Cromatografia: Técnica de Separação

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Cromatografia
Beatriz Oliveira
Giulia Vitoria
Isadora Simplício
Separação de uma mistura de dois ou mais compostos 
diferentes ou íons pela distribuição entre duas fases. 
• Cromatografia em coluna (CC): é uma técnica baseada 
na capacidade de adsorção e na solubilidade; 
particionamento de fases envolvendo sólido–líquido. 
O sólido é qualquer material que não dissolva na fase 
líquida. Utilizada para purificação de substâncias 
orgânicas ou, para remover o material de partida ou 
isolar o produto desejado de uma reação. 
Cromatografia 
• Cromatografia em camada delgada (CCD): técnica para 
a separação rápida e a análise qualitativa de pequenas 
quantidades de material. Utilizada para analisar um 
composto; determinar o número de componentes de 
uma mistura, determinar o solvente mais apropriado 
para utilizar em cromatografia em coluna; acompanhar 
da separação em cromatografia em coluna; avaliar a 
eficiência da cromatografia em coluna; acompanhar o 
progresso de uma reação.
BRONDANI, PB. ENGEL, Randall, et al. 2016
Analito: uma substância alvo de análise. É transportado com o fluxo da fase móvel através 
da fase estacionária e interage com ele.
Fase estacionária: o componente no processo de separação ficará fixo na superfície de 
outro material líquido ou sólido.
Fase móvel: é o solvente ou uma mistura de solventes que é usada para eluir uma 
mistura e promover a separação dos seus componentes.
Reveladores: utilizado para identificar as manchas correspondentes aos compostos. Os 
reveladores mais utilizados são: luz UV, vapor de iodo, anisaldeido, vanilina, permanganato 
de potássio, ninhidrina, ácido fosfomolíbdico
Componentes em uma 
Cromatografia
EDUCA MAIS BRASIL. BRONDANI, PB. 
Adsorvente é uma substância sólida insolúvel, capaz de efetuar em sua superfície a adesão 
de moléculas insolúveis dispersas em um meio líquido ou gasoso. Os mais comuns nas 
técnicas cromatográficas são: Sílica, Alumina, Celulose, Terra diatomácea Celulose e 
Poliamida
Solventes são substâncias capazes dissolver outras substâncias.
• Adsorventes mais utilizados em CC: Sílica e alumina
• Solventes mais utilizados em CC: pentano, éter de petróleo, diclorometano, acetato de 
etila.
• Adsorventes mais utilizados em CCD: sílica gel e alumina
• Os solventes em CCD normalmente são feitas combinações para atingir um resultado 
ideal. 
Solventes e Adsorventes
BRONDANI, PB
• A força de eluição é uma medida da energia de adsorção do solvente.
• É organizada de acordo com a polaridade e permite escolher o melhor solvente que será mais competitivo em 
relação a característica da fase estacionária. A mistura de 2 ou mais solventes irá permitir controlar a força 
resultante da fase móvel.
Força de Eluição
https://cromvallab.com/2021/03/26/vamos-falar-sobre-fase-movel-de-hplc-e-forca-cromatografica-no-
desenvolvimento-de-metodos/ CROMVAL Lab. 2021 
Desenvolvimento CCD
SILVA, VA. et al. 
Aplicação das amostras:
Para aplicar uma amostra à placa, colocar 1 gota da substância de 
teste sólida ou 1 gota de uma substância de teste líquida em um 
pequeno recipiente. Dissolver a amostra em algumas gotas de um 
solvente volátil. A mancha deve ficar suficientemente alta para 
que não se dissolva no solvente de desenvolvimento
Saturação da Cuba:
É a distribuição uniforme da fase vapor da fase móvel no interior 
da cuba, depois alcançado o equilíbrio. Para obter-se a 
saturação, devem-se colocar papéis de filtro, embebidos na fase 
móvel aderidos às paredes laterais internas das cubas .
https://www.wikiwand.com/pt/Cromatografia
Desenvolvimento de um cromatograma:
A placa é transferida para uma cuba cromatográfica contendo o 
solvente, que ascende pela placa. Durante este processo, os 
componentes da mistura são separados. 
Revelação:
Após a separação dos compostos usa-se reagentes para torna-los 
coloridos e facilitar a visualização. 
Desenvolvimento CCD
SILVA, VA. et al. 
https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/1842690/mod_resource/co
ntent/1/Aula%202%20-
%20T%C3%A9cnicas%20de%20cromatografia.pdf
http://www.sinteseorganica.com/2014/02/reveladores-de-tlc.html
É definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do 
componente e a distância percorrida pelo eluente. 
Pode ser utilizado para identificar um composto desconhecido, o valor de 
Rf é confirmado com maior precisão mediante alguns dados adicionais. 
Muitos compostos podem ter o mesmo valor de Rf, assim como muitos 
compostos tem o mesmo ponto de fusão.
Fator de Retenção
ENGEL, Randall, et al. 2016
• EDUCA MAIS BRASIL. Educa Mais Brasil - Bolsas de Estudo de até 70% para Faculdades – Graduação e Pós-graduação. Educa Mais Brasil. 
Disponível em: <https://www.educamaisbrasil.com.br/enem/quimica/cromatografia>. 
• BRONDANI, PB. Cromatografia em Coluna. Disponível em: <https://patyqmc.paginas.ufsc.br/files/2019/07/Cromatografia-em-Coluna.pdf.>.
• BRONDANI, PB. Cromatografia em Camada Delgada. Disponível em: <https://patyqmc.paginas.ufsc.br/files/2019/07/Cromatografia-de-Camada-
Delgada.pdf>. 
• ENGEL, Randall. G.; KRIZ, George. S.; LAMPMAN, Gary. M.; PAVIA, Donald. L. Química orgânica experimental: técnicas de escala pequena –
Tradução da 3ª edição norte-americana. CengageLearning Brasil, 2016. 9788522123469. Disponível em: 
https://integrada.minhabiblioteca.com.br/#/books/9788522123469/.
• Moodle USP: e-Disciplinas. edisciplinas.usp.br. Disponível em: 
<https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/1842690/mod_resource/content/1/Aula%202%20-%20T%C3%A9cnicas%20de%20cromatografia.pdf>.
• Agente adsorvente. Wikipedia.org. Disponível em: 
https://pt.wikipedia.org/wiki/Agente_adsorvente#:~:text=Um%20adsorvente%20%C3%A9%20uma%20superf%C3%ADcie,de%20natureza%20qu%C3
%ADmica%20ou%20f%C3%ADsica.
• Vamos falar sobre fase móvel de HPLC e força cromatográfica no desenvolvimento de métodos? CROMVAL Lab - Cursos de especialização e 
profissionalizante: porque seu aperfeicoamento é nossa missão. Disponível em: <https://cromvallab.com/2021/03/26/vamos-falar-sobre-fase-movel-de-
hplc-e-forca-cromatografica-no-desenvolvimento-de-metodos/>.
• AUGUSTO DA SILVA, Vinícius; SANTOS, Tassia; DOCENTES, Almeida; et al. CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA. [s.l.: s.n., s.d.]. 
Disponível em: <http://cempeqc.iq.unesp.br/Jose_Eduardo/Blog2013/Aula_28_06/10%20-
%20Cromatografia%20em%20Camada%20Delgada%20%E2%80%93%20BAC%202013%20-%20G10B_.pdf>.
Referências
OBRIGADA!!!!