Relatório AAS

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS 
INSTITUTO DE QUÍMICA 
LICENCIATURA EM QUÍMICA 
 
 
 
 
Prática 4 
Determinação espectrofotométrica de ácido acetilsalicílico em medicamento 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Alunos: Guilherme Augusto 
 Matheus Alves de Souza 
Matheus Pereira Gavião do Carmo 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Alfenas, MG 
2021 
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Sumário 
1. INTRODUÇÃO ........................................................................................................ 3 
2. OBJETIVO ................................................................................................................ 3 
3. MATERIAIS ............................................................................................................. 4 
4. MÉTODOS - PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL ............................................. 4 
4.1. Reagente de Trinder............................................................................................... 4 
4.2. Solução padrão estoque de salicilato 2g L-1 ......................................................... 4 
4.3. Preparo dos padrões ............................................................................................... 4 
4.4. Preparo da amostra ................................................................................................ 5 
5. RESULTADO E DISCUSSÕES ............................................................................... 5 
6. CONCLUSÃO ........................................................................................................ 16 
7. REFERÊNCIAS ...................................................................................................... 17 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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1. INTRODUÇÃO 
O ácido acetilsalicílico (AAS) é um fármaco, com ação anti-inflamatório não 
esteroide, da família dos salicilatos popularmente conhecido como Aspirina®. É utilizado 
para o alívio de cefaleia, da inflamação e da febre, apresenta também propriedades 
antirreumáticas, analgésicas e anticoagulantes (SILVA e BARRETO, 2013). 
Diferentes métodos analíticos são descritos na literatura para a quantificação do AAS 
como espectrofotométrico, espectrofluorimétrico, cromatográfico, potenciométrico e 
voltamétrico. A técnica espectrofotométrica é amplamente utilizada na detecção e 
quantificação de fármacos, é um método rápido, de baixo custo operacional e de 
resultados confiáveis (GOES et al, 2019). 
Os métodos espectrofotométricos tomam como base a medida da intensidade de 
radiação luminosa, em um espectro de emissão ou de absorção. Trata-se de uma análise 
colorimétrica em uma faixa de luz visível, entre o ultravioleta e o infravermelho, com 
comprimento de onda entre 380 e 780 nm (Silva et al, 2006). 
O controle de qualidade é de suma importância na indústria farmacêutica, as medições 
analíticas garantem um produto seguro e eficaz. Cada vez mais é importante que os 
estudos experimentais forneçam resultados de qualidade e confiáveis, para quantificar 
uma espécie química e garantir que os fármacos atendam às exigências necessárias 
(GOES et al, 2019). 
O descumprimento das exigências da qualidade do medicamento pode causar sérias 
implicações no tratamento, pode acarretar falta de eficácia devido a subdosagem e efeitos 
tóxicos em superdoses, a qualidade de um medicamento não diz respeito apenas ao cunho 
comercial (SILVA e BARRETO, 2013). 
 
2. OBJETIVO 
• Construção da curva analítica para a determinação de ácido acetilsalicílico 
no comprimido; 
• Determinação das concentrações das amostras. 
 
 
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3. MATERIAIS 
• Balões volumétrico de 50, 100 e 200 mL; 
• Pipetas volumétricas de 1, 5, 10 e 15 mL; 
• Pipetas graduadas de 5 e 10 mL; 
• Béqueres; 
• Papel indicador de pH; 
• Cubeta de acrílico; 
• Espectrofotômetro; 
• Solução padrão estoque de salicilato de sódio (HOC 6H4CO2Na) 2 g L-1; 
• Reagente de Trinder ([Fe(NO3).9H2O]) 40 g L-1; 
• Hidróxido de sódio 0,5 mol L-1; 
• Ácido clorídrico 0,5 mol L-1. 
 
4. MÉTODOS - PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 
4.1.Reagente de Trinder 
No início do experimento fomos informados pela professora que o reagente 
Trinder já estava preparado e pronto para o uso. 
 
4.2.Solução padrão estoque de salicilato 2g L-1 
Solução já preparada antes da aula pela técnica do laboratório. 
 
