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Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária Os eritrócitos dos mamíferos são anucleados, sendo diferentes de todos os outros vertebrados, os quais têm núcleo. Os eritrócitos são células arredondadas e relativamente bicôncavas na maioria dos mamíferos, exceto na família Camellidae (lhamas, camelos e alpacas), em que se apresentam ovais. A biconcavidade dos eritrócitos provoca a falsa percepção de uma área central mais pálida, devido ao fato de o observador olhar por uma quantidade menor de hemoglobina nessa região da célula. Nos eritrócitos da espécie canina, a palidez é mais aparente. Nas espécies com eritrócitos de menores dimensões, como gatos, equinos, bovinos, ovinos e caprinos, percebe-se menor grau de concavidade e, portanto, pouca ou nenhuma palidez central. A forma de disco côncavo do eritrócito é eficiente para a troca de oxigênio e possibilita que a célula seja maleável à medida que se movimenta por vasos com diâmetro menor do que o seu. Resumidamente, as diferenças significativas entre os eritrócitos das espécies incluem tamanho, forma, grau de palidez central, tendência de formar rouleaux, presença de pontilhados basofílicos e de reticulócitos na resposta regenerativa à anemia. Eritrócitos normais caninos (C), equino (E), felino (F) e bovino (B). COLORAÇÃO DOS ERITRÓCITOS POLICROMASIA As células policromatofílicas são eritrócitos jovens que foram liberados prematuramente. Normalmente, são células grandes e com coloração mais azulada (porque tem organelas remanescentes) do que as células maduras. HIPOCROMASIA Os eritrócitos hipocrômicos são claros e sua palidez central é mais acentuada devido a menor concentração de hemoglobina decorrente da deficiência de ferro. Esfregaço sanguíneo de um cão com anemia por deficiência de ferro. Nos eritrócitos de cães com deficiência de ferro, a hipocromasia é mais evidente do que nas células de outras espécies com a mesma deficiência. Esfregaço sanguíneo de cão mostrando vários torócitos (eritrócitos “perfurados”). Observe a ampla borda de hemoglobina e a carência de hemoglobinização no centro das células (seta). Os Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária torócitos podem ser confundidos com hipocromasia verdadeira. TAMANHO DOS ERITRÓCITOS A variação no tamanho dos eritrócitos é denominada anisocitose. Essa variação pode ser decorrente da presença de células grandes (ou seja, macrócitos), de células pequenas (ou seja, micrócitos) ou de ambas. melhor exemplo disso é o esferócito, que aparenta ser menor devido à sua forma esférica e, consequentemente, diâmetro diminuído; no entanto, o volume dos esferócitos quase sempre se encontra dentro do intervalo de referência. Por outro lado, eritrócitos microcíticos hipocrômicos deficientes em ferro, que apresentam volume diminuído determinado eletronicamente, podem ter diâmetro normal e, dessa maneira, não parecer menores no esfregaço sanguíneo. MICROCÍTICOS A principal causa de microcitose é a anemia por deficiência de ferro; a diminuição do VCM é marca registrada desse tipo de anemia. Em alguns pacientes com essa deficiência, o VCM pode ser normal, mesmo que o animal apresente uma população de células microcíticas. Na fisiopatologia da microcitose, pode ocorrer o envolvimento de precursores eritroides que se dividem continuamente até obterem a concentração de hemoglobina próxima ao normal, resultando em eritrócitos pequenos. MACROCÍTICOS Eritrócitos macrocíticos são grandes e apresentam VCM aumentado. A principal causa de macrocitose é o aumento da quantidade de eritrócitos imaturos, que se apresentam policromatofílicos em esfregaços sanguíneos. Ao contrário de outras espécies domésticas, os equinos liberam macrócitos não policromatofílicos. Nessa espécie, o aumento do VCM geralmente representa a única evidência de regeneração eritroide. Durante a regeneração, as espécies animais, com exceção dos cães, tendem a produzir macrócitos regenerativos que têm, aproximadamente, duas vezes o tamanho dos eritrócitos normais, resultando em alteração acentuada do VCM. No entanto, os cães liberam macrócitos que, em geral, são levemente maiores do que os eritrócitos normais. Macrocitose sem policromasia ou sem outra evidência de resposta regenerativa apropriada é um achado comum em gatos anêmicos com mielodisplasia e doença mieloproliferativa. Essa macrocitose está associada à infecção pelo vírus da