POP DE EXPERIMENTOS GEOVANA

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Universidade De Vassouras
	PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO –
POP Experimentos
POP Realizado pela aluna do curso de Análises Clínicas Geovana Santos
	ASSUNTO: Descrição das atividades desenvolvidas no laboratório de Bioquímica
	
	
	
	
	
	
Princípio: 
A glicose é a principal fonte de carboidrato do organismo e sua concentração sanguínea está intimamente ligada à ação da insulina. Após uma refeição rica em carboidratos, a glicose que é absorvida para o sangue causa uma rápida secreção de insulina. Esta, por sua vez, provoca a captação, armazenamento e uso rápido da glicose por quase todos os tecidos corporais, porém especialmente pelos músculos, tecido adiposo e o fígado.
Objetivos:
O exame de dosagem da glicose sanguínea é solicitado para avaliar a quantidade de glicose que está circulando no sangue naquele momento. É utilizado para detectar hiperglicemia e hipoglicemia e ajudar a diagnosticar o diabetes.
Equipamentos:
•Espectrofotômetro (leitura em 500 +/- 20 nm);
•Tubos e pipetas;
•Banho-Maria a 37 °C;
•Cronômetro.
Homogeneizar e incubar os tubos em banho-maria a 37°C por 10 minutos. O nível de água do banho-maria deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos. Ler a absorbância do Padrão (AP) e do Teste (AT), zerando o aparelho com o Branco em 505 nm (490 a 510 nm). A cor é estável durante 30 minutos.
Materiais:
Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e número de catálogo. Descrever as Instruções de preparo e frequência da utilização dos mesmos. Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados.
Técnica:
As técnicas de apresentação adequadas para fotômetros com volume mínimo para leitura igual ou menor que 1000 µL.
• O analista sempre deve fazer uma verificação da necessidade de ajuste do volume para o fotômetro empregado no seu laboratório.
• Os volumes de amostra e de reagente podem ser modificados proporcionalmente, sem alterar o desempenho do teste e os cálculos.
• Em caso de redução dos volumes é necessário observar o volume mínimo de leitura fotométrica.
• Volumes da amostra menores do que 10 µL são críticos em aplicações manuais e devem ser usados com cautela porque aumentam a imprecisão da medição.
Técnica de Análise
1- Deixar a temperatura do fotômetro e a do Reagente de Cor atingir a temperatura de 37°C.
2- Ajustar o comprimento de onda do fotômetro em 505 nm e acertar o Zero de absorbância com água deionizada.
3- Em um tubo rotulado Padrão e em outro rotulado Teste pipetar:
Tubo Padrão: 1000 L de Reagente de Cor + 10 L de Padrão.
Tubo Teste: 1000L de Reagente de Cor + 10 µL de Amostra.
4- Misturar e transferir imediatamente para a cubeta termostatizada em 37°C e acionar o cronômetro.
5- Fazer uma leitura fotométrica do Padrão (AP) e do Teste (AT) aos 30 segundos (A30) e uma segunda leitura aos 90 segundos (A90).
Preparo do Paciente: 
Colher sangue pela manhã após jejum 8 horas, salvo orientações médicas.
Amostras utilizadas:
Plasma, Soro, Líquor e Líquidos Ascético, Pleural e Sinovial.
Princípio: 
A concentração de proteína total no soro está aumentada em pacientes com desidratação, mieloma múltiplo, macroglobulina, lúpus eritematoso, artrite reumatóide, sarcoidose, infecções crônicas, linfo granuloma e endocardite bacteriana sub-aguda.
A concentração de proteína total do soro está diminuída na hiper-hidratação, desnutrição grave, insuficiência renal, nefrose, queimaduras graves, síndrome de má absorção, deficiência de cálcio e vitamina D.
Objetivos:
No exame de proteínas totais e frações são medidas as quantidades de proteínas presentes na circulação sanguínea do indivíduo, permitindo mensurar os valores de componentes como albumina e globulina, além dos valores totais de proteína.
Equipamentos:
•Espectrofotômetro;
•Tubos e Pipetas;
•Cronômetro.
	
