LÍQUIDOS CORPORAIS - SÊMEN

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LÍQUIDOS CORPORAIS
· Sêmen – AULA 12
Líquido viscoso esbranquiçado composto por secreções . Produzido no aparelho reprodutor masculino. Função: Transporte de espermatozoides e proteção dos espermatozoides. 
• Quando fazer avaliação do sêmen?
Infertilidade masculina
Auxílio na identificação de problemas hormonais
Controle pósvasectomia
Auxílio na identificação de doenças do sistema reprodutor
Formação do Sêmen
hormônio liberador de gonadotrofina 
LH - Hormônio luteinizante FSH - Folículo estimulante
Célula de Sertoli
• Componentes do sêmen
Análise de sêmen
• Etapa pré-analítica
Entrevista: Como obter o material?
Explicar importância de coletar todo o material. Doenças pregressas e medicamentos. Finalidade do exame e dados clínicos. Período de abstinência: 2 a 7 dias de abstinência sexual. 
Coleta
– Masturbação, eletroejaculação, extração diretamente do epidídimo.
A análise do sêmen envolve as seguintes etapas: 
Etapa analítica – Exame macroscópico 
Liquefação, Aspecto, Volume, Viscosidade, pH
• Liquefação – Antígeno prostático específico (PSA) – Próstata
–Temperatura ambiente ou estufa a 37ºC
–Tempo médio – 15 minutos
–Maior que 60 minutos: Registrar »Possíveis alterações prostáticas
• Viscosidade – Após a liquefação 
–Viscosidade normal: »Gotejamento pela gravidade »Fio inferior a 2 cm 
– Maior que 2 cm: » Viscosidade aumentada » Pode interferir no teste de motilidade e nas concentração de espermatozoide
• Aspecto – Sêmen liquefeito: aparência homogênea, cinza ou branca e opalescente
• Volume – Sêmen pesado – densidade: 1,043 e 1,102 g/ml – Superior a 1,5 mL
• pH – Fitas reativas –pH: 7,2 – 8,0
Exame microscópico
Motilidade, Vitalidade, Concentração de leucócitos, Morfologia, Concentração.
– Agregação e aglutinação 
• Homogeneizar bem a amostra 
• Microscópio de contraste de fase 
• Agregação inespecífica – Imóveis aderidos a células ou debris 
• Agregação específica – adesão uns aos outros (anticorpos)
– Motilidade espermática A motilidade é definida como o movimento espontâneo dos espermatozoides 
• Avaliação logo após a liquefação – Até 1 hora após a coleta 
• Vasculhar sistematicamente a lâmina para evitar a exibição repetida da mesma área. 
• Avaliar pelo menos 200 espermatozoides em um total de pelo menos cinco campos em cada réplica
• Classificação da motilidade – Motilidade progressiva – Motilidade não progressiva – Imóveis
Motilidade espermática Utilizar câmara que permita a circulação dos espermatozoides
Câmara Makler; Câmara Microcell; Câmara de Neubauer. 
– Motilidade espermática
– Vitalidade espermática
Avaliação da integridade das membranas das células
• Realizado em amostras com mais de 60% de espermatozoides imóveis 
• Após a liquefação: até 30 minutos após a coleta
• Método de exclusão de corante (eosina) e inchamento hipotônico
»Eosina – 0,5% -1% e Nigrosina – 8% 
»Relação 1:1 entre amostra e corante »Colocar na lâmina 
»Contar 200 células - Contar as células mortas e vivas, Células mortas: coradas, Células vivas: transparentes/brancas
– Concentração espermática Número de espermatozoides em milhões por mililitro de sêmen (x106 por mL)
• Realizada em câmara de Neubauer, Microscopia óptica, Resultado final - Fator de diluição e volume coletada. Concentração normal: acima de 16 milhões/mL.
• Contar apenas espermatozoides inteiros (com cabeça e cauda). Evitar contar o mesmo espermatozoide – Contagem é feita a partir da cabeça do espermatozoide
Causas mais frequentes de oligorspermia e azoospermia
Varicocele: 50 – 70%
Infecções (prostato-vesiculites) – 35 %
Outras infecções – 2,8 %
Anomalias cromossômicas e congênitas – 3 %
Criptorquidia – 0,3 %
Alterações hormonais – 2,0 %
– Morfologia espermática Forma e pelo aspecto dos espermatozoides
• Morfologia descrito em 1986 por Kruger
• Esfregaço em lâmina – Fixação e coloração
• Análise em objetiva de 1000x e contar 200 células 
• Normal - ≥ 4%
• Aspectos normais: Morfologia por Kruger 
– Cabeça: forma oval e lisa com acrossomo compreendendo de 40% a 70% do segmento cefálico. – Peça intermediária: delgada, com menos de 1 μm de largura, comprimento aproximado de 1,5 vez o tamanho do segmento cefálico e não apresentar nenhum defeito.
