Determinação espectrofotométrica de hidroquinona em solução relatório

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA 
SETOR DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS E DA SAÚDE 
DEPARTAMENTO DE FARMÁCIA 
CURSO DE FARMÁCIA 
 
 
 
 
ANDRESSA MELO 
JULIA BUENO 
LUÍZA RIBEIRO 
TAINÁ KRYK 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
DETERMINAÇÃO ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIDROQUINONA EM 
SOLUÇÃO 
 
 
 
 
 
 
PONTA GROSSA 
2022 
 
 
ANDRESSA MELO 
JULIA BUENO 
LUÍZA RIBEIRO 
TAINÁ KRYK 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
DETERMINAÇÃO ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIDROQUINONA EM 
SOLUÇÃO 
 
 
 
Trabalho apresentado como 
requisito parcial à obtenção do 
título de graduando na 
Universidade Estadual de Ponta 
Grossa, Área de Ciências 
Biológicas e da Saúde, do curso 
de Farmácia. 
 
Prof. Sandra Stets 
 
 
 
 
PONTA GROSSA 
2022 
 
 
DETERMINAÇÃO ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIDROQUINONA EM 
SOLUÇÃO 
1. Introdução 
A hidroquinona ou 1,4-Benzenediol é um composto derivado do fenol, que 
contém dois grupos hidroxila ligados a um anel benzênico, na posição para, em 
sua estrutura química. No ambiente, é encontrada na forma de cristais finos e 
brancos, que devem ser armazenados em recipientes hermeticamente 
fechados, protegidos do ar, uma vez que sofre fácil oxidação se tornando 
escuros (FARMACOPÉIA BRASILEIRA, 2010). 
 
Figura 1. Fórmula estrutural da Hidroquinona 
 
A hidroquinona (C6H6O2) é um composto muito utilizado na indústria 
farmacêutica na manipulação de pomadas, cremes e géis durante o tratamento 
de hiperpigmentações cutâneas, e associado com outros ácidos pode trazer 
resultados muito satisfatórios. Ela é capaz de atuar nas células produtoras de 
melanina, bloqueando a produção e aumentando a degradação das células 
responsáveis pelo armazenamento de melanina, os melanossomos. 
 
 
 
 
 
Figura 2. Fórmula estrutural da Orto-Fenantrolina 
 
Já a Orto-Fenantrolina (C12H8N2) é um ligante quelato aromático de nitrogênio 
que forma complexos com metais de baixo número de oxidação. Quando este 
 
 
metal se trata do Fe2+, forma-se um complexo de cor vermelho-alaranjado. Na 
temperatura ambiente se apresenta na forma monohidratada como um sólido 
branco inodoro. 
O procedimento é baseado na reação de oxidação da molécula de 
hidroquinona e redução do ferro (III) para ferro (II) em meio ácido (pH=3), e 
posterior reação do ferro (II) gerado com 1,10-fenantrolina, formando um 
composto colorido, capaz de ser identificado no espectrofotômetro em 510 nm. 
 
Figura 3. Reação de oxidação de hidroquinona na presença de Fe (III) em tampão Clark-Lubs, 
resultando no produto p-quinona e formação de um complexo entre o Fe (II) e 1,10-fenantrolina 
 
A técnica Uv-Vis é uma técnica comumente utilizada nos laboratórios devido 
sua alta sensibilidade, baixo custo e simplicidade operacional. Assim, no 
presente estudo foi analisado a curva de calibração da hidroquinona na 
presença de Fe (III) reduzindo para Fe (II) e posterior formação de um 
complexo com 1,10-fenantrolina em tampão Clark-Lubs. 
 
 2. Objetivos: 
Preparar soluções de Cloreto de Ferro (III), Hidroquinona, Orto-Fenantrolina e 
solução tampão Clark-Lubs, a fim de determinar a colorimetria de Hidroquinona 
na espectroscopia UV-Vis. 
Plotar um gráfico de absorbância (eixo y) em função da concentração de 
Hidroquinona (eixo x), a fim de determinar a equação da reta e a curva 
analítica. 
 
