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1 @nutristudies.loren ECOLOGIA MICROBIANA → MO utilizam os alimentos como fonte de nutrientes para o crescimento - Deterioração → Agentes causadores de deterioração podem ser: • Bactérias • Fungos filamentosos • Leveduras → Durante o processo da deterioração é selecionado uma população ou tipo predominante de micro-organismos → Cada tipo de alimento deteriora-se pela ação de um tipo de MO • Carnes – bactérias psicrotróficas -Crescem em uma faixa de temperatura de refrigeração • Suco de frutas – leveduras → Dos MO presentes no alimento, somente uma parte dessa microbiota contaminante prolifera o suficiente para causar alteração no produto → Ecologia microbiana – estuda as interações entre os MO entre si e com o ecossistema - Produz alterações químicas benéficos ou não ao meio → Fatores intrínsecos → Fatores extrínsecos → Fatores implícitos – relação entre os grupos microbianos no alimento, microbiota do alimento ATIVIDADE DE ÁGUA → Umidade X atividade de água = não são a mesma coisa → É a água disponível para reações químicas no alimento → Metabolismo e multiplicação de MO → Umidade – quantidade de água total contido no alimento → Água ligada a macromoléculas – não está livre para participar de reações químicas → Aa = P/Po • Po – Pressão parcial de vapor da água pura • P - Pressão parcial de vapor da água contida em uma solução/alimento • Mede a disponibilidade de água em um alimento → Pressão de vapor – pressão na qual a água entra em estado de vapor numa dada temperatura → A pressão de vapor de uma substância em mistura com outras substâncias é sempre menor do que quando ela está no estado puro → Relação entre Aa e a concentração de uma solução salina: 2 @nutristudies.loren → Isotermas de sorção – gráficos que relacionam a quant. de água de um alimento com sua Aa - Varia a cada tipo de alimento e depende da estrutura física, composição química e capacidade de retenção de água no alimento → Quanto maior a concentração de solutos, menor a atividade de água → É importante medir a Aa de água do alimento porque: ✓ Prever o desenvolvimento microbiano ✓ Avaliar as reações químicas e vida de prateleira ✓ Avaliar a estabilidade física ✓ Projetar embalagem – proteção contra umidade ambiente ✓ Analisar a transferência de umidade entre ingredientes ✓ Considerar o intercâmbio de umidade com meio ambiente ✓ Predizer a curva de isoterma – Umidade x Aw → Bactérias preferem ambiente com maior Aa para multiplicação → Fungos podem proliferar em ambiente mais secos → MO não se desenvolvem em ambiente completamente desidratado Aa 1 Água pura 0,999 Existe um mín. de nutrientes 0,60 Não há água livre que favorece o metabolismo bacteriano, mas certos fungos podem se reproduzir → Grupos de MO particularmente resistentes a Aa: • Osmofílicos – para se desenvolver precisam de ambiente com baixa Aa - Ex.: produtos açucarados • Osmodúricos – suportam, mas não exigem ambientes com elevada concentração de açúcar • Halofílicos – necessitam de ambiente com elevada concentração de salina • Halodúricos – suportam altas concentrações de sal • Xerofílicos: possuem afinidade a ambientes secos → Valores mínimos de Aa para crescimento de alguns grupos de MO: 3 @nutristudies.loren → Alguns MO possuem valores mínimos de Aa que favorecem a produção de toxina → Valores de Aa de alguns alimentos: → As concentrações de solutos, adição de sais, de açúcar e de outras substâncias provocam a redução da atividade de água dos alimentos UMIDADE RELATIVA DO AR (URA) E AA DOS ALIMENTOS → URa < Aa • Alimento perde água • Dessecação da superfície do alimento • Menos suscetível ao crescimento microbiano - Pode haver crescimento de fungos → URa > Aa • Agrega umidade a superfície do alimento • Maior risco de proliferação de MO COMO REDUZIR A AA DOS ALIMENTOS → Desidratação → Adição de solutos → Congelamento - Torna a água indisponível CRESCIMENTO DOS MO → Possui 4 