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UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II Hemograma - É a principal ferramenta para a medicina em hematologia. O exame é composto por duas partes: Eritrograma - Contagem de Hemácias → Hemocitômetro • Pode ser feita de forma manual no laboratório, coleta-se uma amostra de 2ml de sangue do paciente em tubo com EDTA e coloca-se o material hegemonizado para a análise. • A primeira coisa a fazer é diluir o sangue em um produto que destrói todos os leucócitos, e depois disso coloca-se o sangue em uma lâmina específica para contagem de células, a Neubauer, enchendo, com uma pipeta, os dois quadrantes da lâmina. • Depois disso é preciso contar as hemácias dentro dos quadrantes específicos. • Valor de referência: 4.300.000 a 5.700.000/ mm3 - Dosagem de hemoglobina → Método colorimétrico (Espectrofotometria) • Determinar as absorbâncias dos tubos teste e padrão em 540 nm, acertando o zero com o branco • Valor de referência da hemoglobina: 12 a 17 g/dL • O equipamento automatizado também utiliza esse mesmo método. Eritrograma Hemácias, hemoglobina, hematócrito, VCM, HCM, CHCM, RDW, morfologia das hemácias, contagem de plaquetas Leucograma Leucometria Global (contagem global de leucócitos) e Leucometria Específica (contagem específica de leucócitos UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II - Hematócrito → Volume ocupado pelas hemácias em 100 ml de sangue total. → Coloca-se o sangue em um micro hematócrito, que depois vai para uma centrífuga específica, e a partir disso é obtido o resultado. → Valor de referência do hematócrito: 36 a 52% → A morfologia das hemácias pode interferir no resultado: se forem hemácias menores, mesmo em número normal, o hematócrito será abaixo do valor de referência, e o mesmo ocorre para hemácias maiores. Por conta disso, os dados devem ser interpretados em conjunto. - Morfologia das hemácias → As hemácias normocíticas tem 7µ → 7 micras correspondem a um núcleo de um linfócito maduro normal. → Alterações morfológicas no tamanho das hemácias • Anisocitose (1) • Hemácias microcíticas ou micrócitos: 5 µ (2) • Hemácias macrocíticas ou macrócitos: 8 a 15 µ (3) • Hemácias megalocíticas: 25 µ (4) → Alterações morfológicas na cor das hemácias (Anisocromia) → A cor está ligada ao nível de hemoglobina. • Hemácias normocrômicas: halo claro central 1 2 3 4 UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II • Hemácias hipocrômicas (1) • Hemácias policromáticas (2) • Hemácias hipercrômicas (3) - Termo não utilizado, porque essa aparência na verdade acontece devido ao formato de esfera da hemácia, os esferócitos. Essa formação decorre principalmente por conta de uma alteração de genes. - Índices hematimétricos → VCM: volume corpuscular médio • Avalia o tamanho médio das hemácias • Valor de referência: 80 a 100 fl • VCM < 80 – sugere microcitose • VCM > 100 – sugere macrocitose • HTC = dosagem do hematócrito (volume) • HTM = contagem total de hemácias (quantidade) → HCM: hemoglobina corpuscular média • Avalia a concentração de Hb (hemoglobina) nas Hemácias. • Valor de referência: 27 a 32 pg • HCM < 27 – sugere hipocromia • Hb = dosagem de hemoglobina • HTM = contagem total de hemácias → CHCM: concentração de hemoglobina corpuscular média • Avalia a porcentagem de Hb em 100 ml de hemácias. • Valor de referência: 32 a 35% • CHCM < 32 – sugere hipocromia • CHCM > 35 – sugere esferocitose • Hb = dosagem de hemoglobina • HTC = dosagem do hematócrito 1 2 3 UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II Exame hematológico - 1953: Wallace Coulter desenvolveu um equipamento que fazia a contagem de células a partir da impedância elétrica. → As diferentes células sanguíneas são contadas e medidas a partir dos impulsos elétricos que geram quando imersas em um meio condutor (solução eletrolítica) → As células são orientadas por um fluxo laminar e interceptadas uma a uma por uma corrente elétrica. - Histogramas – Hemácias (RBC) UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II - Histogramas – Plaquetas (PLT) - Red Cell Distribuition Width – RDW (Distribuição da Amplitude das Células Vermelhas UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II - Leucometria Global (WBC) → No resultado final desse exame, o aparelho não conta especificamente cada tipo de leucócito, dá apenas a quantidade total deles. - Leucometria Específica → Contagem manual: identificação de 100 leucócitos, com a classificação específica de cada tipo, em esfregaço sanguíneo corado. → Para fazer análises em hematologia, é necessário utilizar corantes que interajam com substâncias ácidas e básicas. Os três mais famosos são: May Grunwald – Giemsa, Giemsa, Romanowsky. → A melhor região para fazer a contagem é a do meio do esfregaço. → A ordem de contagem deve seguir um padrão de zigue zague, a fim de não repetir ou pular células durante a contagem. → A microscopia também ajuda a conferir a morfologia das hemácias e contagem de plaquetas. UFV – Universidade Federal de Viçosa Matéria: MED 132 – Laboratório Aplicado à Clínica II - Valores de referência dos leucócitos → Exemplo 1 • Leucometria global = 8.000/mm3 • 8% de eosinófilos no esfregaço • Calcula-se o valor absoluto com uma regra de 3 • Nesse caso, a concentração dos eosinófilos é de 640 eosinófilos/mm3 → indica eosinofilia → Exemplo 2 • Leucometria global = 3.200/mm3 • 8% de eosinófilos no esfregaço • Nesse caso, a concentração dos eosinófilos é de 256 eosinófilos/mm3 • Não indica eosinofilia, apesar de apresentar valor relativo de 8%, assim como o exemplo. Hemograma automatizado - VCS (Volume – Condutividade – Scatter) → Volume: impedância elétrica → Condutividade: rádio frequência – as ondas penetram na membrana lipídica dos leucócitos, coletando informações sobre estruturas internas, composição química e volume nuclear. → Scatter – Laser: ao incidir um feixe de laser sobre a célula, este é desviado para todos os sentidos e um sensor detecta este desvio, que está associado à presença de grânulos, lóbulos nucleares e superfície celular. - Preparador e corador de lâminas – padronização do esfregaço → Utiliza a informação do valor do hematócrito da amostra → Regula automaticamente a quantidade de sangue, a velocidade e o ângulo da lâmina extensora para melhorar a qualidade do esfregaço.
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