Identificação de Glicosídeos Flavonoídicos e Antraquinônicos

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Roteiros 
Farmacognosia Aplicada
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Identificação 
química de glicosídeos 
flavonoídicos
AULA 1
ROTEIRO 1
Objetivo: identificar a presença de glicosídeos flavonoídicos em drogas de origem 
vegetal.
Procedimento
Droga vegetal (camomila, faveiro ou arnica)
1. Pesar cerca de 1 g da droga em pó ou rasurada;
2. Colocar em um béquer e juntar 20 mL de etanol a 70%;
3. Aquecer até ebulição;
4. Esfriar a solução;
5. Filtrar com algodão para outro béquer; deixando o resíduo no béquer;
6. Repetir a extração com mais 20 mL de álcool 70%;
7. Filtrar, juntando os filtrados;
8. Dividir o filtrado em 4 tubos (1 para o branco) e proceder às seguintes identificações:
A. Reação de Shinoda
A 3 mL da solução hidroalcoólica obtida, adicionar 1 a 2 fragmentos de magnésio 
metálico e 1 mL de ácido clorídrico concentrado pelas paredes do tubo (CUIDADO, adicione 
o ácido na CAPELA e mantenha o tubo na estante): a reação ocorre lentamente com o 
desenvolvimento de cor que varia do róseo ao avermelhado.
Serviço Social
B. Reação com cloreto férrico
Juntar a 3 mL da solução hidroalcoólica obtida: 2 gotas de solução de cloreto férrico 
a 2%; verifica-se o aparecimento de cor que varia do verde-amarelado, castanho, violeta, 
cinza, de acordo com o tipo de composto flavonoídico.
C. Reação com hidróxido de sódio
A 3 mL da solução hidroalcoólica obtida, adicionar 2 gotas de solução de hidróxido de 
sódio a 5%; verifica-se o aparecimento de cor amarela que varia de intensidade.
D. Reação com cloreto de alumínio 5%
Pingar duas gotas da solução hidroalcoólica obtida separadamente em um papel de 
filtro, sobre uma das gotas pingar uma gota de cloreto de alumínio 5%, esperar secar e 
verificar fluorescência sob luz UV.
Questões
1. Discuta a escolha do solvente de extração desse experimento.
2. Justifique por que a identificação pode ser realizada com luz UV, além de metais.
Materiais Quantidades
Droga vegetal: camomila ou arnica 200 g *
Espátula 1
Béquer 250 2
Béquer 100 2
Proveta 50 ou 100 mL 1
Funil de vidro 2
Pera de borracha 1
Manual de Estágio
Papel de filtro (médio) 4
Algodão Porção 
Bastão de vidro 2
Suporte universal 1
Argolas 2
Pipeta 5 ou 10 mL 4
Tubo de ensaio 8
Suporte para tubo 1
Cloreto férrico 2 ou 5% 100 mL*
Álcool 70% 2 L*
Cloreto de alumínio 100 mL*
Ácido clorídrico concentrado 100 mL*
Hidróxido de sódio 10% 100 mL*
Magnésio metálico Lascas 30*
Equipamentos Quantidades
Manta de aquecimento 1
Balança técnica 2 *
Luz ultravioleta (266 nm e 366 nm) 1
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança:
Cloreto férrico diluído, hidróxido de 
sódio e ácido clorídrico diluído
200 mL
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Identificação 
química de antraquinonas
AULA 1
ROTEIRO 2
Objetivo: identificar a presença de compostos antraquinônicos em drogas de origem 
vegetal.
Procedimento: droga vegetal (cáscara sagrada ou frângula ou sene)
Antraquinonas livres
1. Agitar 1 g da droga pulverizada com 3 mL de éter ou outro solvente orgânico volátil;
2. Decantar o solvente para um tubo de ensaio;
3. Repetir o procedimento e juntar o solvente no mesmo tubo; 
4. NÃO DESPREZAR A DROGA – ela será utilizada para as próximas reações;
5. Adicionar ao extrato orgânico cerca de 1 mL de hidróxido de amônia a 10%;
6. Agitar.
A coloração rósea ou vermelha na fase aquosa indica a presença de antraquinonas livres.
