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Cocos Gram positivos de interesse médico Gênero Staphylococcus S. aureus S. epidermidis S. saprophyticcus Gênero Streptococcus S. pyogenes S. agalactiae S. pneumoniae S. grupo viridans Gênero Enterococcus Gênero Micrococcus Gênero Staphylococcus Apresenta arranjos e motilidade. Identificação primária: prova da catalase- positiva. - Com borbulha. Possui cerca de 1 micrômetro de diâmetro. Apresenta crescimento rápido em condições aeróbicas ou microaerófilas. São anaeróbios facultativos COR Varia do branco ao amarelo: colônias de S. aureus são acinzentadas a amarelo dourado intenso colonias de S. epidermidis apresentam coloração de cinza a branca. CARACTERISTICAS GERAIS Sensibilidade variável a muitos agentes antimicrobianos, produção de B-lactamases, resistência à meticilina e oxacilina.. Staphylococcus aureus Causam infecções agudas- invasão direta e destruição tecidual. Podem ser: PRIMÁRIAS: desenvolimento do micro- organismo na porta de entrada. Ex: celulite, infecções pós cirúrgicas, piodermites, abscessos. SECUNDÁRIAS: por disseminação hematogênica ou linfática- EX: enterocolite, meningite, endorcadite, septicemia, osteomielite,etc. TOXEMIAS: manifestações clinicas decorrentes da ação de toxinas, ex: síndrome da pele escaldada, síndrome do choque tóxico, intoxicação alimentar estafilocócica.. Doenças: produz pústulas, abcessos, furúnculos, causa: impetigo, artrite, cistite, meningite, osteomielite, intoxicação alimentar,etc. Sítios de infecção: orofaringe, urina, sangue, feridas cirúrgicas, ponta de cateter, dreno, abcessos, furúnculos,etc. Habitat normal: Pele, especialmente nariz e períneo. Transmissão: contato e vias aéreas Tratamento: penicilinas beta-lactamases estáveis; associação de; oxacilina+ clindamicina ou vancomicina + clindamicina ( se for resistente a oxacilina). ENZIMAS EXTRACELULARES • Coagulase- semelhante a protrombina, é capaz de transformar o fibrinogênio em fibrina- resistência a opsonização e a fagocitose. • Catalase- conversão do peróxido de hidrogênio em água e oxigênio. • Nucleases´hidrólise do DNA e RNA. • Estafiloquinase- possui ação semelhante a estreptoquinase, resultando em fibrinólise- facilitam a disseminação da infecção para os tecidos adjacentes • B-lactamases- hidrolisa o anel beta lactâmico. • Hialuronidase- despolimeriza o ácido hialurônico existente nos espaços intercelulares, que diminuindo a viscosidade, possibilita a difusão do micro-organismo ou de suas toxinas. S. aureus- doenças relacionadas a toxinas: INTOXICAÇÃO ALIMENTAR A intoxicação alimentar estafilocócica é caracterizada por náuseas, vomito, dores abdominais e diarreia, e por um curto tempo de incubação, de 1 a 6 horas após a ingestão do alimento contaminado. Importância: termoestáveis a 100 ° C por 30 minutos; resistentes a hidrólise por enzimas gástricas. Síndrome do choque tóxico Ocorre em uso de tampões (principalmente), uso de barreiras contraceptivas, mordidas de insetos, queimaduras, piodermites,etc. Única toxina capaz de passar através de mucosas. Sinais e sintomas: vômitos e diarreia, plaquetopenia, mialgia severa, hiperemiia vaginal, desorientação, etc. . Envolve 3 ou mais sistemas: gastrointestinal, muscular, mucosa, renal, hepático, hematológico, sistema nervoso central. Toxina esfoliativa As toxinas esfoliativas A,B e D causam eritema cutâneo que em conjunto ou isolamento estão DOENÇAS Intoxicação alimentar estafilocócica- Síndrome do choque tóxico Síndrome da pele escaldada e impetigo bolhoso TOXINAS Enterotoxina Toxina da SST Toxina esfoliativa implicados na síndrome da pele escaldada. A forma bolhosa ( impetigo bolhoso), acomete geralmente membros superiores e inferiores podendo também aparecer