 
 
3. Procedimento experimental: 
Materiais utilizados 
 
 1 pipeta 5 mL 
 2 balões volumétricos 100 mL 
 2 balões volumétricos 50 mL 
 2 copos de béquer 50 mL 
 3 copos de béquer 100 mL 
 4 espátulas 
 5 pipetas de pasteur 
 Marcador para quadro branco 
 Micropipeta de volume variável 
 Micropipeta de volume fixo 
(1000 uL) 
 Pera 
 Pipeta volumétrica (2 mL) 
 
 
Reagentes e equipamentos utilizados 
 Água destilada 
 Álcool Etílico 
 Balança analítica 
 Cloreto de Ferro III 
(FeCl36H2O) 
 Cloreto de Potássio (KCl) 
 Espectrofotômetro 
 Hidroquinona (C6H6O2) 
 Orto-Fenantrolina (C12H8N2) 
 pHmetro 
 Solução de Ácido Clorídrico 
0,1 mol/L (HCl) 
 
Preparação da solução de Cloreto de Ferro (III) 
1. Pesou-se 0,2737 g de FeCl36H2O em uma balança analítica, com o 
auxílio de uma espátula e um copo de béquer de 100 mL. 
2. Adicionou-se aproximadamente 20 mL de água destilada no béquer 
contendo o FeCl36H2O. 
3. Agitou-se a solução em movimentos circulares, mantendo o fundo no 
béquer apoiado na bancada. 
4. Transferiu-se a solução para o balão volumétrico de 100 mL previamente 
identificado com o nome da solução (Cloreto de Ferro III) e sua 
concentração (0,01012 mol/L). 
 
 
5. Adicionou-se mais água no copo de béquer, agitou-se e transferiu-se ao 
balão volumétrico novamente. O procedimento repetiu-se até o volume 
aproximar-se do menisco. 
6. Acertou-se e conferiu-se o menisco com o auxílio de uma pipeta de 
Pasteur contendo água destilada. 
7. Verificou-se a vedação do balão volumétrico, segurando-o pela tampa. 
8. Agitou-se a solução. 
 
Preparação da solução de Hidroquinona 
1. Pesou-se 0,056 g de Hidroquinona em uma balança analítica, com o 
auxílio de uma espátula e um copo de béquer de 50 mL. 
2. Adicionou-se aproximadamente 10 mL de água destilada no béquer 
contendo a Hidroquinona. 
3. Agitou-se a solução em movimentos circulares, mantendo o fundo no 
béquer apoiado na bancada. 
4. Transferiu-se a solução para o balão volumétrico de 50 mL previamente 
identificado com o nome da solução (Hidroquinona) e sua concentração 
(1.10-3 mol/L). 
5. Adicionou-se mais água no copo de béquer, agitou-se e transferiu-se ao 
balão volumétrico novamente. 
6. Acertou-se e conferiu-se o menisco com o auxílio de uma pipeta de 
Pasteur contendo água destilada. 
7. Verificou-se a vedação do balão volumétrico, segurando-o pela tampa. 
8. Agitou-se a solução. 
 
Preparação da solução de Orto-Fenantrolina 
1. Pesou-se 0,03985 g de Orto-Fenantrolina em uma balança analítica, 
com o auxílio de uma espátula e um copo de béquer de 50 mL. 
2. Com o auxílio de uma pipeta de 5 mL e pera, adicionou-se 5 mL de 
álcool etílico no béquer contendo a Orto-Fenantrolina. 
3. Agitou-se a solução em movimentos circulares, mantendo o fundo no 
béquer apoiado na bancada. 
4. Transferiu-se a solução para o balão volumétrico de 50 mL já 
 
 
previamente identificado com o nome da solução (O-Fen) e sua 
concentração (4.10-3 mol/L). 
5. Adicionou-se água no copo de béquer, agitou-se e transferiu-se ao 
balão volumétrico novamente. O procedimento repetiu-se até o volume 
aproximar-se do menisco, que foi acertado e conferido. 
6. Verificou-se a vedação do balão volumétrico, segurando-o pela tampa. 
7. Agitou-se a solução. 
 