Procedimento Técnico Automatizado
Citar nome, modelo e o local onde se encontra o equipamento; Fazer referência ao manual ou POP para utilização do mesmo. Procedimento Técnico Alternativo citar o equipamento alternativo e os procedimentos para medição dos ensaios. Indicar as possíveis diferenças quando os procedimentos manuais substituírem os procedimentos automatizados.
Materiais:
Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e número de catálogo.
Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados.
Procedimentos: 
1- Aplicar os cuidados habituais de segurança na manipulação dos reagentes e amostra biológica. 
2- Recomendamos o uso das Boas Práticas de Laboratórios Clínicos para a execução do teste.
3- De acordo com as instruções de biossegurança, todas as amostras devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes.
4- O Biureto (2) é corrosivo. Contato com os olhos, pele ou mucosas devem ser evitados. Não aspirar ou ingerir.
5- Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resoluções normativas locais, estaduais e federais de preservação do meio ambiente.
Técnica:
•Preparo do Paciente
•Colher sangue pela manhã após jejum 8 horas, salvo orientações médicas.
Amostras utilizadas:
Soro e Líquidos (sinovial, pleural ou ascético).
Princípio: 
A dosagem do colesterol no sangue, juntamente com a de triglicérides e de colesterol HDL, é empregada principalmente na avaliação de risco de doença arterial coronariana e no monitoramento de pacientes com hipotireoidismo, diabéticos e obesos.
Objetivos: 
Os exames são feitos para saber as concentrações de HDL e LDL no organismo — em comparação com a quantidade total de gorduras. Portanto, o número de triglicérides também entra na análise. Esse conjunto de testes é chamado de perfil lipídico.
Equipamentos:
•Espectrofotômetro (leitura entre 490 e 510 nm);
•Tubos e Pipetas;
•Banho-Maria a 37°C;
•Cronômetro.
Materiais:
Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e número de catálogo.
Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados. 
Controle Interno
Descrever a calibração periódica de pipetas, equipamentos utilizados, controle de temperatura ambiente e geladeiras para armazenamento dos kits.
Procedimentos:
1-	Aplicar os cuidados habituais de segurança na manipulação dos reagentes e amostra biológica. 
2-	Recomendamos o uso das Boas Práticas de Laboratórios Clínicos para a realização do teste.
3-	De acordo com as instruções de biossegurança, todas as amostras devem ser manuseadas como materiais potencialmente infectantes.
4-	Os reagentes contêm azida sódica como conservante. Evitar contato com os olhos, pele e mucosa. Não aspirar ou ingerir.
5-	Não pipetar diretamente do frasco do Reagente de cor (2) para evitar contaminação.
6-	Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resoluções normativas locais, estaduais e federais de preservação do meio ambiente.
Técnica:
Preparo do Paciente
A amostra de sangue deve ser colhida após um jejum de 12 horas para evitar a interferência da lipemia pós-prandial que geralmente está presente em amostras obtidas sem jejum.
Princípio:
Em pH ácido, os íons cloreto reagem com o tiocianato de mercúrio formando cloreto mercúrio e íons tiocianato.
Os íons tiocianato reagem com os íons férricos formando tiocianato férrico de cor amarela, cuja intensidade de cor é diretamente proporcional á concentração de cloretos na amostra analisada.
Objetivos:
Excreção é o processo pelo qual os produtos residuais do metabolismo e outros materiais sem utilidade são eliminados do organismo. Este processo é realizado pelos pulmões, rins.
Equipamentos:
•Espectrofotômetro (leitura entre 450 e 510 nm);
•Tubos e Pipetas;
•Cronômetro.
Materiais:
Identificar os materiais de controle interno e externo da qualidade, citando fabricante e número de catálogo.
Referenciar POP para limpeza e secagem dos materiais utilizados.
Procedimentos:
1-Aplicar os cuidados especiais habituais de segurança na manipulação dos reagentes e amostra biológica. 
2- Recomendamos o uso das Boas Práticas de laboratórios Clínicos para a execução do teste.
3- Deacordo com as instruções de biossegurança, todas as amostras e reagentes devem ser 
manuseados como materiais potencialmente infectantes. 
4- O Reagente de Cor contém tiocianato de mercúrio que é tóxico. Evitar a ingestão e no caso de contato com os olhos, lavar imediatamente com bastante água e procurar atendimento médico. Não pipetar o reagente com a boca.
5- Descartar os reagentes e as amostras de acordo com as resoluções normativas locais, estaduais e federais de preservação do meio ambiente.
Técnica:
Preparo do Paciente
Separar o soro ou plasma das células sanguíneas até 1 hora após a coleta para evitar passagem de íons cloreto para as hemácias.
Amostras utilizadas
Soro, Plasma (EDTA, citrato, oxalato e heparina), Urina, e Líquor.
As amostras de urina e líquor devem ser centrifugadas antes da dosagem.
Estabilidade e armazenamento da amostra
O analito é estável por 7 dias entre 15-25 °C e por vários meses na temperatura de 10 °C negativos.
Princípio: O hematócrito, também conhecido como Ht ou Hct, é um parâmetro laboratorial que indica a porcentagem de células vermelhas, também conhecidas por glóbulos vermelhos, hemácias ou eritrócitos, no volume total de sangue, sendo importante para identificar e diagnosticar algumas situações, como a anemia, por exemplo. Objetivos: A análise do hematócrito é rápida e objetiva, ela é também uma medida bastante utilizada em serviços de emergência, especialmente para avaliar a necessidade transfusional. Realiza-se a transfusão de concentrado de hemácias quando o Ht é inferior a 20% e/ou a Hb inferior a 7g/dL. 
 