 – Cauda: uniforme, levemente mais fina que a peça intermediária, com comprimento aproximado de 45 μm, sem defeito, como cauda enrolada, quebrada ou curta
– Morfologia espermática – coloração panótico
– Contagem de células redondas e leucócitos 
• Células redondas: Células epiteliais do trato geniturinário, células prostáticas superficiais ou colunares, células germinativas imaturas
• Mesma metodologia da concentração de espermatozoides 
• Diferenciar células redondas de leucócitos – Leucócitos elevados – Infecção genital, níveis elevados de radicais livres, títulos elevados de anticorpos antiespermatozoides, etc
– Teste de Endtzou de peroxidase: Identifica neutrófilos » Sêmen liquefeito incubado com peróxidode hidrogênio; 
» Reage com a peroxidase dos neutrófilos– Coloração marrom 
» Células peroxidase negativa – transparente
– Contagem de células redondas e leucócitos
Diferenciação das células redondas presentes no sêmen, utilizando o teste de Endtz. A esquerda: célula redonda peroxidase negativa (seta larga) e granulócito peroxidase-positivo (P+). A direita: visão geral de uma lamina contendo vários granulócitos peroxidase-positivos.
Valores de referencia para os parâmetros seminais publicados pela Organização Mundial da Saúde (OMS) 2021.
· LÍQUOR – AULA 13
Líquido límpido, incolor, estéril com poucas proteínas e células
• Líquido cefalorraquidiano ou cerebroespinal
• Produzido no cérebro
• SNC está imerso no líquor – Redução do peso 
• Função: – Protege estruturas cerebrais e medulares, como amortecedor – Fornece nutrientes – Remoção de resíduos
• Quando fazer avaliação do Líquor?
Diagnóstico - Tratamento – Profilaxia - Estadiamento
Patologias do sistema nervoso central 
Ex: Problemas vasculares, infecções, inflamações, tumores
• Indicações 
– Processos infecciosos do SN e seus envoltórios 
– Processos granulomatosos com imagem inespecífica – Processos desmielinizantes 
– Leucemias e linfomas (estadiamento e tratamento) 
– Imunodeficiências 
– Processos infecciosos com foco não identificado 
– Hemorragia sub-aracnoidea
• Fisiologia – Formação
• Plexo coroide: 60-70% 
• Paredes ventriculares: 30-40%
• Produção: 20mL/h 
• Cerca de 500 mL/dia
• Fisiologia – Trajeto
Ventrículos laterais (1° e 2° ventrículos)
Forame interventricular (MONRO)
3° ventrículo
Aqueduto cerebral (SYLVIUS)
4° ventrículo
Abertura mediana Aberturas laterais
 (Magendie) (Luschka)
Medula espinhal Cérebro D e E
• Fisiologia – Reabsorção
• Composição
Água – 99,13% Sólidos – 0,87%
Substâncias Orgânicas Substâncias Inorgânicas
Proteínas Sódio
 Aminoácidos Cálcio
Açúcar Potássio
 Colesterol Magnésio
Ureia Cloro
 Ácido úrico Fosfato
 Creatinina Bicarbonato
 Ácido Lático Sulfatos
• Fase pré-analítica – Paciente 
• Não há uma preparação especial 
• Evitar o uso de medicamentos anticoagulante 
• Evitar punção em locais com infecção 
• Contra indicado para pacientes com pressão intracraniana elevada
Explicar para o paciente sobre os riscos
– Coleta: Punção lombar com anestesia local ou geral
Punção cisternal – cisterna magna
• Fase analítica
– Análise macroscópica 
• Pleocitose – Turvação causada por presença de células (leucócitos)
– Análise Microscópica – Contagem de células 
• Câmara de Neubauer e Fuchs Rosenthal (padrão ouro) Contagem 
• Deve ser realizado o maisrápidopossível 
• Não deve ser automatizado
– Diferenciação celular 
• Lâmina + coloração
• Contagem de leucócitos – Doenças inflamatórias no SNC
• Diferenciar os tipos celulares– Diferenças causas relacionadas
• Linfócitos: infecções virais e fúngicas 
• Neutrófilos: infecção bacteriana
• Citocentrifugação do líquor 
• Normalmentepoucos leucócitos – Linfócito:60-70%;Monócito:30-50%,neutrófilo:1-3%
NEUTRÓFILOS: Meningites bacterianas • Formas iniciais de outras meningites • Abcessos cerebrais • Hemorragias
LINFÓCITO; Fases tardias de meningite viral, tuberculosa e fúngica • Outros processos inflamatórios
EOSINÓFILO: Ausente no Líquor normal • Infecções fúngicas e parasitárias • Reações alérgicas
MACRÓFAGO: Hemorragias
 
