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Universidade Nove de Julho Maria Lívia Bactérias Introdução: Onde estão os microrganismos? ✓ Microrganismos ajudam manter o equilíbrio, tanto na natureza como no organismo dos seres vivos; ✓ Residem em nosso organismo, fornecendo uma barreira natural protetora —> microbiota. Microrganismos da microbiota residente humana: ✓ Frequentemente são benéficos e necessários à manutenção da saúde; ✓ Oferecem barreiras contra colonização; ✓ Produzem substâncias utilizáveis pelo hospedeiro. Colonização (microbiota) X microrganismos patogênicos: ✓ Fatores de virulência favorecem os microrganismos patogênicos; ✓ Ao atravessar a barreira natural -> infecção / doença; ✓ O desenvolvimento de uma doença infecciosa envolve interações: • Essa tríade contém fatores essenciais para favorecer a transmissão e viabilidade do agente infeccioso. Claificação d Microrganism: ✓ 1969 - Whittaker: • Seres vivos podem ser classificados em 5 reinos. Bactérias: ✓ Taxonomia: • Reino Monera; • “Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology”. Classificação das bactérias: ✓ Binominal - gênero e espécie: • Escherichia coli; • Klebsiella pneumoniae; • Streptococcus pneumoniae; • Staphylococcus aureus; • Mycobacterium tuberculosis. Estrutura das bactérias: ✓ As bactérias são células procarióticas - desprovida de carioteca; ✓ Algumas estruturas têm importante papel na patogênese das doenças infecciosas, conhecidas como fatores de virulência e também podem ser alvo das drogas antimicrobianas. ✓ Principais Estruturas das Bactérias: • Membrana citoplasmática; • Parede celular e cápsula; • Organelas de locomoção; • Genoma e citoplasma; • Componentes citoplasmáticos. Universidade Nove de Julho Maria Lívia Região Nuclear “Nucleóide”: ✓ Ausência de núcleo estruturado e de carioteca; Genoma bacteriano: ✓ Cromossomo; ✓ Plasmídios; ✓ Elementos genéticos móveis. Cromossomo: ✓ Molécula longa de DNA de fita dupla; ✓ Circular, extremamente condensado. Plasmídios: ✓ Pequenas moléculas circulares de DNA de fita dupla; • 10% do DNA celular. ✓ Existem plasmídios que possuem genes de resistência a drogas (plasmídio R) e outros que conferem virulência. Trasnposons: ✓ Pequenos segmentos de DNA; ✓ Seus genes codificam para proteínas estruturais - toxinas e enzimas; ✓ Móveis - podem trocar de posição ou se transferir: • Do cromossomo para um plasmídio; • De um plasmídio para outro; • De um plasmídio para o cromossomo. Ribossomos: ✓ Milhares por célula; ✓ Função - síntese de proteínas; ✓ Proteínas e toxinas de virulência; ✓ Proteína determinante de resistência ao antimicrobiano. Membrana Citoplasmática: ✓ Dupla camada de fosfolipídeos - 40%; ✓ Proteínas - 60% • Periféricas; • Integrais, podendo formar canais - porinas. ✓ Funções: • Trocas nutritivas; • Produção de energia; • Síntese da parede celular. O genoma é responsável pelas diferenças na virulência e patogênese, além da resistência bacteriana. Muitas vezes esses genes “pulam” do cromossomo para o plasmídio, facilitando sua transferência para outra bactéria. Universidade Nove de Julho Maria Lívia Parede Celular: ✓ Em relação a parede celular, existem 4 grupos de bactérias diferentes no que se refere ao seu comportamento frente às colorações utilizadas em Bacteriologia (Gram e Ziehl- Neelsen).. CLASSIFICAÇÃO: ✓ Bactérias Gram-positivas; ✓ Bactérias Gram-negativas; ✓ Bactérias Álcool - Ácido Resistentes; ✓ Bactérias Sem Parede. Estrutura das diferentes paredes de bactérias: ✓ Composta por peptidioglicano - diferentes camadas; • Bactérias gram-positivas -> camada espessa; • Bactérias gram-negativas -> camada menor. ✓ Funções de proteção, manutenção da forma e fixação de flagelos. Bactérias gram-positivas: ✓ Adesão ao epitélio hospedeiro; ✓ Densa camada de peptideoglicano; ✓ Antígeno de superfície distinção sorotipos bacterianos. Bactérias gram-negativas: ✓ Membrana Externa: • Barreira hidrofóbica adicional; • Porinas - proteínas triméricas que formam poros; • Permeabilidade seletiva mais restrita que a membrana plasmática - regulada pelo tamanho da substância. • Proteínas - OMP: transporte de solutos e receptores de fímbria sexual; • Lipopolissacarídeos. Barreira adicional a entrada de substâncias; - antibióticos -> penicilinas; - lisozima; - metais pesados; - detergentes; - sais de bile; - enzimas digestivas. Universidade Nove de Julho Maria Lívia ✓ Fina camada de peptideoglicano; ✓ Espaço Periplasmático: • Enzimas hidrolíticas - quebra moléculas (proteases, nucleases, lipases); • Enzimas inativadoras de drogas - beta-lacmatase: resistência à penicilina. ✓ Lipopolissacarídeos - LPS: • Estimula respostas inflamatórias e imune; • Lipídeo A: - Igual em todas as bactérias gram-negativas; - Muito tóxico = endotoxina bacteriana. • Polissacarídeo - Antígeno O: - Confere características antigênicas. Bactérias álcool-ácido resistentes - baar: ✓ Camada grossa de peptidioglicano e de ácidos micólicos ✓ Micobactérias; ✓ Camada de glicolipídeos. Bactérias sem parede celular: ✓ Parede muito fina - não são coradas pelo GRAM; ✓ Principais gêneros - Mycoplasma e Ureaplasma; ✓ Bactérias pequenas e pleomórficas: • Membrana plasmática possui esteróis. Coloração das Bactérias: Coloração de gram: ✓ Finalidade - evidenciar os microrganismos quando observados através do microscópio óptico; ✓ Várias etapas; ✓ Resultados em poucos minutos. Caracteríicas Gram Pitivas Gram Negativas Peptidoglicano Espesso Fino Ácidos Teicóicos Presente Ausente Espaço Periplasmático Ausente Presente Membrana Externa Ausente Presente LPS Ausente Presente Importância de claificar a Bactéria: - Tratamento Empírico -> ação específica das drogas de acordo com a estrutura; - Evolução da Doença -> prognóstico. - Ex: antígeno O ou somático - importante para definir sorotipos patogênicos de E. coli. Universidade Nove de Julho Maria Lívia Coloração de Ziehl-neelsen: ✓ Utilizada na coloração de BAAR e outras bactérias. Morfologia Bacteriana: Cocos: ✓ Micrococcus - M. luteus, M. glutamicum; ✓ Neisseria - N. meningitidis, N. gonorrhoeae; ✓ Streptococcus - S. pyogenes, S. equi, S. agalactiae; ✓ Staphylococcus - S. aureus, S. epidermidis, S. hyicus; ✓ Enterococcus, Lactococcus, Sarcina, Gaffkia. Bacilos ou bastonetes: ✓ Enterobacteriaceae - E. coli, Salmonella, Enterobacter; ✓ Bacillus - B. anthracis, B. cereus, B. polymyxa; ✓ Clostridium - C. botulinum, C. tetani, C. chauvoei; ✓ Corynebacterium - C. renale, C. pyogenes; ✓ Lactobacillus. Vibrios: ✓ Campylobater - C. fetus, C. coli, C. jejuni; Espirilos ou espiroquetas: ✓ Spirillum sp, Treponema pallidum, T. bryanti, Borrelia recurrentis (Doença de Lyme), Leptospira. Fator de Virulência: Cápsula: ✓ Composição - polissacarídica / polipeptídica; ✓ Firmemente aderida à parede; ✓ Funções: • Proteção contra a fagocitose; • Fixação da bactéria no ambiente; • Permite ligação entre bactérias - biofilme. Biofilme: ✓ União das cápsulas entre bactérias; Universidade Nove de Julho Maria Lívia ✓ Circulação de água oxigênio e nutrientes; ✓ Formação: ✓ Redução da Atividade de Antibióticos: • O ambiente do biofilme (pH) prejudica a atividade antimicrobiana; • Filtragem - penetração letificada e/ou reduzida na matriz polissacáride. Flagelos, fímbrias: ✓ Flagelos - permite a motilidade bacteriana, favorecendo sua invasão em tecidos; ✓ Filamentos Axiais - endoflagelos que permitem movimento de saca-rolhas; • Característico das espiroquetas; • Ex: leptospirose - Leptospira interrogans e sífilis- Treponema pallidum.. ✓ Fímbrias ou Pêlos - existem 2 tipos: • 1 - Adesão: fator de colonização, finos e curtos; • 2 - Conjugação: fímbria sexual, finos e longos; - Transferência de material genético. Esporos: ✓ Produzidos por alguns bacilos Gram + : • Clostridium spp; • Bacillus spp. ✓ Função - resistência a condições adversas por longos períodos de tempo; ✓ Aumentam sua sobrevivência - suportam: • Temperaturas extremas; • Falta de água; • Substâncias tóxicas. Biofilme em Feridas: O processo de cicatrização de feridas é retardado devido a presença de biofilme e tecido desvitalizado; Somente após a remoção do biofilme a ferida poderá cicatrizar. Esporulação: Não ocorre aumento do nº de células —> não é um processo de reprodução!! Universidade Nove de Julho Maria Lívia Toxinas: ✓ Endotoxinas: • O LPS é a endotoxina da membrana externa de gram negativa; • Induz a liberação de substâncias vasoativas, ativa o sistema complemento pela via alternativa, através da ação sobre o componente, e ativa a cascata de coagulação, provocando obstrução intravascular; • Instabilidade cardiovascular e hemodinâmica, levando a uma septicemia. ✓ Exotoxinas: • Grupo I - correspondem aos superantígenos e às toxinas da família das bactérias termoestáveis. - Os superantígenos não sofrem a ação dos macrófagos, mas possuem a capacidade de se ligar às moléculas de MHC de macrófagos e linfócitos; - Promove síntese de interleucinas, interferons e outras citocinas Staphylococcus aureus. • Grupo II - lesam a membrana citoplasmática, através da formação de poros, que leva a morte da célula.. - Como os glóbulos vermelhos ou fagócitos. • Grupo III - presença das subunidades A (porção enzimática ativa) e B (responsável pela ligação da toxina ao receptor celular) em sua molécula. Enzimas: ✓ Degradam componentes da MEC desorganizando toda a estrutura dos tecidos; ✓ Colagenase: • Células do hospedeiro tornam-se fracamente aderidas —> disseminação da bactéria; • Ex - Streptococcus spp; Clostridium perfringens. ✓ Hialuronidase: • Rompe camada epitelial e junto a colagenase causa dano tecidual —> maior disseminação da bactéria; • Ex - Streptococcus spp; Staphylococcus spp. ✓ Mucinases - degradação do muco; ✓ Estreptoquinase - fibrinólise. Reprodução Bacteriana: ✓ Divisão de uma bactéria por Fissão Binária, Bipartição, Cissiparidade —> assexuado; Tempo de geração: ✓ Tempo necessário para uma célula se dividir; ✓ Característico de cada bactéria. Fases de crescimento: ✓ Divisão binária transversal ou simples, onde o aumento da população ocorre em progressão geométrica, sendo o n o número de gerações. Cltridium tetani - Tétano: Ação inibitória da contração muscular; Toxina -> terminações de células inibitórias -> bloqueio da liberação da glicina e GABA -> neurônios motores não são inibidos -> hiperreflexia, espasmos musculares e paralisia espástica. Universidade Nove de Julho Maria Lívia ✓ Através da reprodução e de contagens praticadas em intervalos adequados é possível traçar uma curva de crescimento bacteriano. ✓ A - Fase estacionária; ✓ B - Fase log ou exponencial; ✓ C - Fase estacionária ou platô; ✓ D - Fase de declínio ou morte. Fatores que afetam o crescimento bacteriano: ✓ Nutrientes - fontes de carbono e nitrogênio; • Existem bactérias pouco exigentes e muito exigentes. ✓ Oxigênio - existem bactérias aeróbicas e anaeróbicas no que se refere à necessidade de O2 para obtenção de energia; ✓ Umidade; ✓ pH; ✓ Temperatura - psicrófilas, mesófilas e termófilas. Mecanism de Defa - Bactérias: Imunidade a bactérias extracelulares: ✓ Barreiras naturais contra as infecções; ✓ Imunidade Inata: • Moléculas extracelulares - sistema complemento; • Células NK, neutrófilos e macrófagos; • Quimiocinas, citocinas. • Principais mecanismos da imunidade inata: - Ativação do complemento; - Fagocitose; - Resposta inflamatória. ✓ Imunidade Adaptativa: • Anticorpos; • Citocinas produzidas por células T. • Principais mecanismos da imunidade adaptativa: - Oponização; - Ativação do sistema complemento; - Promoção da neutralização de bactérias ou de seus produtos. Imunidade a bactérias intracelulares:
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