Ligação C-O
1. Adicionar 20 mL de água destilada à droga extraída previamente;
2. Ferver por 2 minutos; 
3. Acrescentar 5,0 mL de HCl a 10% e ferver por mais 1 minuto;
4. Esfriar e filtrar em um funil de separação;
Manual de Estágio
5. Adicionar 5 mL de hexano ou outro solvente orgânico;
6. Agitar;
7. Deixar em repouso até as camadas separarem;
8. Decantar a camada orgânica para um tudo de ensaio;
9. NÃO DESPREZAR A CAMADA AQUOSA ÁCIDA; 
10. Adicionar 3 mL de hidróxido de amônia a 10% à fase orgânica (tubo) e agitar;
11. Deixar repousar.
Coloração vermelha na camada amoniacal: reação positiva, indicando a presença de 
glicosídeos antraquinônicos com ligação C-O.
Ligação C-C
1. Passar a fase aquosa ácida que ficou no funil para um béquer e acrescentar 2 mL de 
cloreto férrico 5%;
2. Ferver por 3 minutos; esfriar;
3. Filtrar em funil de separação;
4. Adicionar 5 mL de hexano ou outro solvente orgânico;
5. Agitar;
6. Decantar a camada orgânica para um tubo de ensaio;
7. Adicionar 3 mL de amônia diluída no tubo e agitar;
8. Deixar repousar.
Coloração vermelha na camada amoniacal: reação positiva, indicando a presença de 
glicosídeos antraquinônicos com ligação C-C.
Serviço Social
Questões
1. Discuta os diferentes solventes nas 3 etapas de extração.
2. Esquematize a reação de identificação (Borntrager) de antraquinonas.
Materiais Quantidades
Droga vegetal: cáscara sagrada 200 g *
Espátula 1
Béquer 250 2
Béquer 100 2
Proveta 50 ou 100 mL 1
Funil de vidro 2
Pera de borracha 1
Papel de filtro (médio) 4
Algodão Porção 
Bastão de vidro 2
Suporte universal 1
Argolas 2
Pipeta 5 ou 10 mL 4
Tubo de ensaio 8
Suporte para tubo 1
Funil de separação 2
Cloreto férrico 2 ou 5% 100 mL*
Hexano, diclorometano ou outro 
solvente orgânico volátil 500 mL*
Ácido clorídrico 10% 500 mL*
Hidróxido de sódio ou de amônio10% 100 mL*
Água destilada 1000 mL
Equipamentos Quantidades
Manta de aquecimento 1
Balança técnica 2 *
Manual de Estágio
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança:
Solvente orgânico 500 mL
Cloreto férrico diluído 500 mL
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Identificação 
química de glicosídeos cardioativos
AULA 2
ROTEIRO 1
Objetivo: identificar a presença de glicosídeos cardioativos em drogas de origem vegetal.
 
Procedimento
Droga vegetal (espirradeira ou dedaleira)
1. Pesar cerca de 1 g da droga;
2. Adicionar 20 mL de etanol a 70% e ferver;
3. Filtrar em algodão para um béquer;
4. Adicionar 3 mL de solução saturada de acetato de chumbo;
5. Filtrar em papel de filtro para funil de separação;
6. Adicionar 5 mL de água destilada;
7. Extrair a solução hidroalcoólica com 2 porções de 4 mL cada, de clorofórmio;
8. Reunir os extratos clorofórmios obtidos e dividir em 4 tubos de ensaio;
9. Colocar os tubos em banho-maria (num béquer) e evaporar tudo;
10. Fazer as seguintes reações de identificação:
Manual de Estágio
A. Reação de Liebermann-Bouchard (identifica o núcleo esteroidal)
Redissolver o resíduo com 0,5 mL de anidrido acético; transferir cuidadosamente pelas 
paredes para um tubo de ensaio contendo aproximadamente 1 mL de ácido sulfúrico 
concentrado; NÃO AGITAR. Observar o aparecimento de um anel castanho-avermelhado 
na zona de contato.
B. Reação de Kedde (identifica a lactona insaturada)
Juntar ao resíduo 4 a 5 gotas de solução alcoólica a 1% de ácido 3,5- dinitrobenzoico e 
2 gotas de solução de KOH 1 N. Observar o aparecimento de coloração vermelho-violáceo 
intensa em caso de reação positiva.
Ou
C. Reação de Baljet (identifica a lactona insaturada)
Juntar ao resíduo 4 a 5 gotas de solução alcoólica a 2% de ácido pícrico e 2 gotas de 
solução de KOH 1 N. Observar o aparecimento de coloração alaranjada intensa em caso de 
reação positiva.
