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-DNA, em geral, não é envolto por membrana e possui um único cromossomo, arranjado de forma circular -O DNA não está associado com histonas (proteínas cromossômicas especiais) -Em geral, não possuem organelas revestidas por membrana, como núcleo, REL, RER, Mitocôndria, Cloroplastos,... -Suas paredes celulares quase sempre contêm polissacarídeos complexo peptideoglicano -Cocos que permanecem em pares após a divisão são chamados de diplococos -Cocos que permanecem ligados uns aos outros em forma de cadeia são chamados de estreptococos -Aqueles que se dividem em dois planos e permanecem em grupos de quatro são conhecidos como tétrades -Os que se dividem em três planos e permanecem ligados uns aos outros em grupos de oito, como um cubo, são nomeados de sarcinas -Os que se dividem e permanecem unidos formando um “cacho de uva” são chamados de estafilococos -Bastonete simples = bacilo único -Os bastonetes que formam pares após a divisão são os diplobacilos -Os estreptobacilos são os bastonetes que formam cadeias -Têm uma ou mais curvaturas -Os bastões curtos são chamados de vibriões -As que possuem um formato helicoidal são os espirilos -As que possuem um formato helicoidal, mas são flexíveis, são chamadas de espiroquetas, como a Treponema pallidum (sífilis) e Borrelia burgdorferi (doença de Lyme) Glicocálice -Polímero constituído por polissacarídeo, polipeptídeo ou ambos -Quando esse polímero é secretado, organiza-se e firma-se fortemente à parede celular, o glicocálice é descrito como cápsula, esta estrutura é capaz de atribuir uma virulência bacteriana, ou seja, uma resistência ao ambiente externo -Se o polímero não é organizado e não tão bem aderido à PC, o GLC é como uma camada limosa -As cápsulas frequentemente protegem as bactérias contra a fagocitose do hospedeiro (Bacillus anthracis produz uma cáps de Ácido D-glutâmico; Streptococcus pneumoniae produz uma cáps polissacarídica) -A SPE, subtância polimérica extracelular protege as células dentro do glicocálice, facilita a comunicação intercelular e facilita a fixação a várias superfícies em seu ambiente natural (Streptococcus mutans causa cáries dentárias, pois fixa-se à superfície dos dentes por meio do glicocálice) Flagelos -Propulsão bacteriana -Existe uma proteína flagelar, antígeno H, que permite diferenciar os sorovares (Diferente variedade de uma determinada espécie de bactéria, tendo por base a especificidade imunológica de determinados componentes da superfície da célula como os da parede celular ou do flagelo) de bactérias gram-negativas. Ex: existem no mínimo 50 antígenos H distintos para a Estreptococcus coli. Fímbrias e pili -Estruturas, que consistem em uma proteína, pilina -Essas estruturas são muito comuns nas bactérias gram-negativas -As fímbrias possuem uma tendência a fixação em diversas superfícies e umas às outras. Desse modo, participam da formação de biofilmes. -A bactéria Neisseria gonorrhoeae, agente causador da gonorreia, possui fímbrias que ajudam na fixação às membranas mucosas -Já os pili estão envolvidos na motilidade celular e na transferência de DNA durante a conjugação bacteriana (pilis sexuais) -Contribui para a capacidade de algumas bactérias causarem doenças e promovem resistência a alguns antibióticos -É composta por peptideoglicano (mureína): dissacarídeo repetitivo ligado por polipeptídeos , formando uma rede que circunda a célula -A penicilina interfere com a interligação final das fileiras de peptideoglicanos através das pontes cruzadas peptídicas. Dessa forma, a PC fica enfraquecida, rompe a MP e sofre lise -Nas bactérias gram-positivas, há muitas camadas de peptideoglicano, formando uma camada rígida e espessa. Além disso, o espaço entre a PC e MP de uma gram-positiva é o espaço periplasmático, que contem uma camada granular, a qual é composta de ácido lipoteicoico. Outrossim, a PC da gram-positiva contém ácidos teicoicos, que consistem em glicerol ou rubitol