– Análise Bioquímica
 – Proteínas • Adultos – 15 a 45 mg/dL 
• Proteínas aumentadas: Hemorragias, Distúrbios endócrinos, Punção traumática, Estágio inicial de meningite 
• Albumina e imunoglobulina 
• Métodos de dosagem de proteínas totais: Colorimétrico – Imunoquímica – Eletroforese
• Albumina: Normal- proporção do Líquor/sérica = < 9
IgA – 0,03 – 0,3 mg/dL
IgG – 0,3 – 3,0 mg/dL
IgM – 0,01 – 0,1 mg/dL
– Glicose • Adultos – 50 a 80 mg/dL 
• Glicose do LCR mantida em equilíbrio com a plasmática 
• Glicose aumentada: Hiperglicemia , Punção traumática 
• Glicose baixa – Infecção – Problemas no transporte de glicose 
• Método de dosagem de glicose – Colorimétrico
Causas de Hipoglicorraquia 
Meningite Bacteriana 
Meningite tuberculosa
Meningite por fungos
Carcinomatose menígea
Sarcoidose
Hemorragia subaracnóidea
– Lactato • Adultos – 9 a 19mg/dL 
• Metabolismo anaeróbiodo SNC 
• Lactato aumentado: Trauma encefálico, Hemorragia intracraniana, Edema cerebral , Meningite, etc 
• Métodos de dosagem de Lactato – Enzimático colorimétrico
– Análise Microbiológica 
- Coloração • Tubos estéreis – geralmente o 2º ou outro subsequente 
 – Centrifugação do LCR 
– Gram – Mais utilizado 
– Ziehl neelsen- Mycobacterium tuberculosis 
– Tinta nanquim – Cryptococcus neoformans
– Cultura (padrão ouro) 
• Realizados após a coloração 
• Feita do sedimento- Centrifugação 
• Cultura: Caldo enriquecido
Imunológicos • Não substitui as culturas e coloração • A sensibilidadee especificidade – varia com o teste
• Ensaios: – Aglutinação do látex – VDRL – Imunoeletroforese, etc
– Neoplasias • Examescitológicos – Células neoplásicas – Sensibilidade baixa – Baixa quantidade de células » Aumentar a sensibilidade: punções repetidas 
• Marcadores tumorais
Doenças meningocócicas Diagnóstico laboratorial:
• Cultura
• Exame quimiocitológico do LCR 
• Bacterioscopia direta
• Aglutinação pelo látex
• Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)
LÍQUIDO SEROSO E SINOVIAL – AULA 14 
LÍQUIDOS CORPORAIS
 
·
 
Sêmen
 
–
 
AULA 12
 
Líquido viscoso esbran
quiçado composto por 
secreções . 
Produzido no aparelho reprodutor 
masculino
. Função: 
Transporte de espermatozoides
 
e 
p
roteção dos espermatozoides
. 
 
 
• Quando fazer avaliação do sêmen?
 
Infertilidade 
masculina
 
Auxílio na identificação de problemas hormonais
 
Controle pósvasectomia
 
Auxílio na identificação de doenças do sistema 
reprodutor
 
 
Formação do Sême
n
 
hormônio liberador de gonadotrofina 
 
LH 
-
 
Hormônio lu
teinizante FSH 
-
 
Folículo 
estimulante
 
Célula 
de Sertoli
 
 
 
• Componentes do sêmen
 
 
Análise de sêmen
 
• Etapa pré
-
analítica
 
Entrevista: Como obter o material?
 