4.3.Preparo dos padrões 
Os padrões utilizados nesta prática foram preparados pelo colega de laboratório 
Yan, a partir da solução estoque de salicilato de sódio 2,0 g L -1, na qual 
foram realizadas pipetagens de 1,25; 2,5; 5,0; 7,5; 10,0 e 12,5 mL em 
balões volumétricos de 50 mL de modo a ficar com concentrações de 5, 
10, 20, 30, 40 e 50 mg de ácido salicílico por 100 mL de água destilada. 
Para a leitura, em béqueres, foi pipetado 1,0 mL de cada solução padrão, da menos 
concentrada para a mais concentrada, 4,0 mL de água destilada e 10,0 mL 
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do reagente Trinder. Para o branco foi adicionado a um béquer 5,0 mL de água 
destilada e 10,0 mL do reagente Trinder apenas. 
4.4.Preparo da amostra 
Dois comprimidos de acetilsalicílico 500 mg foram pesados, individualmente 
e dissolvidos em NaOH 0,5 M em um béquer. A solução foi aquecida em banho-
maria, por aproximadamente 60 min, até a redução da metade do seu volume. A 
amostra ficou na bancada, até atingir a temperatura ambiente, e em seguida, neutralizada 
com HCl 0,5 M, na qual foi medido com uma fita de pH. 
Transferido para um balão volumétrico de 200 mL e completado com água 
destilada, aferindo o menisco (solução 1). Dessa mistura, com auxílio de uma pipeta 
graduada, foram transferidos 15,0 mL para um balão volumétrico de 100 mL 
e completado com água destilada até o menisco (solução 2). Para a leitura 
foi pipetado 1,0 mL da solução 2 em um béquer, 4,0 mL de água destilada e 10,0 mL do 
reagente Trinder. 
Após o preparo de todas as soluções foi realizada a leitura no equipamento em 
triplicata no espectrofotômetro UV-Vis, em absorbância, ajustado no comprimento de 
onda de 540 nm. A calibração foi realizada com 10 leituras do branco. 
 
5. RESULTADO E DISCUSSÕES 
Para análise da determinação de ácido acetilsalicílico por meio de técnicas 
espectrofotométricas, pode-se utilizar o comprimento de onda na região do ultravioleta, 
onde se enquadra na região de (200 a 400 nm). No entanto, essa técnica, pode ser ineficaz 
para esse procedimento, visto que, várias outras moléculas contidas no comprimido, 
também podem absorver a radiação nesse mesmo comprimento de onda. 
Uma forma de minimizar erros e efetuar a análise do fármaco, é a utilização de um 
agente cromogênico, causando a formação de um complexo com condições necessárias, 
coloração específica, propiciando a sua melhor quantificação. 
Para análise no espectrofotômetro, foi preciso reagir o acetilsalicílico, com NaOH, 
reação de hidrólise, transformando em salicilato, onde esse mesmo complexará com o 
Fe³+ presente no reagente Trinder. Isso pode ser explicado, devido ao mecanismo de 
reação, onde, ocorre o “ataque” da hidroxila na carbonila, indicado abaixo, no mecanismo 
de reação. A análise se torna viável, tendo a reação completa, onde o resultado é um 
composto de cor intensa. 
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 O AAS com íons Fe 3+ forma um complexo onde o ácido atua como um ligante bi 
dentado, essa reação é seletiva uma vez que outros constituintes analgésicos não reagem 
nessas condições, impedindo interferências. 
Figura 1: Mecanismo de reação de hidrólise sofrida pelo ácido acetilsalicílico na 
presença de NaOH. 
 
 
Figura 2: Reação de complexação do salicilado com Fe³+ presente no reagente 
Trinder. Fonte: SÁ, 2006 
Um possível erro na análise, é a seleção falha da água como branco, pois a 
utilização do branco comreagente Trinder, faz com que possíveis erros sejam 
minimizados, assim como possíveis interferências químicas, espectrais. Utilizando o 
branco, corretamente, havendo uma matriz muito próxima da amostra, com exceção do 
analito, reduz o risco de erros. 
Após as leituras dos padrões e do branco é necessário a construção da curva 
analítica. 
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Tabela 1:Valores dos padrões em mgL-1 e suas respectivas médias de absorbância. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Gráfico 1: Curva de calibração – Ácido Salicílico. Fonte: Própria 
Com a construção da curva analítica, temos que a equação da reta e o valor do 
coeficiente de determinação R², de 0,9901, sendo então, possível analisar se os dados se 
ajustam de forma adequada ao modelo linear. A linearidade dos dados, permite uma maior 
exatidão para a determinação da concentração da amostra de interesse. 
Após a construção da curva de calibração, média da absorbância dos padrões, fez 
se a medida em triplicata das soluções amostrais, para determinação do salicilato. 
 