FeLV e também pode ser constatada em gatos infectados por FeLV que não estejam anêmicos. MORFOLOGIA DOS ERITRÓCITOS Os eritrócitos com formas anormais são denominados poiquilócitos. Os eritrócitos espiculados apresentam um ou mais espículos na superfície e incluem equinócitos, acantócitos, ceratócitos e esquistócito. ESQUISTÓCITOS E CERATÓCITOS Fragmentos de eritrócitos, ou esquistócitos, geralmente resultam do cisalhamento eritrocitário devido a algum trauma intravascular. A extrusão de hemoglobina pode ser responsável pela área incolor. Posteriormente, essas lesões ampliam e rompem-se, formando células com uma ou mais espículas. Quando uma espícula está presente, essas células comumente são denominadas células tronco de macieira; quando duas ou mais espículas estão presentes, são denominadas ceratócitos. Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária Esfregaço sanguíneo de um cão com hemangiossarcoma esplênico e coagulopatia intravascular disseminada. Observe o esquistócito (seta) e uma única plaqueta no campo (ponta de seta. Esfregaço sanguíneo de um gato com anemia por deficiência de ferro. Observe as anormalidades das membranas eritrocitárias. A ausência de hipocromasia é comum em eritrócitos de felinos com deficiência de ferro. Além disso, há células vesiculares (setas pequenas) e ceratócitos (setas grandes). No destaque, esfregaço sanguíneo de um cão com deficiência de ferro. Observe a célula vesicular (seta pequena) e os eritrócitos hipocrômicos (ponta de seta). ACANTÓCITOS Acantócitos, ou células com esporões, são eritrócitos espiculados irregulares, com poucas projeções, de comprimento e diâmetro variáveis, distribuídas aleatoriamente. Acredita-se que os acantócitos sejam provenientes das alterações nas concentrações de colesterol ou de fosfolipídios na membrana do eritrócito. Os acantócitos são frequentemente observados em esfregaços sanguíneos de gatos com lipidose hepática e também comumente vistos em esfregaços de cães com hemangiossarcoma. Esfregaço sanguíneo de cão anêmico com hemangiossarcoma em baço rompido. Esquerda. Há vários acantócitos presentes (setas). Observe as grandes células policromatofílicas no mesmo campo, indicando que a anemia é regenerativa. Direita. Acantócitos (seta) e esquistócitos (ponta de seta) são achados típicos em cães com hemangiossarcoma. EQUINÓCITOS Equinócitos (ou seja, células espinhosas) são células espiculadas que têm em sua superfície numerosas pequenas projeções de rombas a afiadas, uniformemente espaçadas e que são relativamente uniformes em tamanho e forma. A formação de equinócitos pode ser um resultado artefatual (i. e., crenação) decorrente de alteração do pH durante a secagem lenta do esfregaço sanguíneo, mas também tem sido associada a doença renal, linfoma, acidentes ofídicos por cascavel, quimioterapia em cães e depois do exercício em equinos e também são vistos em casos de mordida por cascavel (equinócitos tipo 3). Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária Cão mordido por cascavel. ESFERÓCITOS Esferócitos são eritrócitos de coloração escura que perderam a palidez central. Parecem ser pequenos, mas o seu volume é normal. Não são facilmente detectados em animais, exceto em cães, devido ao tamanho pequeno e à perda da palidez central nos eritrócitos normais da maioria das outras espécies de animais domésticos. Os esferócitos apresentam menor quantidade de membrana, como resultado de fagocitose parcial, decorrente da presença deanticorpos ou de complemento na superfície do eritrócito. A pesquisa de esferócitos é muito importante, pois sua presença sugere anemia hemolítica imunomediada, entretanto podem ser achados após transfusão sanguínea com sangue compatível. Esfregaço sanguíneo de cão com AHIM. Observe os vários esferócitos (setas). A anemia é regenerativa, como indicado pelos eritrócitos policromatofílicos (ponta de seta). Esfregaço sanguíneo de cão com AHIM. Muitos dos eritrócitos são esferócitos (pontas de seta) e há diversos esferócitos incompletos (setas). EXCENTRÓCITOS As características dos excentrócitos incluem o deslocamento da hemoglobina para uma parte da célula, perda de palidez central normal e uma zona clara delimitada por membrana. Esse tipo celular está associado à lesão oxidativa, especialmente em cães, e pode ser encontrado em conjunto com corpúsculos de Heinz. Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária Esfregaço sanguíneo de cão com anemia por corpúsculos de Heinz após ingestão de cebola. Presença de excentrócitos (setas). LEPTÓCITOS E CODÓCITOS Leptócitos são eritrócitos que sofreram alterações na razão superfície: volume, restando excesso de membrana em relação aos conteúdos internos e resultando em dobras da membrana e em formação de células-alvo. (Pode-se formar in vitro se contato em excesso com EDTA). As células-alvo são também denominadas codócitos e correspondem a eritrócitos arredondados e finos, com densa área central de hemoglobina que está separada da região hemoglobinizada periférica por uma zona pálida. As células em alvo podem ser vistas em cães com aumento da concentração sérica de colesterol, mas também são observadas em uma variedade de outras condições e têm pouca importância. Esfregaço sanguíneo de cão com numerosos leptócitos. Observe as diversas células-alvo (setas) e células dobradas (ponta de seta). ESTOMATÓCITOS Estomatócitos são eritrócitos unicôncavos com uma área clara semelhante ao formato de uma boca, próximo do centro da célula. ESTRUTURAS OBSERVADAS NOS ERITRÓCITOS CORPÚSCULOS DE HEINZ A desnaturação oxidativa da hemoglobina resulta na formação de corpúsculos de Heinz. Aproximadamente de 1 a 2% dos eritrócitos de gatos normais contêm esses corpúsculos, devido a Hb felina conter 2x a quantidade de grupos sulfidrila reativos em comparação as outras espécies. Os corpúsculos de Heinz são estruturas pequenas, pálidas e excêntricas dentro dos eritrócitos e nos esfregaços sanguíneos corados com Wright. Geralmente parecem se projetar discretamente pelas bordas dos eritrócitos. Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária PONTILHADO BASOFÍLICO Agregação de ribossomos in vivo. Normalmente, em ruminantes, o pontilhado basofílico está associado a eritrócitos imaturos e também pode ser visto, porém em menor grau, em cães e gatos com anemia altamente regenerativa. Pontilhados basofílicos não associados à anemia grave são sugestivos de intoxicação por chumbo, porém nem todos os animais assim intoxicados apresentam tal alteração. Em acima. Esfregaço sanguíneo de um cão com AHIM. A anemia apresenta alto grau de regeneração e são observados eritrócitos policromatofílicos, eritrócitos nucleados (pontas de seta) e um corpúsculo de Howell-Jolly (seta). Observe que os eritrócitos nucleados (metarrubrícitos) apresentam citoplasma de coloração variável. A célula da esquerda tem citoplasma maduro, enquanto a da direita apresenta citoplasma policromatofílico. Direita embaixo. O resto nuclear, ou corpúsculo de Howell-Jolly, está indicado pela seta. Esquerda embaixo. Pontilhado basofílico (seta pequena) em esfregaço sanguíneo de cão intoxicado por chumbo. ERITRÓCITOS NUCLEADOS O aumento da quantidade de eritrócitos nucleados está associado à anemia regenerativa ou à liberação precoce dessas células em resposta à hipoxia. CORPÚSCULOS DE HOWELL-JOLLY Restos nucleares dentro dos eritrócitos são denominados corpúsculos de Howell-Jolly. Concentração aumentada de corpúsculos de Howell-Jolly está associada à anemia regenerativa, à esplenectomia e à supressão da função esplênica. Esses corpúsculos são inclusões pequenas, arredondadas, de cor azul-escura e tamanhos variáveis. Os corpúsculos de Howell-Jolly (pontas de seta). DISTRIBUIÇÃO DE ERITRÓCITOS NO ESFREGAÇO SANGUÍNEO FORMAÇÃO DE ROULEAUX A formação de rouleaux corresponde ao posicionamento espontâneo dos eritrócitos em forma de pilhas lineares. Quando se tem um hipoproteinemia tais como o fibrinogênio e as imunoglobulinas, está aumentada nota-se maior formação de rouleaux. aumento da formação rouleaux frequentemente é sugestivo de gamopatia; animais com mieloma múltiplo quase Rebeca Woset Morfologia Eritrocitária sempre apresentam aumento na formação rouleaux. Equinos é normal uma pequena quantidade. AGLUTINAÇÃO A aglutinação de eritrócitos resulta em aglomerados celulares irregulares e esféricos devido à formação de pontes relacionadas com os anticorpos. A aglutinação é sinal sugestivo de AHIM, porém também pode ser observada após transfusão sanguínea com sangue incompatível. Para confirmar a presença da aglutinação, misture uma pequena quantidade de sangue com uma gota de solução salina isotônica, se for ela irá persistir. A aglutinação pode ser muito intensa, de modo que pode ser vista grosseiramente em esfregaços sanguíneos e na parede de tubos que contenham EDTA.
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