D. Reação de Keller-Killiani (identificação de 2-desoxiaçúcares)
Dissolver o resíduo em cerca de 1 mL de ácido acético glacial; juntar à solução 2 gotas 
de cloreto férrico a 2%; transferir cuidadosamente através das paredes para outro tubo de 
ensaio contendo cerca de 1 mL de ácido sulfúrico concentrado. NÃO AGITAR. Observar o 
aparecimento de coloração vermelho-acastanhada na zona de contato dos líquidos e de 
coloração amarelo-esverdeada na camada acética.Serviço Social
Questões
1. Com relação à extração dos glicosídeos cardioativos, explique as etapas e os solventes 
utilizados.
2. Discuta a estrutura com relação à identificação.
Materiais Quantidades
Droga vegetal: espirradeira 200 g *
Espátula 1
Béquer 250 2
Béquer 100 2
Proveta 50 ou 100 mL 1
Funil de vidro 2
Funil de separação 2
Papel de filtro (médio) 4
Algodão Porção 
Bastão de vidro 2
Suporte universal 1
Argolas 2
Pipeta 5 ou 10mL 4
Tubo de ensaio 8
Suporte para tubo 1
Pera de borracha 1
Acetato básico de chumbo 10% 400 mL*
Álcool 70 ou 80% 2 L*
Clorofórmio 500 mL*
Ácido pícrico etanólico 2% 100 mL*
KOH 10% 100 mL*
Anidrido acético 100 mL*
Ácido sulfúrico concentrado 200 mL*
Ácido acético glacial 100 mL*
Cloreto férrico 2 ou 5% 100 mL*
Ácido 3,5- dinitrobenzoico 50 mL*
Manual de Estágio
Equipamentos Quantidades
Banho-maria grande ou chapa 
de aquecimento grande 1 ou 2*
Balança técnica 2 *
Manta de aquecimento 1*
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança:
Ácido sulfúrico, anidrido acético, ácido 
acético, ácido 3,5- dinitrobenzoico 
e ácido pícrico
500 mL
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Índice de espuma 
de glicosídeos saponínicos 
(saponósidos)
AULA 3
ROTEIRO 1
Objetivo: avaliação semiquantitativa de glicosídeos saponínicos em drogas de origem 
vegetal.
 
Procedimento
Droga vegetal (quilaia, alcaçuz, saboeira ou salsaparrilha)
1. Pesar exatamente 0,50 g da droga pulverizada e colocar num béquer;
2. Adicionar 40 mL de água destilada e levar à fervura por 5 minutos;
3. Esfriar, decantar o extrato aquoso e filtrar em algodão para um balão volumétrico de 
50 mL;
4. Manter o pó (resíduo) no béquer;
5. Repetir a extração com 15 mL de água destilada só até o início da fervura, esfriar e 
filtrar os extratos aquosos para o balão volumétrico até completar o volume (até o menisco);
6. Numerar 8 tubos de ensaio de 1 a 8;
7. Colocar 5,0 mL de água destilada em todos, exceto no primeiro tubo de ensaio;
8. Colocar 5,0 mL de extrato saponínico no primeiro tubo;
9. Colocar 5,0 mL de extrato saponínico no segundo tubo e homogeneizar o conteúdo 
delicadamente;
10. Transferir 5,0 mL de solução do segundo tubo para o terceiro e homogeneizar 
delicadamente;
Manual de Estágio
11. Continuar o processo em sequência, até o oitavo tubo, utilizando a mesma pipeta;
12. Desprezar 5,0 mL do último tubo para que todos fiquem com o mesmo volume;
13. Agitar vigorosamente todos os tubos no sentido longitudinal, ao mesmo tempo, por 
15 segundos;
14. Deixar o conjunto em repouso por 15 minutos;
15. Observar qual dos tubos apresenta uma camada de espuma de 1 cm de espessura.
Tubo nº 1 2 3 4 5 6 7 8
Vol. 
extrato 5 mL 5 mL
5 mL do 
tubo 2
5 mL do 
tubo 3
5 mL do 
tubo 4
5 mL do 
tubo 5
5 mL do 
tubo 6
5 mL do 
tubo 7
Vol. 
água
(mL) 0 5 5 5 5 5 5 5
Obs.: desprezar 5 mL do tubo 8 para uniformizar os volumes.
Questões
1. Calcule o índice de espuma.
2. Explique a formação de espuma persistente dessa droga vegetal.
Materiais Quantidades
Droga vegetal: quilaia 200 g *
Espátula 1
Béquer 250 2
Béquer 100 2
Proveta 50 ou 100 mL 1
Funil de vidro 2
Balão volumétrico 50 mL 2
Serviço Social
Papel de filtro (médio) 4
Algodão Porção 
Bastão de vidro 2
Suporte universal 1
Argolas 1
Pipeta 5 ou 10 mL 4
Tubos de ensaio iguais 
(pelo menos 6 e 6 iguais) 12
Suporte para tubo 1
Pera de borracha 1
Água destilada 2 L*
Equipamentos Quantidades
Manta de aquecimento 1
Balança técnica 2 *
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Identificação 
química de alcaloides
AULA 3
ROTEIRO 2
Objetivo: identificar a presença de alcaloides em drogas de origem vegetal.
