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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS - EaD AULA ____ DATA: ______/______/______ VERSÃO:01 RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Biologia Molecular DADOS DO(A) ALUNO(A): NOME: Marcelo Soares dos Anjos Filho MATRÍCULA: 01360566 CURSO: Farmácia POLO: Feira de Santana PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A): Juliana Prado Goncales ORIENTAÇÕES GERAIS: · O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e · concisa; · O relatório deve conter apenas 01 (uma) lauda por tema; · Fonte: Arial ou Times New Roman (Normal e Justificado); · Tamanho: 12; Margens: Superior 3 cm; Inferior: 2 cm; Esquerda: 3 cm; Direita: 2 cm; · Espaçamento entre linhas: simples; · Título: Arial ou Times New Roman (Negrito e Centralizado). TEMA DE AULA: ELETROFORESE RELATÓRIO: 1. Identificar todos os equipamentos e reagentes necessários para a realização da eletroforese Cuba de eletroforese, gel agarose, tampão, amostra, sonda (Corante Fluorescente), transluminador, fotodocumentador, magnésio, taq polimerase, primers, nucleotídeos, tubos de PCR e termociclador. 2. Justificar a aplicação das diferentes concentrações dos géis. A agarose é usada como gel de eletroforese. A agarose é um polissacarídeo que forma uma rede que mantém as moléculas durante a migração. Dependendo da concentração de agarose, a taxa de separação é diferente, ou seja, quanto maior a concentração de agarose, menor o tamanho dos poros, mais difícil é a migração de fragmentos de DNA e RNA e maior o tempo de migração. TEMA DE AULA: REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE RELATÓRIO: 1. Descrever cada uma das etapas da PCR, explicando detalhadamente cada uma. Desnaturação (96 °C): Aquece fortemente a reação para separar, ou desnaturar, as fitas de DNA. Isso proporciona um molde de fita simples para a próxima etapa. Anelamento (55- 65°C): Resfria a reação para que os primers possam se ligar às suas sequências complementares no DNA molde de fita simples. Extensão (72 °C): Eleva a temperatura da reação para que a Taq polimerase estenda os primers, sintetizando novas fitas de DNA. Este ciclo se repete 25 - 35 vezes em uma reação típica de PCR, que geralmente ocorre em 2 – 4 horas, dependendo do comprimento da região de DNA a ser copiada. Se a reação for eficiente (funcionar bem), a região de interesse pode gerar de uma ou poucas cópias até bilhões. 2. Realizar o cálculo para 10 reações da PCR Quantidade para 1 reação Quantidade para 10 reações Amostra de DNA 5 uL Amostra de DNA 50 uL dNTPs 2,5 uL dNTPs 25 uL MgCl2 1,25 uL MgCl2 12,5 uL Primers 2 uL (1+1) Primers 20 uL (10+10) Taq Polimerase 1 uL Taq Polimerase 10 uL Tampão 4 uL Tampão 40 uL H2O ultrapura (q.s.p) 9,5 uL H2O ultrapura (q.s.p) 95 uL Total preparado 25 uL Total preparado 250 uL
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