 
 
y = 0,0091x - 0,0407
R² = 0,9901
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0,4
0,45
0 10 20 30 40 50 60
A
b
so
rb
ân
ci
a
Concentração em mgL-1
Curva de calibração - Ácido Salicílico
Concentração dos padrões em mgL-1 
Média das 
ABS 
5 0,029 
10 0,04 
20 0,122 
30 0,222 
40 0,331 
50 0,42 
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Tabela 2: Valores de absorbância para amostra 1 e média 
 
 
 
 
 
Tabela 3: Valores de absorbância para amostra 2 e média 
 
 
 
 
 
Com os valores de absorbância das amostras, utilizou-se a equação da reta para 
determinação da concentração de ácido salicílico, demonstrado abaixo, na equação 1: 
 Y= 0,0091 X – 0,0407 (Eq.1) 
Y= Absorbância da amostra 
X= Concentração 
Amostra 1: 
0,180 = 0,0091 X - 0,0407 
X = 24,252 mgL-1 
Amostra 
1 Absorbância 
1° 0,18 
2° 0,18 
3° 0,18 
média 0,18 
Amostra 
2 Absorbância 
1° 0,255 
2° 0,255 
3° 0,255 
média 0,255 
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Fazendo os mesmos cálculos para a amostra 2, vamos obter o seguinte resultado: 
Amostra 2: 
0,255 = 0,0091 X – 0,0407 
X = 32,494 mgL-1 
 
Os resultados obtidos não são os valores finais de interesse, pois faz-se necessário 
a consideração dos fatores de diluição feitos na amostra. 
Para o cálculo do fator diluição utiliza-se a seguinte fórmula (Eq.2): 
Fd = VF/VI (Eq.2) 
 Portanto, realizando os cálculos, vamos obter o seguinte resultado para amostra 1: 
Fd = 100mL /15 mL 
Fd = 6,66 
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Para amostra 1, realiza-se o seguinte cálculo: 
24,252 mg/100mL x 6,66 = 161,52 mg/100 mL. 
Em seguida, utiliza-se a seguinte fórmula (Eq.3): 
C1.V1 = C2.V2 
Calculando: 
161,52 x 100mL = C2 x 200mL 
C2 = 323,04 mg/200mL Ácido Salicílico 
Utilizando a Massa Molar dos compostos: 
MM Ác. Salicílico: 138,123 g/mol 
MM Ác. Acetilsalicílico: 180,158 g/mol 
Fazendo a regra de 3: 
323,04 mg ________138,123 g 
 X ________ 180, 158 g 
X = 421,35 g de AAS. 
 
 
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Fazendo os mesmos cálculos para a amostra 2, vamos obter o seguinte resultado: 
X = 564,54 g de ASS 
 
Tabela 4: Valores em mg de Ác. Salicílico e Ác. Acetilsalicílico das amostras 
 
Massa (mg) Ácido 
Salicílico 
Massa (mg) Ácido 
Acetilsalicílico 
Amostra 
1 323,04 421,35 
Amostra 
2 432,82 564,54 
 
Observa-se que em um dos comprimidos a quantidade em (miligramas) de 
acetilsalicílico ultrapassa a quantidade estabelecida pelo fabricante, isso indica que 
possíveis erros durante análise ou até mesmo no comprimido foram identificados, com 
isso necessita-se que calcularmos o erro relativo. 
Para calcularmos o erro relativo, utilizamos da seguinte fórmula: 
Erro = E exp – E teórico/ E teórico x 100 
 
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Dessa forma, obtemos para a amostra 1: 
Erro = - 15,73% 
 
