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LISTA DE EXERCÍCIOS – BIOENGENHARIA 1) Num processo de fermentação conduzido em regime de bateladas, a concentração celular após a inoculação do reator era de 0,21 g/100mL. Sabe-se que inicialmente havia 0,5 g/L de etanol e que ao final da fermentação obteve-se 1,60 g/L de etanol desejado. O tempo total de processo foi de 105 horas e o tempo de preparação da dorna (limpeza, enchimento e inoculação) foi de 180 minutos. Ao final do processo a massa celular havia triplicado, pergunta-se: a) Qual a velocidade específica de crescimento do microrganismo (x), supondo-se que todo o processo tenha se passado na fase exponencial de crescimento? b) Qual o fator de rendimento de formação de produto em relação ao crescimento celular (YP/X) e a produtividade do processo fermentativo? 2) Deseja-se produzir xantana a partir da Xanthomonas campestri. Sabe-se que a cinética de formação de produto (goma Xantana) é uma produção parcialmente associada ao crescimento do microrganismo, tendfo a máxima produção durante a fase estacionária. E que curva de crescimento microbiano não apresentou fase de morte (Fase declínio da curva). Foram testadas 3 cepas e 3 meios diferentes para determinar qual será a melhor cepa para cada substrato. Determine para cada substrato a melhor cepa para se obter a maior produtividade na produção de Xantana após 3 horas de fermentação. Explique o argumento utilizado para sua resposta. 3) A partir do gráfico abaixo, responda: a) Identifique o tipo de inibição presente nas curvas 2 e 3 e explique detalhadamente seus argumentos para sua escolha. b) Determine o valor de Ki da curva com inibidor competitivo. Considere a [I] = 3,34 g/L. 4) Num processo fermentativo conduzido em batelada convencional, inoculou-se 1mL de uma suspensão de levedura contendo 1x106 UFC/mL em 10 L de mosto esterilizado. Para confirmação da concentração de células foi retirada uma amostra do mosto e feita uma y = 0,027x + 0,0072 R² = 0,9941 y = 0,038x + 0,0075 R² = 0,9993 y = 0,0555x + 0,0154 R² = 1 0 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1 /v 1/S (g/L) 2 1 Curva sem inibidor 3 contagem em câmara de Neubauer. Porém, durante a contagem não foi constatado a presença de nenhuma colônia de levedura. Sabe-se que todo procedimento foi realizado de maneira correta por um técnico qualificado. Explique o que pode ter ocorrido? 5) A fermentação do caldo de cana apresentou o seguinte comportamento em relação ao crescimento microbiano. a) Os dados do gráfico acima foi divido em 2 gráficos que representam diferentes fases no crescimento celular. A partir dos dados desses gráficos, identificar qual fase no crescimento cada gráfico representa. Explicar seu argumento para a escolha, em virtude da velocidade específica e a velocidade instantânea. Gráfico 1 Gráfico 2 6) A tabela abaixo representa os dados de concentração em função do tempo de arraste referentes ao cultivo contínuo do Penicillium chrysogenum em biorreator de bancada contendo 10 Litros de volume. Concentração (g/L) Tempo (h) 6,7 0 6,2 1,4 5,4 3,7 4,4 7,4 a) Determine o valor de mx quando a vazão do sistema foi aumentada de 1 L/h para 2 L/h. 0 10 20 30 0 10 20 30 40 50 U FC /m L Tempo Fermentação alcoolica 0,00; 0,78 4,00; 1,16 8,00; 1,72 12,00; 2,56 16,00; 3,80 20,00; 5,64 y = 0,779e0,099x R² = 1 0 1 2 3 4 5 6 0 5 10 15 20 25 U FC /m L Tempo 24,00; 7,72 28,00; 12,57 32,00; 17,41 36,00; 22,26 40,00; 27,11 y = 1,212x - 21,37 R² = 1 0 5 10 15 20 25 30 20 30 40 U FC /m L tempo 7) O experimento abaixo teve como objetivo determinar os valores de Km e Vmáx de uma nova enzima invertase para produção de açúcar invertido. Para determinação da concentração de açúcar redutor foi realizado uma curva padrão de glicose, representada pela equação y = 0,0018x com R2=0,9876, onde y corresponde a absorvância e x a quantidade de glicose em g/L. A hidrólise foi realizada à 50ºC por 10 minutos, condição pré estabelecida como ótima para ação desta enzima e a quantificação de açúcar redutor foi realizada pela análise de Somogy-Nelson. Abaixo segue as absorvâncias e as concentrações do substrato (sacarose) correspondentes. [S] g/L ABS 0,25 0,430 0,5 0,515 1 0,679 1,5 0,738 Desta forma, responda os tópicos abaixo: (Dica para resolução: Lembrem das práticas) a) À partir dos dados acima, calcule as concentrações de glicose formada e a velocidade da reação. b) À partir dos dados calculados no item a, faça um esboço do gráfico de Lineweaver-Burk e calcule os valores de Km e Vmáx. (Utilizar a equação y=0,005x+0,021) c) Comparando os valores de Km calculado para esta enzima com o valor de Km da enzima antiga utilizada no processo de de açucar invertido (Km = 0,8), determine qual é a melhor enzima para o uso no processo?
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