em nádegas e tronco, não costuma acometer a face. Identificação laboratorial Cocos gram positivos arranjados em cachos. Cor: amarelo dourado Hemolisina: positiva para algumas cepas Catalase: positiva decompõe o peróxido de hidrogênio em água e oxigênio. - Formação de bolhas pela presença de oxigênio. formação de bolhas indica ser a família Staphylococcus spp, mcrococcus spp.) sem formação de bolhas (reação negativa) - indica ser a família Streptococcaceae( ex: (Enterococcus spp, Streptococcus spp ) OBSERVAÇÃO: cuidado ao retirar colônias crescidas em ágar sangue porque os fragmentos podem se misturar com as colônias e produzir um resultado falso-positivo. Coagulase positiva: proteína capaz de converter o fibrinogênio em fibrina. Podem ser encontradas em duas formasa: 1. Coagulase fixa ou ligada ou conjugada- verifica-se se o micro- organismo possui a coagulase na superfície da parede celular- o teste positivo ocorre dentro de 15-20 segundos, e deve ser considerado negativo após 2-3 minutos. Positivo- formação de grumos 2. Coagulase livre- é secretada extracelularmente e reage com uma substância presente no plasma (fator de reação da coagulase- CRF) para formar um complexo que reage com o fibrinogênio, formando fibrina. Teste de aglutinação com látex- detectam o fator de agregação e a proteína A. Esse teste se baseia na aglutinação simultânea da coagulase e da proteína A com as partículas róseas de látex. Manitol: positivo- meio ágar manitol salgado- uma viragem do vermelho original do meio para o amarelo- indica degradação do manitol com formação de ácido. - Indicador: vermelho de fenol. DNase: POSITIVO- meio ágar DNase- a enzima desoxiribonuclease irá degradar o ácido nucléico ( DNA). Prova positiva- zona clara ao redor do crescimento bacteriano (o revelador é o ácido clorídrico 1 Normal) Staphylococcus epidermidis Doenças: patógeno oportunista associado com sepse de dispositivos (cateteres e prótese) e o mais frequente encontrado em hemocultura. Habitat normal: pele Transmissão: por contato Tratamento: frequentemente são multirresistentes (penicilinas), susceptível a novobiocina e polimixina. Identificação laboratorial Cocos gram-positivos arranjados em cachos Cor: branca Catalase: positiva Coagulase: negativa Manitol: negativo Dnase: negativo Staplhylococcus saprophyticcus Doenças: infecções do trato urinário Habitat: pele e mucosa geniturinária Transmissão: disseminação endógena para o trato urinário. Tratamento: resistentes ao ácido nalidíxico e novobiocina. Identificação laboratorial cor: branca Catalase: positiva Coagulase: negativa Manitol: negativo Dnase: negativo Novobiocina resistente- são utilizados discos padronizados contendo 5 microgramas de novobiocina. A leitura é feita medindo-se o diâmetro do halo de inibição ao redor do disco após incubação de 18-24 horas. PROVA POSITIVA: (resistência)- quando o halo for menor ou igual a 14 mm FIXAÇÃO: identificação e diferenciação das espécies de Staphylococcus. Espéc. hemolisina novobiocina manitol polimixina Dnase coagulase catalase S. aureus + sensível + Sensível + + + S .epidermidis _ sensível _ sensível _ _ + S. saprophyticus _ resistente 11,89% resistente _ _ + Apenas pela prova da catalase não é possível identificar a espécie de Staphylococcus, pois nas três espécies o resultado é positivo. Fazendo a prova da coagulase, será possível identificar a S. aureus, pois é a única das três que é positiva. As espécies S. epidermidis e S. saprophhyticus são Dnase , hemolisina e coagulase negativas. O manitol é negativo apenas no S .epidermidis, pois no saprophyticus é 11,89% positivo. A espécie S. saprophitycus é a única resistente à novobiocina e polimixina..
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