 
Procedimento
Droga vegetal (jaborandi, boldo ou quina)
1. Colocar 1 g da droga pulverizada em um béquer;
2. Adicionar 30 mL de solução de HCl a 1%;
3. Aquecer a mistura brandamente por 3 minutos;
4. Esfriar e filtrar em algodão para um funil de separação;
5. Alcalinizar o filtrado com solução de hidróxido de amônio a 10% (verificar com papel 
de tornassol), utilizando como indicador o papel de tornassol;
6. Extrair o filtrado alcalinizado com 2 porções de 3 mL cada de clorofórmio;
7. Filtrar os extratos orgânicos em algodão para um béquer (se necessário – caso 
emulsionar);
8. Evaporar o clorofórmio em banho-maria;
9. Redissolver o resíduo resultante em 0,5 mL de HCl diluído;
10. Pegar 4 lâminas de microscopia limpas e em cada uma delas colocar uma gota da 
solução ácida obtida;
11. Ao lado da gota da solução ácida, colocar uma gota de um dos reativos (Mayer, 
Bertrand, Dragendorff e Bouchardat)*; 
Serviço Social
12. Unir as duas gotas com um bastão de vidro;
13. Observar e anotar os resultados.
Questões
1. Explique a escolha dos solventes das extrações relacionadas às características químicas.
2. Qual o fundamento das reações de identificação?
Materiais Quantidades
Droga vegetal: jaborandi 200 g *
Espátula 1
Béquer 250 2
Béquer 100 2
Proveta 50 ou 100 mL 1
Funil de vidro 2
Funil de separação 2
Papel de filtro (médio) 4
Algodão Porção 
Bastão de vidro 2
Suporte universal 1
Argolas 1
Pipeta 5 ou 10 mL 4
Papel de tornassol vermelho Porção 
Lâminas de vidro (tipo microscopia) 8
Grau e pistilo de vidro 1
Ácido clorídrico 10% 1 L*
NH4OH 20% 1 L*
Clorofórmio 500 mL*
Reativos de: Dragendorff, Bouchardat, 
Bertrand, Mayer 50 mL*
Álcool 96 300 mL
Manual de Estágio
Equipamentos Quantidades
Manta de aquecimento 1
Banho-maria grande ou chapa 
de aquecimento grande 1 ou 2*
 Balança técnica 2 *
Descarte do material utilizado conforme Normas Internacionais de Segurança.
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Serviço Social
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Extração de 
cafeína do guaraná – método 
gravimétrico
AULA 4
ROTEIRO 1
Objetivos: quantificação e identificação de cafeína no pó de guaraná – Paullinia 
cupana Khunt.
Procedimento
1. Pesar cerca de 3 g de pó de semente de guaraná (triturada) e transferir para um funil 
de separação; 
2. Adicionar 10 mL de clorofórmio, 3 mL de hidróxido de amônio a 10% e agitar 
vigorosamente por 5 minutos; 
3. Deixar em repouso por 15 minutos e filtrar o clorofórmio para um béquer através de 
algodão hidrófilo;
4. Repetir a extração com 1 porção de 3 mL de clorofórmio;
5. Em placa aquecedora, evaporar os extratos clorofórmicos reunidos até a secura;
6. Juntar ao resíduo 10 mL de água destilada, 0,5 mL de ácido sulfúrico a 10% e ferver 
suavemente por 2 minutos;
7. Resfriar e em seguida filtrar em papel de filtro para um funil de separação;
8. Alcalinizar o filtrado com hidróxido de amônio a 10% (verificar com papel tornassol) 
e extrair a cafeína com 2 porções de 3 mL de clorofórmio; 
9. Recolher os extratos clorofórmicos, filtrando-os através de algodão hidrófilo para 
um béquer tarado;
Manual de Estágio
10. Evaporar o extrato clorofórmico em banho-maria (placa aquecedora) e levá-lo a 
uma estufa a 90 ºC por uma hora; 
11. Esfriar em dessecador, pesar novamente e calcular a quantidade percentual de 
cafeína extraída da semente do guaraná.
12. Realizar as reações de identificação da cafeína estabelecidas pela Farmacopeia 
Brasileira, especialmente a reação da murexida (clorato de potássio, aquecimento e ácido 
clorídrico concentrado) – (pesquisar na Farmacopeia).
