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AMANDA MOREIRA MARCELO DONDONI MARCOS TASCA PENSO EXTRAÇÃO DO DNA DO CAQUI PONTA PORÃ – MS 2019 AMANDA MOREIRA MARCELO DONDONI MARCOS TASCA PENSO EXTRAÇÃO DO DNA DO CAQUI PONTA PORÃ – MS 2019 Relatório apresentado ao Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia de Mato Grosso do Sul, Campus de Ponta Porã, como exigência da disciplina de Biologia Celular, ministrada pelo Prof. Alexandra Riquelme. 3 1. INTRODUÇÃO O caqui (Diospyrus kaki L.) é um fruto muito apreciado devido ao seu sabor doce e agradável, por conter alto teor de vitamina A, e grandes quantidades de água em seu interior. Além disto, possui quantidades consideráveis de fibras que são essenciais para regularizar as funções intestinais. Este fruto, de origem Asiática, especificamente na China, possui um cálice persistente e bastante desenvolvido. A cor da casca varia em tons de vermelho e amarelo, e sua polpa é geralmente amarelada, mas pode também variar, em função da presença ou não de sementes. O fruto maduro é rico em amido, açúcares, sais minerais e vitaminas A, B1, B2 e C. Uma das razões de se trabalhar com o caqui é que ele se presta muito bem à extração de DNA, porque caquis maduros são muito macios e fácies de homogeneizar. 2. OBJETIVOS A fim de se tornar mais fácil a compreensão sobre o DNA, o experimento teve como objetivo mostrar, de forma simples e didática, como se dá a extração de células de um fruto, visualizar moléculas de DNA, além de conhecer alguns métodos utilizados no estudo da biologia celular. 4 3. METERIAL E MÉTODOS 3.1. – Materiais e Reagentes: Neste experimento foram utilizados: 1 saco plástico; 1 caqui maduro; 1 backer (250 mL); 15 mL de solução de solução de extração de DNA; Aparato filtrante: 1 filtro de gaze e um funil; Álcool etílico gelado (pode ser ácool 70º g.l. – 96º g.l.); 1 tubo de ensaio limpo; 1 bastão de vidro ou 1 palito de madeira. 3.2. – Procedimentos: 1º). Coloque a fruta, previamente lavado em um saco plástico; 2º). Esmague o caqui com o punho por no mínimo 2 minutos; (Figura 1) 3º). Adicione a solução de extração junto com o caqui amassado em um backer; (Figura 2) 4º). Misture tudo, por no mínimo 1 minutos; (Figura 2) 5º). Derrame o extrato no aparato filtrante; (Figura 3) 6º). Deixe filtrar em um recipiente; (Figura 4) 7º). Não encha totalmente o tubo (encha até 1/6 do seu volume total); 8º). Derrame devagar o álcool gelado no tubo, até que o mesmo esteja cheio pela metade; (Figura 5) 9º). Mergulhe o bastão de vidro dentro do tubo no local onde a camada de álcool faz contato com a camada de extrato; (Figura 6) 10º). Mantenha o tubo ao nível dos olhos para ver o que está acontecendo. (Figura 6) 5 4. RESULTADOS E DISCUSSÃO Assim que os participantes derramarem o etanol gelado no extrato de caqui eles começarão a notar fitas brancas muito finas de DNA, que se formarão na interface entre as duas camadas. Agitando-se o DNA que se formou na camada de etanol, este formará fibras como as de algodão, que grudarão no objeto que se está usando para misturar. Figura 2: Adição da solução Figura 1: Esmagando a fruta de extração Figura 3: Aparato filtrante Fonte: Autor próprio. Fonte: Autor próprio. Fonte: Autor próprio. Figura 4: Filtrando a solução Figura 5: Adição de álcool Figura 6: Visualização do DNA Fonte: Autor próprio. Fonte: Autor próprio. Fonte: Autor próprio. 6 5. CONCLUSÃO De acordo com o que foi constatado através das observações e pelos resultados obtidos na metodologia, verificou-se que algumas frutas apresentam maiores ou menores aglomerações de material genético utilizando a tal específica técnica de extração. Espera-se que esse trabalho tenha contribuído para comprovar que a técnica utilizando a solução extratora realmente funciona e pode-se obter resultados incríveis e de fácil percepção. Também, através desse método, obtemos melhores resultados em algumas frutas do que em outras. 6. REFERÊNCIAS MARTINEZ. Marina – INFOESCOLA – Caqui, 2019. [Internet] Disponível em: <https://www.infoescola.com/frutas/caqui/>. Acesso em: 16/06/2019 INVIVO – DNA do morango, 2019. [Internet] Disponível em: < http://www.invivo.fiocruz.br/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?infoid=115&sid=3>. Acesso em: 16/06/2019 https://www.infoescola.com/frutas/caqui/ http://www.invivo.fiocruz.br/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?infoid=115&sid=3