associado com fosfato. Este grupo, por sua vez, pode regular o movimento de cátions, impedindo a ruptura extensa da parede pela osmose. -Nas bactérias gram-negativas, há pouquíssimas camadas de peptideoglicano e uma membrana externa. O peptideoglicano está ligado a lipoproteínas na membrana externa e está localizado no periplasma, que contém uma alta concentração de enzimas de degradação e proteínas de transporte. Por serem mais “finas”, são mais suscetíveis ao rompimento mecânico. A membrana externa possui diversas especializações: barreira contra ação de detergentes, metais pesados, sais biliares, alguns corantes, antibióticos (penicilina) e enzimas digestórias como a lisozima. -Quando bactérias gram-negativas morrem, elas liberam lipídeo A(glicofosfolipídeo) que, clinicamente, promovem febre, vasodilatação, choque e formação de coágulos sanguíneos. Para diferenciar as espécies de gram-negativas, analisa- se o polissacarídeo O, que funciona como um antígeno -Baseado nas diferenças das estruturas das PCs em como cada uma delas reage a vários reagentes -Cristal violeta-de-metila, corante primário, cora as células gram-positivas e negativas de púrpura, porque penetra no citoplasma de ambos os tipos celulares -Quando o iodo, mordente (soluto de Lugol) é aplicado, forma cristais com o corante(complexo iodo- pararosanilina),que são capazes de fizar o corante primário nas estruturas coradas que são muito grandes para sair pela PC -A aplicação de álcool desidrata o peptideoglicano das gram-positivas para torná-las permeáveis ao cristal violeta-iodo -Já nas gram-negativas o álcool dissolve a membrana externa, deixando pequenos buracos na camada de peptideoglicano, pelos quais o cristal violeta-iodo se difunde. Ao adicionar safranina (contracorante), as céls ficam cor-de- rosa ou avermelhadas -Mesmo que ambos tipos de bactéria absorvam a safranina ou fucsina, a coloração cor-de-rosa ou vermelha é disfarçada pelo corante roxo-escuro, que foi absorvido pelas gram-positivas -Resumindo: gram-positiva fica roxo escuro; gram-negativa fica cor-de-rosa ou avermelhada Gram- positivas Gram- negativas Sens. à penicilina e sulfonamidas Alta Baixa Sens. à estreptomicina , cloranfenicol, tetraciclina Baixa Alta Sens. a detergentes aniônicos Alta Baixa Resistencia à azida sódica Alta Baixa Resistência ao ressecamento Alta Baixa Membrana plasmática -Consiste basicamente em fosfolipídeos e proteínas além de estar no formato de bicamada. Por não possuírem esteróis, as membranas dos procariotos são menos rígidas que as dos eucariotos -As glicoproteínas e os glicolipídeos ajudam a proteger e lubrificar a célula, além de estarem envolvidos em processos infecciosos. P ex: O vírus influenza e as toxinas que causam o cólera e o botulismo penetram em suas células-alvo, inicialmente, através da ligação às glicoproteínas contidas em suas membranas plasmáticas -O modelo do mosaico fluido é um arranjo dinâmico das proteínas e fosfolipídeos, ou seja, movem-se com certa liberdade na superfície da membrana -Em algumas bactérias, existem invaginações na MP que são chamadas de cromatóforos -A MP é alvo de muitos antimicrobianos, já que estes fármacos expõe a membrana à lesão e danificam especificamente a MP, como os bactericidas e detergentes -Geralmente, as proteínas transportadoras de procariotos são inespecíficas -Na translocação de grupo, uma forma especial de transporte ativo que ocorre exclusivamente em procariotos, a substância é quimicamente alterada durante o transporte através da membrana. Uma vez que a substância seja alterada e esteja dentro da célula,a membrana plasmática se torna impermeável a ela, então a substância permanece dentro da célula. Esse mecanismo importante permite à célula acumular várias substâncias, mesmo que estejam em baixas concentrações fora dela. A translocação de grupo requer energia, suprida por compostos de fosfato de alta energia, como o ácido fosfoenolpirúvico (PEP). Um ex de translocação de grupo é o