Anotar todos os resultados.
Questões
1. Discuta a diferença de extração entre os alcaloides e as metilxantinas.
2. Explique as reações de identificação dos alcaloidese das metilxantinas.
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Materiais Quantidades
Balança técnica 2 *
Droga vegetal: guaraná 200 g *
Espátula 1
Béquer 250 2
Béquer 100 2
Manta de aquecimento 1
Proveta 50 ou 100 mL 1
Funil de vidro 2
Funil de separação 2
Papel de filtro (médio) 4
Serviço Social
Algodão Porção 
Bastão de vidro 2
Suporte universal 1
Argolas 1
Pipeta 5 ou 10 mL 4
Papel de tornassol vermelho Porção 
Ácido clorídrico 10% 1,5 L*
NH4OH 20% 1,5 L*
Clorofórmio 1000 mL*
Clorato de potássio 3 g*
Banho-maria grande ou chapa 
de aquecimento grande 1 ou 2*
HCl concentrado 200 mL
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Extração de óleos 
essenciais por hidrodestilação 
(Clevenger)
AULA 4
ROTEIRO 2
Objetivo: avaliar a quantidade de óleo essencial presente em plantas e drogas de origem 
vegetal.
Procedimento
1. Colocar _______ g da droga rasurada ou moída num balão de destilação;
2. Adicionar água destilada até metade da capacidade do balão;
3. Acoplar o aparelho de Clevenger;
4. Aquecer o balão até a ebulição e mantê-la por 2 horas, no mínimo;
5. Deixar esfriar e recolher o óleo essencial obtido e verificar o volume no tubo graduado;
6. Calcular a % de óleo essencial obtido.
Questões
1. Explique o princípio da hidrodestilação.
2. Qual o rendimento do procedimento? 
Serviço Social
Materiais Quantidades
Balança técnica 1 *
Droga vegetal: camomila, cravo-da-índia 
ou anis-estrelado
200 g *
Espátula 1
Aparelho de Clevenger 1 ou 2*
Manta de aquecimento 1 ou 2*
Solvente orgânico 1 L
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Manual de Estágio
Instituto de Ciências da Saúde
Disciplina: Farmacognosia Aplicada
Título da Aula: Extração de óleos 
fixos – extração sólido-líquido
AULA 4
ROTEIRO 3
Objetivo: avaliar a quantidade de óleos fixos em drogas de origem vegetal.
 
Procedimento
1. Colocar dentro do cartucho de extração a droga triturada, aproximadamente ¾ do 
recipiente e pesar;
2. Cobrir com algodão;
3. Colocar o cartucho no aparelho de Soxhlet;
4. Adicionar éter de petróleo ou outro solvente orgânico volátil suficiente para 1,5 
(vez) o refluxo;
5. Acoplar o condensador e aquecer a ebulição por aproximadamente 3 refluxos;
6. Deixar esfriar e retirar o cartucho;
7. Deixar secar, até a próxima aula, num vidro de relógio etiquetado;
8. Após o período esperado, pesar o cartucho sem o algodão.
Questões
1. Calcule o teor de óleo fixo extraído.
2. Discuta o fundamento da extração por Soxhlet.
Serviço Social
Materiais Quantidades
Balança técnica 1 *
Droga vegetal: amendoim (cru) 
ou soja (cru) 200 g *
Espátula 1
Manta de aquecimento 1 ou 2*
Aparelho de Soxhlet 1 ou 2*
Solvente orgânico 1 L
Observações:* = por classe, os outros por grupo, todos os reativos devem estar com 
pipetas de 2 mL __________
Manual de Estágio
BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA
BRUNETON, Jean. Pharmacognosie, Phitochini e Plantas Medicinales. 2 ed. Tec. Doc. 
Paris. 
COSTA, A. F. Farmacognosia, 3 volumes. Fundação Calouste Gulbenkian. Lisboa, última 
edição.
FARMACOPEIA BRASILEIRA da 1ª edição (1929) a 6ª edição (2019).
OLIVEIRA, F.; AKISSUE, G. Fundamentos de Farmacobotânica. São Paulo: Livraria 
Atheneu Editora.
SIMÕES, C. M. O. et al. Farmacognosia: do Produto Natural ao Medicamento. Porto 
Alegre: Artmed, 2017.
TYLER, E. V.; SPEEDLE, K. M.; ROBBERS, E. J. Farmacognosia e Farmacobiotecnologia. 
Editorial Premier. 1997.