Relatório antibiograma

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FACULDADES INTEGRADAS DE BAURU
Curso de Biomedicina
Disciplina: Microbiologia Clínica
Professora: Gislaine Querino 
 WEVERTHON PEREIRA DOS SANTOS
	
	
 RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA: 
UROCULTURA E ANTIBIOGRAMA
 Bauru
 2021
Introdução
A urocultura consiste na semeadura de urina em meios de cultura, principalmente o ágar Cled, afim de analisar se o indivíduo apresenta uma infecção do trato urinário ou apenas microrganismos da microbiota normal. As infecções do trato urinário são fáceis de identificar quando apresentam sintomas mas podem ser graves em casos de insuficiência renal e septicemia. Normalmente, se o meio semeado com urina coletada corretamente possui mais de 100.000 bactérias/fungos indica que o indivíduo está com uma provável infecção ou que há muitas bactérias e/ou fungos ali presente necessitando de outros exames para a confirmação da suspeita, sendo uma delas a identificação de microrganismos patogênicos. Já o antibiograma, também conhecido como Teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA) é um método utilizado para determinar a sensibilidade bacteriana diante a diversos fármacos com concentrações distintas afim de identificar microrganismos resistentes a determinados antibióticos. A metodologia mais utilizada e mais difundida na rotina de análises clínicas é a de Kirby e Bauer (disco difusão) por apresentar baixo custo, praticidade e confiabilidade nos resultados.
Objetivos
Aprender como realizar a contagem do crescimento microbiano nas placas de urocultura, sabendo dizer quando há uma provável infecção ou não e analisar o tamanho dos halos de inibição apresentados pelo antibiograma sendo possível definir se aquele determinado microrganismo é resistente (R), sensível (S) ou sensível aumentando a exposição (I).
Materiais e Métodos
• Meios de cultura (Manitol, Cled, MacConkey e ágar Mueller Hinton);
• Discos de antibióticos (gentamicina, ampicilina, ciprofloxacina, ceftazidima, eritromicina, sufazotrim, entre outros);
• Lâminas de microscopia;
• Corantes (cristal violeta, lugol, descorante e fucsina);
• Solução fisiológica;
• Bico de Bunsen;
• Alça bacteriológica;
• Régua;
• Microscópio.
Contagem da quantidade de microrganismos em placa
1. Fazer quatro quadrantes utilizando uma caneta nas placas de petri com crescimento microbiano;
2. Selecionar um dos quadrantes e fazer a contagem de cada colônia formada. Após a contagem, multiplicar o valor por 4 e depois por 1000;
3. O resultado é dado em UFC/ml, sendo até 100 mil = normal e acima disso uma provável infecção, necessitando de novos exames para confirmação em casos assintomáticos.
Leitura dos halos do antibiograma
1. Com o auxílio de uma régra, medir o tamanho dos halos formados no antibiograma;
2. Anotar os resultados em milímetros e analisar na tabela de pontos de corte caracterizando os resultados de acordo com os critérios do BrCast.
Resultados e Discussão
Urocultura
Placa 1 - Confecção da lâmina com bactéria do meio MacConkey
	MEIOS
	CRESCIMENTO
	COLORAÇÃO
	MORFOLOGIA
	CLED
	Alto
	Amarela
	Bacilo Gram negativo
	MACCONKEY
	Alto
	Rosa
	Bacilo Gram negativo
	MANITOL
	_
	_
	_
Enterobactérias
Placa 2 - Confecção da lâmina com bactéria do meio Cled
	MEIOS
	CRESCIMENTO
	COLORAÇÃO
	MORFOLOGIA
	CLED
	Alto
	Amarela
	Bacilo Gram negativo
	MACCONKEY
	Alto
	Rosa
	Bacilo Gram negativo
	MANITOL
	_
	_
	_
Enterobactérias
Placa 3 - Confecção da lâmina com bactéria do meio Manitol
	MEIOS
	CRESCIMENTO
	COLORAÇÃO
	MORFOLOGIA
	CLED
	Alto 
	Amarela/
alaranjado
	Coco Gram positivo
	MACCONKEY
	_
	_
	_
	MANITOL
	Alto
	Amarela/
esbranquiçada
	Coco Gram positivo
Staphylococcus spp.
Placa 4 - Confecção da lâmina com bactéria do meio Cled
	MEIOS
	CRESCIMENTO
	COLORAÇÃO
	MORFOLOGIA
	CLED
	Alto
	Verde
	Bacilo Gram negativo
	MACCONKEY
	Alto 
	Esverdeado/
marrom
	Bacilo Gram negativo
	MANITOL
	_
	_
	_
Pseudomonas spp. 