transporte da glicose, esta tem adicionado um grupo fosfato e torna-se não possível a saída da forma fosforilada de glicose Citoplasma (citosol) -80% água + 20% enzimas, carboidratos, lipídeos, íons,... -As principais estruturas contidas no citoplasma são os ribossomos, as inclusões (depósitos de reserva) e o nucleoide (contendo o DNA) -O citoesqueleto procariótico atua na divisão celular, mantendo a forma da célula Nucleoide -Geralmente contém uma única molécula longa e contínua de DNA de dupla-fita, em forma circular. Esta molécula não incluem histonas -Além do cromossomo bacteriano, os plasmídeos –pequenas moléculas de DNA de fita dupla- são estruturas que estão associadas às proteínas da MP, embora não sejam cruciais para a sobrevivência da bactéria em condições normais. No entanto, os plasmídeos podem ser uma vantagem para as células, pois podem transportar genes para atividades como resistência aos antibióticos, tolerância a metais tóxicos,... Ribossomos -São compostos de 2 subunidades, cada uma consistindo em proteína e de um tipo de RNAr -Os ribossomos procarióticos são denominados 70S (subunidade menor 30S + subunidade maior 50S ... OBS: não existe relação matemática). A letra S refere às unidades Svedberg, indicando a velocidade relativa de sedimentação durante a centrifugação -Antibióticos, como a estreptomicina e a gentamicina, fixam-se à subunidade 30S e paralisam a síntese proteica. A eritromicina e cloranfenicol se fixam na subunidade 50S. Estes fármacos são chamados de bacteriostátcos Inclusões -Depósitos de reserva de nutrientes e macromoléculas -Grânulos metacromáticos ou volutinas: reserva de fosfato inorgânico. São característicos do agente causador da difteria, possuindo importância diagnóstica -Grânulos polissacarídicos: reserva de glicogênio e amido -Inclusões lipídicas (autoexplicativo) -Grânulos de enxofre: reserva energética -Carboxissomos: reserva de ribulose 1,5-difosfato-carboxilase (RuBisCo) -Vacúolos de gás: permitem a flutuação de procariotos aquáticos -Magnetossomos: reserva de óxido de ferro Endósporos -São células desidratas altamente duráveis, com paredes espessas e camadas adicionais. São bactérias gram-positivas -Elas podem sobreviver a temp extremas, falta de água e exposição a muitas substâncias tóxicas -A esporulação ou esporogênese é o processo de transformação em endósporos -O endósporo contém uma grande quantidade de ADP (ácido dipicolínico) + íons cálcio. Esta combinação protege o DNA contra danos externos CAPÍTULO 4 Anatomia funcional de células procarióticas e eucarióticas 105 5. O aparelho de Golgi consiste em sacos achatados, chamados de cis- ternas. Atua na formação da membrana e na secreção de proteínas. 6. Os lisossomos são formados a partir dos aparelhos de Golgi. Eles armazenam enzimas digestórias. 7. Os vacúolos são cavidades revestidas por membrana, derivadas do aparelho de Golgi ou da endocitose. Em geral, são encontrados nas células vegetais que armazenam diversas substâncias e fornecem rigidez para folhas e caules. 8. As mitocôndrias são os sítios primários de produção de ATP. Con- têm ribossomos 70S e DNA, e se multiplicam por fissão binária. 9. Os cloroplastos contêm clorofila e enzimas para a fotossíntese. Assim como as mitocôndrias, eles contêm ribossomos 70S e DNA, e se multiplicam por fissão binária. 10. Uma variedade de componentes orgânicos é oxidada nos peroxis- somos. A catalase nos peroxissomos destrói o H2O2. 11. O centrossomo é constituído pelo material pericentriolar e os centríolos. Os centríolos consistem em nove microtúbulos triplos envolvidos na formação do fuso mitótico e dos microtúbulos. A evolução dos eucariotos (pp. 102-103) 1. De acordo com a teoria endossimbiótica, as células eucarióticas evoluíram de procariotos simbióticos vivendo no interior de ou- tras células procarióticas. Questões para estudo Consulte as respostas das questões de Conhecimento e compreensão no guia de Respostas, na parte final do livro-texto. Conhecimento e compreensão Revisão 1. DESENHE Faça um diagrama de cada um dos seguintes arranjos flagelares: a. lofotríquio. d. anfitríquio. b. monotríquio. e. polar. c. peritríquio. 