Prática - Citoquímica Identificação in situ de componentes macromoleculares

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Biologia Celular: AULA PRÁTICA 2 
CITOQUÍMICA – IDENTIFICAÇÃO in situ DE COMPONENTES MACROMOLECULARES 
 
 
Objetivos Gerais 
 
Esta aula prática tem como objetivo demonstrar a identificação os 
componentes macromoleculares nas células e nos tecidos a partir de 
colorações ou testes citoquímicos. 
 
 
1) Demonstração dos fenômenos de Acidofilia e Basofilia 
 
Prepare uma Lâmina de espalhamento de células da mucosa oral e leve-a ao 
microscópio para observá-la sob lamínula. Após este procedimento, coloque 
uma gota da solução do corante Azul de Toluidina na borda da lamínula e, 
com o auxílio de um papel de filtro, remova a água e deixe, por 
capilaridade o corante entrar em contato com a célula. Observe ao 
microscópio. Prepare outra lâmina com o mesmo material de espalhamento e 
utilize agora o corante Xylidine Ponceau e faça a observação. 
 
Responda: 
1. Que tipo de macromoléculas pode ser visualizado com o primeiro 
corante? 
2. Como se chama o fenômeno citoquímico envolvido nesta reação? 
3. Em relação ao segundo procedimento, qual é o fenômeno citoquímico 
que ocorreu? Como você pode afirmar isto? 
4. Quais são os elementos químicos que se coraram? 
5. Esquematize todas as observações em objetiva de 40X. 
 
2) Técnica rotineira de coloração histológica: Hematoxilina-Eosina (HE)em 
Intestino Delgado 
 
Cada aluno receberá uma lâmina permanente corada pela técnica da 
hematoxilina-eosina. Caberá ao aluno esquematizar o observado. 
 
 
 
 
 
 
Responda: 
1. Quais os procedimentos básicos para a obtenção de uma lâmina 
permanente? Descreva a função dos principais passos do processamento 
histológico. 
2. A hematoxilina pode ser considerada um corante catiônico? Por quê? 
3. A eosina pode ser considerada um corante aniônico? Por quê? 
 
3) Técnicas citoquímicas para identificação de DNA e polissacarídeos 
 
 
Lâmina 1. Reação de Feulgen em glândula salivar de Drosophila. 
Nesta lâmina o material foi preparado por esmagamento. Serão observadas 
células da glândula salivar de Drosophila, onde os núcleos estão corados 
intensamente em púrpura. Esquematize-os. 
 
Responda: 
1. Qual o princípio da Reação de Feulgen? 
2. Por que os núcleos se coram? 
 
Lâmina 2. Teste do P.A.S. – Periodic Acid & Schiff 
: Neste preparado o aluno observará um corte histológico de intestino, 
corado pelo teste do PAS. Nesta lâmina podemos observar as células 
caliciformes, a superfície celular e a membrana basal das células 
epiteliais. Esquematize-os. 
 
Responda: 
1. O que existe de comum entre esta técnica e a anterior? 
2. Quais os componentes evidenciados? Por quê? 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Nome:_____________________________________________________Turma:_________ 
 
Título da aula: _____________________________________________________________ 
As observações deverão ser esquematizadas nesta folha: (Fazer quantas cópias forem necessárias) 
 
 
Material: ___________________________ 
Coloração: _________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Aumento: _______________ 
 
 
 
 Material: ___________________________ 
 Coloração: _________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Aumento: _______________ 
 
Material: ___________________________ 
Coloração: __________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Aumento: ___________ 
 Material: ___________________________ 
 Coloração:__________________________ 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 Aumento: _______________