Preparação do Tampão Clark-Lubs 
1. Pesou-se 0,0080 g de KCl em uma balança analítica, com o auxílio de 
uma espátula e um copo de béquer de 100 mL. 
2. Adicionou-se aproximadamente 20 mL de água destilada no béquer 
contendo o KCl. 
3. Agitou-se a solução em movimentos circulares, mantendo o fundo no 
béquer apoiado na bancada. 
4. Transferiu-se a solução para o balão volumétrico de 100 mL. 
5. Adicionou-se mais água no copo de béquer, agitou-se e transferiu-se ao 
balão volumétrico novamente. O procedimento repetiu-se até o volume 
aproximar-se do menisco, que foi acertado e conferido. 
6. Verificou-se a vedação do balão volumétrico, segurando-o pela tampa. 
7. Agitou-se a solução. 
8. Obteve-se uma solução aquosa de KCl 1.10-3 mol/L 
9. Transferiu-se a solução para um novo copo de béquer de 100 mL. 
10. Mediu-se o pH com o auxílio do pHmetro. 
11. Com o auxílio de uma pipeta de Pasteur, adicionou-se gotas de HCl 0,1 
mol/L na solução de KCl. 
12. Mediu-se o pH da solução novamente, com o auxílio do pHmetro. 
13. Adicionaram-se mais gotas de HCL 0,1 mol/L a solução atingir pH 3. 
14. Transferiu-se a solução tampão ao mesmo balão volumétrico utilizado 
para a solução de KCl 
15. Com o auxílio do marcador para quadro banco, identificou-se o balão 
com o nome da solução(Tampão Clark-Lubs) 
 
 
 
Preparação das Soluções para a Curva de Calibração 
1. Identificou-se, de 1 a 5, balões volumétricos de 10 ml. O sexto balão foi 
identificado como branco. 
2. Com o auxílio de uma pipeta e pera, adicionou-se 2 mL do Tampão 
Clark-Lubs em todos os tubos. 
3. Com uma micropipeta de volume variável, adicionou-se as seguintes 
quantidades da solução de hidroquinona 1.10-3 mol/L. 
Tabela 1. Volumes da solução de hidroquinona 1.10
-3
 mol/L adicionados a cada balão 
volumétrico de 10 mL, a fim de obter-se uma nova concentração desejada. 
 
4. Com o auxílio de uma micropipeta de volume fixo, adicionou-se 1000 uL 
das soluções de O-Fen 4.10-3 mol/L e Cloreto de Ferro (III) 0,01012 
mol/L, em todos os balões volumétricos. 
5. Realizou-se a leitura das soluções no espectrofotômetro UV-Vis 
calibrado a 511 nm. 
 
BALÃO [HQ] VOLUME 
Branco 0 0 
1 1.10-5 100 µl 
2 2.10-5 200 µl 
3 3.10-5 300 µl 
4 4.10-5 400 µl 
5 5.10-5 500 µl 
 
 
4. Resultados e discussão: 
Na figura 4, temos a formação de compostos coloridos dados pela oxidação de 
hidroquinona na presença de Fe (III) em tampão Clark-Lubs. Pode-se observar 
que os tubos do lado direito apresentam maior intensidade em sua coloração 
alaranjada devido ao aumento gradativo da concentração utilizada no 
experimento, o tubo da esquerda (tubo branco) apresenta todos os reagentes 
exceto a solução de hidroquinona, por isso é usado como controle, é o primeiro 
tubo colocado no equipamento para garantir melhor leitura dos tubos seguintes 
e assim ser o tubo padrão. 
 