2. A formação de endósporo é chamada de (a) __________. Ela é ini- ciada por (b) __________. A formação de uma nova célula a partir de um endósporo é denominada (c) __________. Esse processo é desencadeado por (d) __________. 3. DESENHE Desenhe as formas bacterianas listadas em (a), (b) e (c). Após, desenhe as formas em (d), (e) e (f), mostrando como elas são condições especiais de a, b e c, respectivamente. a. espiral. d. espiroquetas. b. bacilo. e. estreptobacilos. c. coco. f. estafilococos. 4. Combine as estruturas na coluna A com suas funções na coluna B. Coluna A Coluna B ________ a. Parede celular 1. Adesão à superfície ________ b. Endósporo 2. Formação da parede celular ________ c. Fímbrias 3. Motilidade ________ d. Flagelos 4. Proteção da lise osmótica ________ e. Glicocálice 5. Proteção dos fagócitos ________ f. Pili 6. Repouso ________ g. Membrana plasmática 7. Síntese de proteínas ________ h. Ribossomos 8. Permeabilidade seletiva 9. Transferência de material genético 5. Por que um endósporo é denominado uma estrutura dormente? Qual a vantagem do endósporo para uma célula bacteriana? 6. Compare e contraste os seguintes: a. difusão simples e difusão facilitada. b. transporte ativo e difusão facilitada. c. transporte ativo e translocação de grupo. 7. Responda às seguintes questões utilizando os diagramas fornecidos, que representam secções cruzadas das paredes celulares bacterianas. a. Qual diagrama representa uma bactéria gram-positiva? Como você chegou a essa conclusão? Lipopolissacarídeo Fosfolipídeo Lipoproteína Peptideoglicano Membrana plasmática Ácido teicoico Peptideoglicano Membrana plasmática (a) (b) b. Explique como a coloração de Gram funciona para diferenciar entre estes dois tipos de paredes celulares. c. Por que a penicilina não tem efeito sobre a maioria das células gram-negativas? d. Como as moléculas essenciais penetram na célula através de cada parede? e. Qual parede celular é tóxica aos seres humanos? 8. O amido é rapidamente metabolizado por muitas células, porém uma molécula de amido é muito grande para atravessar a mem- brana plasmática. Como a célula obtém as moléculas de glicose a partir do polímero de amido? Como as células transportam essas moléculas de glicose através da membrana plasmática? 9. Combine as características das células eucarióticas na coluna A com suas funções na coluna B. Coluna A Coluna B ________ a. Material pericentriolar 1. Armazenamento de enzimas digestórias ________ b. Cloroplasto 2. Oxidação de ácidos graxos ________ c. Aparelho de Golgi 3. Formação de microtúbulos ________ d. Lisossomos 4. Fotossíntese ________ e. Mitocôndria 5. Síntese de proteínas ________ f. Peroxissomos 6. Respiração ________ g. RE rugoso 7. Secreção 106 PARTE I Fundamentos de microbiologia 10. NOMEIE Qual grupo de microrganismos é caracterizado por células que formam filamentos, se reproduz por esporos, e possui peptideoglicano em sua parede celular? Múltipla escolha 1. Qual das seguintes não é uma característica diferencial das células procarióticas? a. Elas normalmente possuem um único cromossomo circular. b. Elas não possuem organelasrevestidas por membrana. c. Elas possuem paredes celulares que contêm peptideoglicano. d. Seu DNA não está associado a histonas. e. Elas não possuem uma membrana plasmática. Utilize as seguintes opções para responder as questões 2 a 4: a. Não ocorrerá nenhuma alteração; a solução é isotônica. b. A água entrará dentro da célula. c. A água sairá da célula. d. A célula sofrerá lise osmótica. e. A sacarose entrará na célula, de uma área de alta concentração para uma de baixa concentração. 2. Que frase descreve melhor o que ocorre quando uma bactéria gram-positiva é colocada em água destilada e penicilina? 3. Que frase descreve melhor o que ocorre quando uma bactéria gram-negativa é colocada em água destilada e penicilina? 4. Que frase descreve melhor o que ocorre quando uma bactéria gram-positiva é colocada em uma solução aquosa de lisozima e sacarose a 10%? 5. Qual das seguintes frases descreve melhor o que ocorre a uma cé- lula exposta a polimixinas, que destroem os fosfolipídeos? a. Em uma solução isotônica, nada acontecerá. b. Em uma solução hipotônica, a célula sofrerá lise. c. A água entrará na célula. d. Os conteúdos intracelulares vazarão da célula. e. Qualquer uma das alternativas acima poderia ocorrer. 6. Qual das seguintes alternativas é falsa com relação às fímbrias? a. São compostas de proteínas. b. Podem ser utilizadas para adesão. c. São encontradas em células gram-negativas. d. São compostas de pilina. e. Podem ser utilizadas para motilidade. 7. Em qual das opções a seguir o par está incorreto? a. glicocálice – aderência. b. pili – reprodução. c. parede celular – toxina. d. parede celular – proteção. e. membrana plasmática – transporte. 8. Em qual das opções a seguir o par está incorreto? a. grânulos metacromáticos – armazenamento de fosfatos. b. grânulos polissacarídicos – armazenamento de amido. c. inclusões lipídicas – ácido poli-b-hidroxibutírico. d. grânulos de enxofre – reserva energética. e. ribossomos – armazenamento proteico. 9. Você isolou uma célula móvel, gram-positiva, sem núcleo visível. Você pode presumir que esta célula tem: a. ribossomos. b. mitocôndria. c. um retículo endoplasmático. d. um aparelho de Golgi. e. todas as alternativas acima. 10. O antibiótico anfotericina B rompe as membranas plasmáticas ao se combinar com esteróis; isto afetará todas as seguintes células, exceto: a. células animais. b. células bacterianas gram-negativas. c. células fúngicas. d. células de Mycoplasma. e. células vegetais. Análise 1. Como as células procarióticas podem ser menores que as células eucarióticas e ainda assim realizar todas as funções vitais? 2. A menor célula eucariótica é a alga móvel Micromonas. Qual é o número mínimo de organelas que essa alga deve ter? 3. Dois tipos de células procarióticas foram diferenciados: bactérias e arqueias. Em que essas células se diferem? Em que elas são similares? 4. Em 1985, uma célula de 0,5 mm foi descoberta em um peixe- -cirurgião, sendo denominada Epulopiscium fishelsoni (ver Figura 11.20, p. 308). Presumiu-se que seria um protozoário. Em 1993, pesquisadores determinaram que Epulopiscium é, na verdade, uma bactéria gram-positiva. Por que esse organismo foi inicialmente identificado como um protozoário? Quais evidências poderiam alterar a classificação para bactéria? 5. Quando células de E. coli são expostas a uma solução hipertônica, as bactérias produzem uma proteína transportadora que pode mover íons potássio (K 1 ) para dentro da célula. Qual o valor do transporte ativo de K 1 , que requer ATP? Aplicações clínicas e avaliação 1. O Clostridium botulinum é um anaeróbio estrito; ou seja, ele é destruído pelo oxigênio molecular (O2) presente no ar. Os seres humanos podem morrer de botulismo ao ingerir alimentos em que o C. botulinum está crescendo. Como essa bactéria sobrevive nas plantas colhidas para consumo humano? Por que os alimentos em conserva caseiros são a fonte mais frequente de botulismo? 2. Uma criança do sul de São Francisco gostava da hora do banho em sua casa, devido à coloração cor de laranja e vermelha da água. A água não apresentava essa cor de ferrugem em sua fonte, e o de- partamento de água não podia cultivar a bactéria Acidithiobacillus responsável pela cor ferruginosa da fonte. Como as bactérias en- traram no encanamento de água corrente da casa? Que estruturas bacterianas tornam isso possível? 3. Culturas vivas de Bacillus thuringiensis (Dipel) e B. subtilis (Kodiac) são vendidas como pesticidas. Que estruturas bacterianas tornam possível embalar e vender essas bactérias? Para que fim cada produto é usado? (Dica: ver Capítulo 11.)
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