 Equipamentos: 
•Algodão
 • Álcool etílico
 • Luvas de latex (extração do sangue) 
 • Centrifuga 
 • Tubo Capilar 
• Régua 
Procedimentos: 
INTERPRETAÇÃO DO EXAME E VALORES DE REFERÊNCIA
 A interpretação do resultado é feita em uma escala de leitura onde se limitam as marcas de 0 a 100, observando na escala o limite de separação da massa dos eritrócitos com o plasma.
 O resultado é expresso em porcentagem de eritrócitos em relação ao sangue total. 
 Mulheres Entre 35 e 45% Gestantes Entre 34 e 47% (a gravidez em geral diminui um pouco o resultado devido ao aumento do volume plasmático) Homens Entre 40 e 50% Crianças a partir de 1 ano Entre 37 e 44%
 O QUE PODE SER HEMATÓCRITO BAIXO:
Anemia carencial de Ferro, vitamina B12 ou ácido fólico Sangramento (monitoração de sangramento, para avaliar sua gravidade) Desnutrição, Leucemia, excesso de hidratação. A anemia na gravidez é normal, no entanto, pode ser perigosa para a mãe e para o bebê se não for tratada corretamente. 
O QUE PODE SER HEMATÓCRITO ALTO :
Desidratação Baixos níveis de oxigênio no sangue, doença pulmonar, doença cardíaca congênita, Eritrocitose, que é o aumento anormal de células vermelhas do sangue Além disso, o hematócrito alto também pode indicar policitemia, que é caracterizada pelo excesso de células vermelhas no sangue. Pode ser resultado de um problema da medula óssea (policitemia vera) ou, com maior frequência, a uma compensação de problemas pulmonares (a medula óssea produz mais hemácias para aumentar o transporte de oxigênio para o corpo). Qualquer aumento persistente do hematócrito deve ter sua causa determinada por um médico.
 
Técnica: Preencher um tubo capilar com sangue até ¾ da sua altura Fechar uma das extremidades com massa apropriada ou na chama de uma lamparina. E, por fim, colocar o capilar na centrífuga e programar o tempo e velocidade indicada para a análise.