fases → Fase lag – adaptação metabólica ao novo ambiente • Metabolismo celular está direcionado para sintetizar enzimas queridas para o crescimento nas novas condições 4 @nutristudies.loren • N° de indivíduos não aumenta, podendo até mesmo diminuir → Fase de cresc. exponencial – plenitude das capacidades • Suprimentos de nutrientes do meio é superior às necessidades do MO • N° de células da população dobra a cada geração → Fase estacionária: velocidade de crescimento vai diminuindo até atingir a fase em que o n° de novos MO = n° MO que morre • Isso pode ser devido ao acúmulo de metabólitos tóxicos, esgotamento de nutrientes e de O2 → Fase de declínio ou morte: quant. de MO que morre é superior aos que surgem → Aa influencia nas fases de crescimento microbiano → Efeito da Aa sobre o crescimento microbiano: • Reduz a fase lag • Reduz velocidade de crescimento • Reduz tamanho da população final → Efeito da concentração de solutos sobre a célula • Meio hipertônico – meio com alta [soluto], leva a célula à plasmólise • Meio hipotônico – meio com baixa [soluto], aumentando o turgor da célula → Resposta ao estresse osmótico – MO produz e acumula solutos compatíveis (substâncias osmoprotetores) • Se ligam as moléculas de água no interior da célula • Tentativa de sobreviver ao meio • Confere larga adaptabilidade aos MO • Envolve síntese de compostos e importação de compostos do ambiente → Solutos compatíveis: ✓ Prolina ✓ Íons K ✓ Glicina ✓ Betaína ✓ Glutamina ✓ Glicerol ✓ Sacarose PH → É um índice que indica acidez, neutralidade ou alcalinidade de um meio 5 @nutristudies.loren → MO tem valores de pH mínimo, ótimo e máximo para multiplicação → Mais favorável = pH neutro – 6,5 a 7,5 - Muito encontrados nos alimentos → Alguns MO são favorecidos pelos meios ácidos - Bactérias láticas → Fungos filamentosos e leveduras = maior tolerância ao pH → Bactérias patogênicas = mais exigentes → Valores aproximados de pH para crescimento de patógenos de importância em alimentos: → pH influencia na taxa de crescimento do MO – aumenta a fase lag Ex.: Clostridium sporogenes → Classificação dos alimentos quanto a acidez: → Efeitos do pH no MO • Alterações da atividade enzimática responsáveis pelas atividades vitais da célula • Afeta transporte de nutrientes para o interior da célula • Menor velocidade de crescimento • Membrana citoplasmática é relativamente impermeável aos íons H+ e OH- → pH abaixo ou acima da neutralidade = capacidade de multiplicação afetada → Isso leva o MO a uma capacidade de modificar o pH do meio para um valor ou faixa ótima → O que acontece: • Ambientes ácidos – evitar que H+ entre ou expelir numa velocidade maior que a de entrada • Maior gasto de energia para manter o pH intracelular • Desnaturação de proteínas e DNA 6 @nutristudies.loren • Menor velocidade de crescimento → Efeito da exposição ao ácido na célula: • Em relação ao transporte de nutrientes, a célula bacteriana tende a ter uma carga residual negativa • Compostos ionizados não conseguem entrar → Quando o ácido está na forma não ionizado, penetra mais facilmente e lá, o H+ é liberado → Ácido ionizado são repelidos devido as cargas da membrana → Ácidos fracos de cadeia curta e lipofílicos são usados nos alimentos – ácidos não ionizao → pKa é o pH em que o ácido está 50% na forma dissociada e 50% na forma não dissociada → Valores de pKa de algunsácidos: → Valores de pKa e percentual de ácido não dissociado em diferentes valores de pH → Ex.: ácido acético – para ter mais ácido não dissociado o pH deve ser menor que 4,7 → MO sempre tentará sobreviver frente a alterações extremas → Manutenção da homeostase – manter o pH interno mesmo quando o pH externo seja baixo → Resposta de tolerância ao ácido – ATR – indução da síntese de proteína do choque ácido → Resposta cruzada ao estresse – células submetidas a inicialmente ao estresse osmótico responderam melhor ao estresse ácido → Para impedir isso deve ser feita