Placa 5 - Confecção da lâmina com fungo do meio Manitol
	MEIOS
	CRESCIMENTO
	COLORAÇÃO
	MORFOLOGIA
	CLED
	Alto
	Branco
	Levedura
	MACCONKEY
	_
	_
	_
	MANITOL
	Baixo
	Transparente/
esbranquiçado
	Levedura
Obs: Na hora de observar a lâmina da placa 5 através do microscópio, fiquei em dúvida se era uma levedura ou um coco gram positivo. No fim o tamanho do microrganismo revelou uma levedura e foi possível também perceber depois alguns brotamentos.
Antibiograma
 1 - Enterobactérias
	Antibiótico
	Concentração
	Tamanho do halo de inibição
	Sensível (S), Sensível aumentando a exposição (I) e Resistente (R)
	Levofloxacina (LVX)
	5 mg
	40 mm
	S
	Gentamicina (GEN)
	10 mg
	20 mm
	S
	Amicacina (AMI)
	30 mg
	25 mm
	S
	Ampicilina (AMP)
	10 mg
	20 mm
	S
	Ciprofloxacina (CIP)
	5 mg
	40 mm
	S
	Amoxicilina + Ac. Clavulânico (AMC)
	30 mg
	22 mm
	S
	Ceftazidima (CAZ)
	30 mg
	30 mm
	S
	Cefalotina (CFL)
	30 mg
	19 mm
	_
2 - Enterobactérias
	Antibiótico
	Concentração
	Tamanho do halo de inibição
	Sensível (S), Sensível aumentando a exposição (I) e Resistente (R)
	Levofloxacina (LVX)
	5 mg
	40 mm
	S
	Gentamicina (GEN)
	10 mg
	21 mm
	S
	Amicacina (AMI)
	30 mg
	23 mm
	S
	Ampicilina (AMP)
	10 mg
	19 mm
	S
	Ciprofloxacina (CIP)
	5 mg
	42 mm
	S
	Amoxicilina + Ac. Clavulânico (AMC)
	30 mg
	22 mm
	S
	Ceftazidima (CAZ)
	30 mg
	30 mm
	S
	Cefalotina (CFL)
	30 mg
	20 mm
	_
3 - Staphylococcus spp.
	Antibiótico
	Concentração
	Tamanho do halo de inibição
	Sensível (S), Sensível aumentando a exposição (I) e Resistente (R)
	Levofloxacina (LVX)
	5 mg
	30 mm
	I
	Gentamicina (GEN)
	10 mg
	19 mm
	S* e R
	Amicacina (AMI)
	30 mg
	20 mm
	S* e R
	Ampicilina (AMP)
	10 mg
	43 mm
	S
	Ciprofloxacina (CIP)
	5 mg
	30 mm
	I
	Eritromicina (ERI)
	15 mg
	19 mm
	I
	Sulfazotrim (SUT)
	25 mg
	22 mm
	S
S*= Staphylococcus aureus é sensível a essa concentração, porém os Staphylococcus coagulase negativa são resistentes.
4 - Pseudomonas spp.
	Antibiótico
	Concentração
	Tamanho do halo de inibição
	Sensível (S), Sensível aumentando a exposição (I) e Resistente (R)
	Levofloxacina (LVX)
	5 mg
	30 mm
	I
	Gentamicina (GEN)
	10 mg
	20 mm 
	_
	Amicacina (AMI)
	30 mg
	25 mm
	S
	Ampicilina (AMP)
	10 mg
	15 mm
	_
	Ciprofloxacina (CIP)
	5 mg
	40 mm
	I
	Amoxicilina + Ac. Clavulânico (AMC)
	30 mg
	13 mm
	_
	Ceftazidima (CAZ)
	30 mg
	30 mm
	I
	Cefalotina (CFL)
	30 mg
	0 mm
	R
Conclusão
Com esta aula prática foi possível visualizar e entender como funciona um antibiograma e como interpretar o tamanho dos halos de inibição por meio de documentos padronizados, que neste caso, foi utilizado o BrCast. É interessante ressaltar que a mesma bactéria consegue reagir de forma totalmente diferente aos diversos antibióticos, podendo ser sensíveis a uns e resistentes a outros, nos instigando a investigar a forma como esses fármacos agem em busca de uma clareza maior e conhecimento mais amplo. Além disso, nota-se também que a urocultura em ágar Cled teve crescimento alto de todos os microrganismos, enquanto no ágar Manitol três não crescerem e um apresentou crescimento baixo.
Referências
LABORCLIN. Manual para antibiograma difusão em disco (Kirby e Bauer). Disponível em: http://docente.ifsc.edu.br/melissa.kayser/MaterialDidatico/Microbiologia/Antibiograma%20LABORCLIN.pdf. Acesso em: 13 de jun. de 2021.
REVISTA BRASILEIRA DE ANÁLISES CLÍNICAS. Desenvolvimento e utilização de conservante químico em amostras de urina para análises microbiológicas (urocultura) e rotina (E.A.S.). Disponível em: 
http://www.rbac.org.br/wp-content/uploads/2016/08/RBAC_Vol.37_n3-Completa.pdf. Acesso em: 13 de jun. de 2021.