Simulado plataforma moleculares

Prévia do material em texto

Lupa
	 
	Calc.
	
	
	 
	 
		VERIFICAR E ENCAMINHAR
		Aluno: ADRIANA CHRISTMAS ANDRADE MOREIRA
	Matr.: 202004150413
	Disciplina: SDE4579 - PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 
	Período: 2021.2 - F (G) / SM
	
	
	
		Quest.: 1
	
		1.
		A carioteca é a membrana celular presente, nos eucariotos, capaz de separar o núcleo do citoplasma, os procariotos não possuem carioteca. Marque a alternativa correta.
	
	
	
	
	A carioteca é responsável por separar o material genético dos organismos eucariontes, do restante do citoplasma. Desta forma todo o processo de transcrição e tradução é feito no núcleo e depois as proteínas são exportadas para o citoplasma.
	
	
	O núcleo celular em bactérias é importante para proteger dos bacteriófagos.
	
	
	O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos.
	
	
	A ausência da carioteca torna os procariotos mais complexos, uma vez que não precisam gastar energia sintetizando uma membrana a extra.
	
	
	O núcleo celular serve para que o RNAm sintetizado no citoplasma pelos ribossomos não seja degradado.
	
	
	
		Quest.: 2
	
		2.
		Sobre transcrição e tradução em eucariotos é correto afirmar que:
	
	
	
	
	A transcrição e a tradução ocorrem no núcleo.
	
	
	O ribossomo é capas de transcrever a partir com auxílio do RNAt que leva o RNAm até ele.
	
	
	A transcrição do DNA em RNA é feita no citoplasma pela maquinaria de transcrição, um complexo proteico formado pela RNA polimerase e fatores de transcrição.
	
	
	A tradução no núcleo e é realizada pela organela ribossomo, com o auxílio do RNAt
	
	
	O RNAm maduro, formado por éxons, com o cap5¿ e a cauda poliA é endereçado para fora do núcleo para poder ser traduzido.
	
	
	
		Quest.: 3
	
		3.
		Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que:
 
	
	
	
	
	Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo.
	
	
	As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide.
	
	
	Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento.
	
	
	O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular.
	
	
	Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula.
	
	
	
		Quest.: 4
	
		4.
		Para selecionar uma amostra aleatória de tamanho n de uma população formada por N unidades, que são numeradas de 1 a N segundo uma certa ordem, escolhe-se aleatoriamente uma unidade entre as k primeiras unidades da população, onde k = N / n e seleciona-se cada k-ésima unidade da população em sequência. Esta técnica de amostragem denomina-se amostragem:
	
	
	
	
	Sistemática
	
	
	Por etapas
	
	
	Aleatória simples
	
	
	Não-probabilística
	
	
	Probabilística
	
	
	
		Quest.: 5
	
		5.
		Com relação à coleta, transporte, armazenamento e processamento de amostras de sangue para posterior extração de DNA, avalie as sentenças e assinale a alternativa INCORRETA:
	
	
	
	
	O rompimento das hemácias pode liberar o grupamento heme, este é um contaminante prejudicial. Portanto devemos separar o plasma.
	
	
	A amostra de sangue fresca deve ser imediatamente resfriada e mantida a 2-8°C até a extração do DNA.
	
	
	Tubos de vidro devem ser evitados.
	
	
	A amostra de sangue não precisa ser resfriada e pode ser transportada em temperatura ambiente por até 2 dias.
	
	
	O agente anticoagulantes preferencialmente utilizado é o EDTA ao invés da heparina.
	
	
	
		Quest.: 6
	
		6.
		O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é:
	
	
	
	
	Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA.
	
	
	Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA.
	
	
	Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível.
	
	
	Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA.
	
	
	Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução.
	
	
	
		Quest.: 7
	
		7.
		Em algumas situações, a obtenção de DNA a partir de RNA transcrito é importante, como, por exemplo, na construção de bibliotecas.
Considerando os conceitos relacionados a essa estratégia e a figura acima, que mostra uma das possíveis estratégias para síntese de DNA a partir de RNA, assinale a opção correta.
 
	
	
	
	
	A reação mostrada na etapa demonstra a desnaturação da fita de mRNA.
	
	
	A reação mostrada na etapa 4 ilustra a atividade da enzima DNA polimerase.
	
	
	Na etapa 4, para que ocorra a reação, é suficiente a adição dos nucleosídios representados por A, U, C, G.
	
	
	O DNA obtido pelo método ilustrado é denominado tDNA.
	
	
	A reação mostrada na etapa 3 ilustra a atividade da enzima transcriptase reversa.
	
	
	
		Quest.: 8
	
		8.
		No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas.
A partir das informações apresentadas, conclui-se que:
	
	
	
	
	O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência-alvo um bom marcador tumoral.
	
	
	A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico.
	
	
	O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência.
	
	
	o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra.
	
	
	A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B.
	
	
	
		Quest.: 9
	
		9.
		O sequenciamento de DNA revolucionou nosso conhecimento sobre o material genético e revelou que a maior parte dele não codifica nenhuma proteína. Com relação ao sequenciamento de DNA, assinale a alternativa correta.
	
	
	
	
	Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores.
	
	
	Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos nas respectivas extremidades.
	
	
	Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3´-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase.
	
	
	Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5¿ de uma das cadeiase, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar por completo.
	
	
	O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela não utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs, e ficou conhecido como sequenciamento da segunda geração.
	
	
	
		Quest.: 10
	
		10.
		As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta.
	
	
	
	
	​​​Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento).
	
	
	​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.
	
	
	​​​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.
	
	
	Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger.
	
	
	​​​A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem.