Aula 2 bioengenharia

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Células tronco
Oi eu sou a Emilly! Oi eu sou o John!
BioRo
Terapia Gênica para 
Epidermolise Bolhosa
Desenvolvimento de 
vacina para SARS-CoV-2
Terapia Gênica para 
Epidermolise Bolhosa
Distrófica Recessiva 
(EBDR)
Desenvolvimento de 
vacina para SARS-CoV-2
Terapia Gênica para 
Epidermolise Bolhosa
Distrófica Recessiva 
(EBDR)
Três estagiários!!!!
Doença autossômica recessiva
Deficiência do gene do colágeno VII
Como corrigir esses gene?
Devo usar células tronco?
O que o colágeno faz?
Lesão crostosa
Milium
Lesão com secreção 
esbranquiçada
Lesão bolhosa
Ausência de unhas
Hipocromia
Crostas
Corrigir o gene
Qual célula?
Nem sei por onde 
começar!
Corrigir o gene
1. Células
2. Ferramenta
3. Avaliação
A escolha da célula
Células-tronco
Auto-renovação
Diferenciação
Célula-tronco sofre mitose assimétrica
Célula-tronco sofre mitose assimétrica
Célula-tronco
Fatores de 
crescimento
Células do Nicho
8 8 8 8
Mitose assimétrica
Célula-tronco
Célula 
diferenciada
Qual outra célula do nosso organismo sofre
divisão assimétrica?
Totipotentes: células dos 
anexos embrionários e 
embrião
Embrionárias: células do 
embrião 
Adultas ou 
Somáticas: células 
do individuo
Células-tronco 
Embrionárias
Neurônios
Músculo 
esquelético
Pele
Blastocisto
(4 dias pós fertilização)Zigoto
Óvulo
Espermatozoide
1. Remoção das células da 
massa celular interna
2. Crescimento 
em cultura
3. Mudança das condições da cultura 
para diferenciar as células em diversos 
tipos celulares
Caracterização de CTE
Corpos embrióides Teratomas
Células-tronco 
adultas ou somáticas
Funções das células-tronco adultas no organismo 
• manter as células que vão morrendo no organismo ao longo 
dos anos
• reparar lesões
Quais são as células-tronco adultas?
Precursoras ou progenitoras
Sangue do cordão umbilical
Tecido adiposo (ADSC)
Medula óssea
Hematopoiéticas
Mesenquimais
dentes
Fígado
Medula 
óssea
Músculo 
esquelético
Cérebro
Pele
coração
Sangue
Vasos 
sanguíneos
Intestino
Intestino
Células-tronco da medula óssea
hematopoiética
Estroma/mesenquimal
Células-tronco adultas
Célula-tronco 
adulta
Precursores
Célula 
especializada
multipotente
Células-tronco da medula óssea
hematopoiética
Estroma/mesenquimal
Células-tronco 
hematopoieticas
Nicho de 
células-tronco
Caracterização
HSC 
Células-tronco mesenquimais
injúria
Aderência: MSC
Cultivo de medula óssea 
com remoção constante 
das células não aderentes.
Diferenciação da MSC em 
osteoblasto (10-8 M dexamethasone, 
5 mg/ml ascorbic acid 2-phosphate, 
10 mM b-glycerophosphate)
Diferenciação da MSC em 
adipócito (10-8 M dexamethasone 
and 5 mg/ml insulin)
fígado baço
timo cérebro
rins
Morfologia: similar, mas 
com algumas diferenças.
Imuno-modulação das MSC
O sangue de cordão umbilical como fonte de 
células-tronco hematopoiéticas
Vantagens:
• Disponibilidade
• Estabelecimento de bancos
• Facilidade de coleta
• Maior facilidade de expansão
• Menor risco de GVHD: - menor frequência de linfócitos T
- maior tolerância imunológica
Desvantagem:
• Volume limitado
•número de CT limitado
Células do sangue de cordão umbilical
Strem BM, Hicok KC, Zhu M, Wulur I, Alfonso Z, Schreiber RE, Fraser JK, Hedrick MH. Multipotential 
differentiation of adipose tissue-derived stem cells. Keio J Med. 2005 Sep;54(3):132-41. 
Adipose-Derived Stem Cells
MSCs de tecido adiposo
ADSC X BMSC
É possível obter uma célula pluripotente a 
partir de uma já diferenciada?
2012
E para que células-tronco???
Aplicações
Paciente
2015
7 anos
Epidermólise Bolhosa Juncional
Children’s Hospital, Alemanha
Infecção por S. aureus e P. aeruginosa
Uso de uma terapia por compaixão
Queratinócitos
Enxerto de pele
37 pacientes MSC
Transplante autólogo
18 placebo
Massa do miocárdio
LVEF = Fração de ejeção 
ventricular
6,2%
LVESV = volume 
ventricular final sistólico -7,6mL
13 mL
Terapia autóloga para Infarto 
agudo do miocárdio
CDC = células derivadas de cardioesferas
Makkar et al. Lancet. 2012
17 pacientes CDC 8 pacientes placebo
Qual célula devo usar?
Célula-tronco 
epidermal
https://www.nature.com/articles/nature24487
Corrigir o gene
1. Células
2. Ferramenta
3. Avaliação
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