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IV-217 Microbiologia Geral Aspectos macroscópicos e coloração para estudo microscópio de bactérias Tópicos: - Estrutura e morfologia bacteriana; - Aspectos coloniais do crescimento bacteriano; - Técnicas convencionais de coloração bacteriana; Estrutura Bacteriana Parede Celular Bacteriana Gram positiva Gram negativa Aspectos coloniais Klebsiella pneumoniae em ágar Mac Conkey- presença de cápsula (colônia mucóide) Proteus mirabilis em ágar sangue – motilidade (“swarm”) Streptococcus agalactiae em ágar sangue – colônias puntiformes Staphylococcus aureus em ágar sangue – colônias amarelas Técnicas convencionais de coloração bacteriana Confecção do esfregaço: - A partir da colônia ou suspensão líquida; - Direto da amostra; Coloração: - Coloração de Gram; - Coloração simples com fucsina; - Técnica com nigrosina; Esfregaço • A partir de suspensão líquida • Direto da amostra Esfregaço A partir de uma colônia Diferencia Gram positiva de Gram negativa. Evidencia a morfologia bacteriana. Técnica de Coloração de Gram Gram (+) ROXO Gram (-) VERMELHO Coloração de Gram Morfologias Características Morfologias Cocos Bastões Bacilos Vibriões Helicoidal Forma Gram > + + / - - - Esporos Não Sim* Não Não Flagelos Não Sim/Não Sim Sim** * Clostridium spp e Bacillus spp ,** filamento axial (espiroqueta), flagelo (espirilo) Características gerais Cocos estreptococos diplococos tétrade Cocos estafilococossarcina diplobacilo estreptobacilo cocobacilo vibrio bacilo ≠ Bacillus estafilococos ≠ Staphylococcus estreptcocos ≠ Streptococcus forma gênero Bacilo Forma helicodal - Uma ou mais curvatura Espiroquetas Borrelia, Leptospira Espirilos Spirillum Espiraladas Bacilo Coloração de Gram: cocos G+ e G- Coloração de Gram: bacilo G+ e G- Coloração de Gram direto da amostra Bacilos e cocos Gram positivos em cadeia de amostra de iogurte Cocos Gram positivos em cadeia de amostra proveniente de “swab” oral Técnicas convencionais de coloração bacteriana Coloração Simples com Fucsina Não diferencia Gram positiva de Gram negativa. Evidencia a morfologia. Técnica com nigrosina Não diferencia Gram positiva de Gram negativa. Evidencia a morfologia. BastonetesCocos A nigrosina é adicionada ao esfregaço; O esfregaço não pode ser fixado no fogo, é seco ao ar. Na tinta contem fenol para matar os microrganismos, evitando contaminação. Coloração de esporos Corantes: verde malaquita e safranina. Toda bactéria pode ser corada pela técnica de Gram? Ziehl Neelsen Microscopia de Campo Escuro espiroquetas
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