E para a amostra 2: 
Erro = 12,98% 
 
Os erros encontrados podem ser justificados, por erros aleatórios e sistemáticos 
no momento da realização do experimento ou até mesmo, no medicamento que pode estar 
com seu princípio ativo incompatível com o previsto. 
Após a construção da curva de calibração e a realização dos cálculos para 
obtenção das concentrações, realiza-se o cálculo das figuras de mérito. 
Faixa Dinâmica Linear: 
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A faixa dinâmica linear, também conhecida como equação da reta, pode ser 
calculada tanto no software Excel como na calculadora científica. Neste relatório, 
utilizaremos a equação fornecida pelo Excel, que é: 
Y= 0,0091 X – 0,0407 
Coeficiente de Correlação: 
O coeficiente de correlação indica o quanto os dados estão relacionados entre si. 
Nesta prática, obtivemos um coeficiente de correlação de 0,9901. Uma vez que, quanto 
mais próximo de 1 mais relação os dados tem entre si, podemos afirmar que os dados 
obtidos na prática estão bastante relacionados entre si. 
Sensibilidade: 
A sensibilidade, nada mais é do que o coeficiente angular da reta e demonstra a 
variação do sinal em função da concentração do analito. O valor de sensibilidade que 
achamos foi de 0,0091. 
Ruído: 
Durante o procedimento experimental, fez-se a leitura do branco, possibilitando calcular 
o ruído. Os resultados estão apresentados na tabela abaixo. 
Tabela 5: Valores de leitura do branco e suas respectivas absorbâncias. 
 
 
 
 
 
 
 
 
Branco Absorbância 
1 0 
2 0 
3 0 
4 0 
5 0,002 
6 0 
7 0 
8 0 
9 0,001 
10 0 
 
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A partir dos valores dos sinais, podemos calcular o desvio padrão do ruído, que 
será necessário para o cálculo do LD e do LQ. O cálculo foi realizado na calculadora 
científica e resultou em um valor de 0,000674949. 
Limite de Detecção (LD): 
Segundo Skoog (2006), o limite de detecção é a menor concentração que pode ser 
distinguida com um certo nível de confiança. A fórmula para o cálculo da LD é a seguinte: 
LD = 
𝐾𝑆
𝑚
 
onde k é o fator de confiança, S é o desvio padrão do branco e m é a sensibilidade de 
calibração (ou coeficiente angular da reta). O valor obtido ao substituir os valores e sendo 
k=2, foi de 0,14, e para k=3 foi de 0,22. 
 
Limite de Quantificação (LQ): 
É a menor concentração que um método pode quantificar com um certo nível de 
confiança. A fórmula para o cálculo de LQ é a seguinte: 
LQ = 
10𝑆
𝑚
 
onde S é o desvio padrão do branco e m é o coeficiente angular da reta. Substituindo os 
valores temos um resultado de 0,741. 
 
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6. CONCLUSÃO 
Podemos concluir, a partir dos resultados obtidos que ambas as amostras se 
mostraram dentro do limite permitido para variação. A amostra 1 apresentou um valor 
menor do que o esperado e a amostra 2 um valor a cima, mas ambas com diferença menor 
do que 20%. 
As diferenças encontradas podem ter ocorrido devido a possíveis erros aleatórios e 
sistemáticos no momento da realização do experimento ou o medicamento pode estar com 
seu principio ativo incompatível com o previsto. 
O método utilizado para o experimento condiz com a literatura, por se tratar de um 
método preciso, barato e de simples realização, os resultados foram condizentes com o 
informado pelo fabricante do comprimido. O método se mostrou eficaz para indicar a 
quantidade de Ácido Acetilsalicílico no comprimido, deixando claro, que se precisa de 
mais análises, com outros métodos experimentais, ou repetições do método em questão, 
para melhores conclusões. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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7. REFERÊNCIAS 
 
DA SILVA, Antonio Jacy Barreto; BARRETO, Juliano Gomes. Determinação de teor de 
princípio ativo em comprimidos de ácido acetilsalicílico. Acta Biomédica Brasiliensia, v. 
4, n. 1, p. 103-113, 2013. 
 
GOES, Enock José A. et al. Validação de método espectrofotométrico de análise para 
a quantificação de ácido acetilsalicílico em formulações farmacêuticas: uma 
proposta de aula experimental para análise instrumental. Química Nova , v. 42, p. 
99-104, 2019. 
 
SA, Eder da Silva e et al. Determinação espectrofotométrica de ácidosalicílico em 
produtos dermatológicos. 2006. 
 
SKOOG, D. A.; HOLLER, F. J.; NIEMAN, T. A. Princípios de análise instrumental. 5ª 
ed. Porto Alegre: Bookman, 2006.