Figura 4. Reações colorimétricas 
Após o preparo das soluções, descrito no processo experimental, realizou-se a 
leitura da Absorbância das soluções com concentrações diferentes da 
substância com isso obtivemos os resultados demonstrados na tabela 2: 
Tabela 2. Concentrações e Absorbâncias lidas no espectrofotômetro 
 
Com essa leitura foi possível plotar uma curva analítica com o programa Excel, 
essa curva é dada pelos valores de absorbância e concentração, o gráfico se 
apresenta abaixo: 
BALÃO [HQ] Absorbância 
Branco 0 0 
1 1.10-5 0,220 
2 2.10-5 0,443 
3 3.10-5 0,677 
4 4.10-5 0,904 
5 5.10-5 1,146 
 
 
 
Gráfico 1. Relação entre a concentração de hidroquinona na solução com a absorbância lida 
no espectrofotômetro. 
Notou-se na curva analítica, a obtenção de uma equação da reta que é 
y=22903x-0,0076, onde temos o coeficiente angular (22903) e o coeficiente 
linear (0,0076). Por meio do valor do coeficiente angular, é possível saber se 
a reta é crescente, decrescente ou constante. Já o coeficiente linear mostra o 
ponto em que a reta intercepta o eixo vertical y. 
De acordo com a ANVISA, o coeficiente de correlação ou R² deve estar acima 
de 0,990 e o resultado do coeficiente foi 0,9998 indicando uma correlação 
agradável entre as variáveis. 
Com base nos resultados encontrados pode-se cogitar a possibilidade de 
utilizar a equação da reta para fazer a determinação da concentração do 
analito, pois houve grande proporção linear entre os valores de absorbância 
encontrados. 
 
5. Conclusões: 
A formação da coloração específica da reação de oxidação do analito, serviu 
para identificá-lo no espectrofotômetro UV-Vis. Através dos resultados obtidos, 
foi criado uma curva de calibração gerada pela medida da absorbância da 
hidroquinona em várias concentrações conhecidas. 
y = 22903x - 0,0076 
R² = 0,9998 
-0,2
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
0 0,00001 0,00002 0,00003 0,00004 0,00005 0,00006
 A
b
s
o
rb
â
n
c
ia
 
Concentração de Hidroquinona 
https://mundoeducacao.uol.com.br/matematica/retas.htm
 
 
Pode-se observar que a realização da leitura da absorbância foi satisfatória. A 
curva apresentou linearidade, visto que quanto maior a concentração do 
analito, maior foi a sua absorbância, comprovado pelo valor de R que foi de 
0,9998. 
Concluindo assim, a prática atingiu os objetivos propostos durante a aula no 
que se diz respeito a preparação de soluções e determinação da equação da 
reta e da curva analítica da hidroquinona. Essa curva analítica pode ser 
utilizada em análises de concentrações desconhecidas de hidroquinona. 
 
 
6. Bibliografia: 
ANVISA. AGENCIA NACIONAL DE VIGILÂNCIA SANITÁRIA. Farmacopeia Brasileira, volume 
1. 5ª Ed. Brasilia,2010b. 
 
BACCAN, N., ANDRADE, IC, GODINHO, O. E. S et al. Química Analitica Quantitativa 
Elementar. 3 ed. São Paulo: Edgard Blucher LTDA, 2004 
 
HYDROQUINONE. [S. l.], 2022. Disponível em: 
https://www.sigmaaldrich.com/BR/pt/product/sial/h9003. Acesso em: 11 mar. 2022. 
 
RODRIGUES, Raul. Equação reduzida da reta: qual é e para que serve? Mundo Educação. 
Disponível em: <https://mundoeducacao.uol.com.br/matematica/equacao-reduzida-reta.htm>. 
Acesso em: 14 Mar. 2022. 
 
SKOOG et al. Fundamentos de Química Analítica. 8ª Edição. Thomson 
 
1,10-PHENANTHROLINE. [S. l.], 2022. Disponível em: 
https://www.sigmaaldrich.com/BR/pt/product/sial/h9003. Acesso em: 11 mar. 2022.