovski – Medicina Veterinária UFRGS Microbiologia Clínica - Micologia leveduras quando cultivados em meios enriquecidos a 37°C. • Antígenos solúveis produzidos por fungos dimórficos podem ser usados para identificação em testes imunológicos. • Sondas específicas de ácidos nucléicos estão sendo desenvolvidas para identificação rápida e confiável de fungos dimórficos MICOSES CUTÂNEAS • Microsporose • Trichophytose • Malasseziose • Candidose • Geotricose • Scopulariopsiose MICOSES SUBCUTÂNEAS • Esporotricose • Rhinosporidiose * • Micetomas eumicóticos • Cromomicoses • Pytiose * MICOSES SISTÊMICAS • Histoplasmose • Coccidiodomicose • Paracoccidiodomicose • Blastomicose • Aspergilose • Zigomicose • Criptococose• Candidose DOENÇAS QUE PREDISPÕE INFECÇÕES OPORTUNISTAS DIABETES MELLITUS • Reduzida resposta polimorfonuclear • Função leucocitária deficiente – fagocitose ineficiente TERAPIA (IATROGÊNICA) • Corticosteróides = hiperfunção da córtex da adrenal → Supressão da resposta inflamatória (menos migração de neutrófilos /fagocitose) → Depressão na formação de anticorpos. • Antimicrobianos → Alteram a microbiota normal → Podem levar à seleção de espécies resistentes DISCRASIA SANGUÍNEA*: LEUCEMIA E ANEMIA • Principalmente nas formas pulmonar e disseminada de mucormicose • Redução das taxas normais de imunoglobulinas • Anticorpogênese defeituosa • Produção de imunoglobulinas anormais *Não ocorre acidose nem hiperglicemia nessas condições DISTÚRBIOS ENDÓCRINOS • Síndrome de Cushing (=hiperfunção da córtex da adrenal) • Hipopituitarismo LINFOMAS EM GERAL • Função do sistema imunologicamente competente. DOENÇAS DEBILITANTES • Alteram a síntese de proteínas em geral.
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