roteiro aula pratica microbiologia

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Curso: Zootecnia 
Disciplina: Microbiologia zootécnica 
Aula prática: Introdução a microbiologia 
INSTRUÇÕES 
1. Usar jaleco, sapatos fechados e cabelo preso; 
2. Anotar todos os resultados no roteiro da aula; 
3. Na bancada de trabalho não deve haver acúmulo de objetos, permanecendo apenas os 
indispensáveis para a análise em execução, além do roteiro e caneta ou lápis para 
anotações; 
4. Cuidado no uso do bico de gás (bico de Bunsen). Esperar a demonstração e mantê-lo aceso 
somente quando necessário. Observar, também, se não há produtos inflamáveis (álcool, 
éter, acetona etc.) nas proximidades da chama; 
5. Os tubos de ensaio e placas de Petri com meios de cultura só poderão ser abertos nas 
proximidades da chama, para evitar contaminação; 
6. Não tocar no meio de cultura com dedos e quaisquer outros objetos. Deixar as placas e 
tubos abertos o tempo mínimo necessário para realizar a operação (repique) e fechá-lo, 
imediatamente, após; 
7. Todo o material utilizado na análise, como por exemplo, as placas de Petri e os tubos de 
ensaio contendo meios de cultura ou soluções, deverão ser devidamente identificados. 
8. Terminado o trabalho prático, deixar a bancada em ordem; 
9. Sempre lavar as mãos com água e sabão antes e após terminar o trabalho prático. 
 
 
 
Objetivo: Aprender algumas técnicas básicas usadas na microbiologia. 
Materiais utilizados: Autoclave, estufa incubadora, placa de Petri, tubo de cultura, pipeta 
graduada e pipetador automático, balança, geladeira, destilador de água, centrífuga, banho-
maria e outras vidrarias, meios de cultura, microscópio, lâminas. 
ATIVIDADE PRÁTICA 1: Pour-plate e contagem de colônias 
Objetivo: Determinar o número de microrganismos de uma cultura bacteriana a partir de uma 
amostra de leite cru. 
1. Transferir uma alíquota de 1 mL da amostra para o primeiro tubo contendo a solução 
salina, formando o 10-1; 
2. A partir do tubo inicial, transferir 1 mL para o segundo formando o 10-2; 
3. Siga criando as diluições até o tubo formando o 10-5; 
4. Terminando a etapa das diluições, transferir 1 mL de cada diluição para sua respectiva 
placa de Petri devidamente identificada; 
5. Com cuidado acrescentar o meio de cultura nas placas (o suficiente para cobrir toda a 
placa) e depois realizar movimentos circulares para homogeneização; 
6. Depois de solidificadas, as placas serão encubadas em estufa de 35-37°C por 24 horas 
para crescimento dos microrganismos; 
Atenção: A aula prática deverá iniciar-se com uma explicação e um período de 
demonstração. O trabalho não deve ser iniciado pelo aluno, até que tenha 
recebido todas as instruções necessárias. 
 
7. Após esse período efetuaremos a contagem das colônias e expressaremos os resultados. 
 
Diluição Nº de colônias UFC/mL 
10-1 
10-2 
10-3 
10-4 
10-5 
FÓRMULAS 
𝒏º 𝑼𝑭𝑪/𝒎𝑳 =
𝒏º 𝒅𝒆 𝒄𝒐𝒍𝒐𝒏𝒊𝒂𝒔
 𝒇𝒂𝒕𝒐𝒓 𝒅𝒆 𝒅𝒊𝒍𝒖𝒊çã𝒐
 
ATIVIDADE PRÁTICA 2: Teste de Swab em superfícies 
Objetivo: Trata-se de um esfregaço em placas de Petri, efetuando a aplicação de uma haste 
(cotonete) em uma determinada área, com objetivo de detectar presença de microrganismos. 
1. Escolha um local onde você gostaria de saber se existe a presença de microrganismos 
(ex: celular, mãos, ralo do bebedouro etc.); 
2. Identifique a placa de Petri com seu nome, data e o local de coleta do material; 
3. Com o auxílio de um swab colete material do local escolhido e espalhe delicadamente 
por toda a superfície da placa de Petri contendo meio de cultura; 
4. Deve-se ter o cuidado para que toda a superfície da placa seja semeada, recomenda-se 
que faça o procedimento de semeadura com o swab em três direções distintas; 
5. Incubar as placas na estufa 37°C por 24 horas. 
 
ATIVIDADE PRÁTICA 3: Coloração de Gram 
Objetivos: Entender o procedimento de coloração pelo método de Gram; 
Observar as lâminas criadas a partir de uma colônia isolada da placa de Petri; 
Observar arranjo, morfologia celular e aspecto tintorial em microscopia óptica. 
 
 
Staphylococcus aureus Escherichia Coli (E. Coli)