uma escolha adequada do método de conservação POTENCIAL DE OXI-REDUÇÃO → É a facilidade com a qual o substrato ganha ou perde elétrons → Perda elétrons = oxidação → Ganho elétrons = redução → Quando os elétrons são transferidos de um composto para outro, é criada uma diferença potencial entre eles - Volts (V) ou milivolts (mV) → Quanto mais oxidada = mais positivo o potencial de oxi-redução → Quanto mais reduzida = mais negativo o potencial de oxi-redução → MO aeróbios – valores de Eh positivos 7 @nutristudies.loren - Oxidantes → MO anaeróbios – valores de Eh negativos - Redutores → O potencial redox de um alimento depende da(o): ✓ Composição ✓ Capacidade de balanceamento – resistência do alimento em modificar o Eh ✓ Tensão de O2 da atmosfera em contato com o alimento ✓ Acesso que a atmosfera tem ao alimento - Embalagens com diferentes permeabilidades ao O2, embalagem a vácuo, atmosfera modificada → Categoria de MO de acordo com o Eh: → Aeróbio estrito – requerem Eh positivo para se multiplicar - Fungos filamentosos, leveduras e muitas bactérias deterioradoras (Pseudomonas fluorescens) e algumas patogênicas → Microaerófila – algumas bactérias aeróbias que se multiplicam em baixas tensões de oxigênio - Bactérias láticas → Anaeróbios facultativos – requerem valores baixos de Eh - Bactérias do trato gastrointestinal → Anaeróbios estritos – sobrevivem apenas em condições de anaerobiose - Clostridium → Crescimento microbiano em diferentes potenciais redox → Alimentos de origem vegetal – deterioração por bactérias aeróbias e fungos • Eh: +300 e +400 mV → Carnes – depende da superfície de exposição • Grandes pedaços – -200 mV • Moídas – até +200 mV → A presença de oxigênio é mais inibitória ou até mesmo letal a bactérias anaeróbias pois não possuem as enzimas • Catalase – decompõe H2O2 • Superóxido dismutase – remove o radical superóxido - Evitam o acúmulo de produtos tóxicos às células → Importância na conservação de alimentos: • Determinante para desenvolvimento de diferentes tipos de MO Ex.: embalagens impermeáveis ao O2, uso de vácuo, atmosfera com gases inertes para se controlar determinados grupos de MO → Embalagens a vácuo – usados para queijos, hortaliças, produtos cárneos e outros - Evita fungos filamentosos superficiais → Enlatados – ambiente anaeróbio favorece a multiplicação de bactérias esporuladas, anaeróbias ou anaeróbias facultativas 8 @nutristudies.loren PRESENÇA DE NUTRIENTES → Principais elementos químicos para o crescimento das células: • Carbono, nitrogênio, fósforo e enxofre • MO heterotróficos – usam compostos orgânicos como principal fonte de carbono • MO autotróficos – usam CO2 como principal e única fonte de carbono → Para que ocorra multiplicação microbiana é preciso que estejam disponíveis: ✓ Água ✓ Fonte de energia – CHO, LIP ✓ Fonte de nitrogênio – aminoácidos ✓ Vitaminas ✓ Sais minerais – reações enzimáticas → Nutrientes que estão contidos nos alimentos selecionam os MO capazes de crescer → Isso se dá de acordo com a capacidade de hidrolisar o substrato Ex.: margarina – MO lipofílicos capaz de hidrolisar lipídeos FATORES ANTIMICROBIANOS NATURAIS → Substâncias com capacidade de retardar ou impedir a multiplicação microbiana → Confere a estabilidade de alguns alimentos → Condimentos – contém óleos essenciais - Eugenol, alicina, aldeído cinâmico, timol, isotimol → Ovos – clara (lisozima) → Leite – sistema lactoperoxidase, lactoferrina, lisozima → Ácidos orgânicos – acético, lático e cítrico → Compostos fenólicos – derivados do ácido hidroxicinâmico e taninos - Ác. p-coumárico, ferúlico, caféico e clorogênico ESTRUTURAS BIOLÓGICAS → Barreira ou obstáculo para o acesso de MO às partes perecíveis de alguns alimentos - Presença de nutrientes → Servem como barreira mecânica para penetração de MO → Ex.: cascas de sementes, nozes, arroz, pele, pelos de animais, cascas ou películas de frutas .
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