Explicar importânc
ia de coletar todo o material. 
Doenças pregress
as e medicamentos. 
Finalidade do 
exame e dados clíni
cos. Período de abstinência
: 
2 a 7 
dias de abstinência sexual
. 
 
Coleta
 
–
 
Masturbação, eletroejaculação, e
xtração diretamente 
do epidídimo
.
 
A análise do sêmen envolve as seguintes etapas:
 
 
 
 
Etapa analítica 
–
 
Exame macroscópico 
 
Liquefação, Aspecto, Volume, Viscosidade, pH
 
• 
Liquefação 
–
 
Antígeno prostático específico (PSA) 
–
 
Próstata
 
–
Temperatura ambiente ou estufa a 37ºC
 
–
Tempo médio 
–
 
15 minutos
 
–
Maior que 60 minutos: Registrar »Possíveis 
alterações prostáticas
 
 
• Viscosidade 
–
 
Após a liquefação 
 
–
Viscosidade normal: »Gotej
amento pela gravidade 
»Fio inferior a 2 cm 
 
–
 
Maior que 2 cm: » Viscosidade aumentada » Pode 
interferir no teste de motilidade e nas concentração de 
espermatozoide
 
 
• Aspecto 
–
 
Sêmen liquefeito: aparência homogênea, 
cinza ou branca e opalescente
 
 
• Volume 
–
 
Sêmen pesado 
–
 
densidade: 1,043 e 1,102 
g/ml 
–
 
Superior a 1,5 mL
 
 
• pH 
–
 
Fitas reativas 
–
pH: 7,2 
–
 
8,0
 
 
Exame microscópico
 
Motilidade, Vitalidade, Concentração de leucócitos, 
Morfologia, Concentração.
 
 
–
 
Agregação e aglutinação 
 
LÍQUIDOS CORPORAIS 
 Sêmen – AULA 12 
Líquido viscoso esbranquiçado composto por 
secreções . Produzido no aparelho reprodutor 
masculino. Função: Transporte de espermatozoides e 
proteção dos espermatozoides. 
 
• Quando fazer avaliação do sêmen? 
Infertilidade masculina 
Auxílio na identificação de problemas hormonais 
Controle pósvasectomia 
Auxílio na identificação de doenças do sistema 
reprodutor 
 
Formação do Sêmen 
hormônio liberador de gonadotrofina 
LH - Hormônio luteinizante FSH - Folículo 
estimulante 
Célula de Sertoli 
 
 
• Componentes do sêmen 
 
Análise de sêmen 
• Etapa pré-analítica 
Entrevista: Como obter o material? 
Explicar importância de coletar todo o material. 
Doenças pregressas e medicamentos. Finalidade do 
exame e dados clínicos. Período de abstinência: 2 a 7 
dias de abstinência sexual. 
Coleta 
– Masturbação, eletroejaculação, extração diretamente 
do epidídimo. 
A análise do sêmen envolve as seguintes etapas: 
 
 
 
Etapa analítica – Exame macroscópico 
Liquefação, Aspecto, Volume, Viscosidade, pH 
• Liquefação – Antígeno prostático específico (PSA) – 
Próstata 
–Temperatura ambiente ou estufa a 37ºC 
–Tempo médio – 15 minutos 
–Maior que 60 minutos: Registrar »Possíveis 
alterações prostáticas 
 
• Viscosidade – Após a liquefação 
–Viscosidade normal: »Gotejamento pela gravidade 
»Fio inferior a 2 cm 
– Maior que 2 cm: » Viscosidade aumentada » Pode 
interferir no teste de motilidade e nas concentração de 
espermatozoide 
 
• Aspecto – Sêmen liquefeito: aparência homogênea, 
cinza ou branca e opalescente 
 
• Volume – Sêmen pesado – densidade: 1,043 e 1,102 
g/ml – Superior a 1,5 mL 
 
• pH – Fitas reativas –pH: 7,2 – 8,0 
 
Exame microscópico 
Motilidade, Vitalidade, Concentração de leucócitos, 
Morfologia, Concentração. 
 
– Agregação e aglutinação