Relatório aula Pratica de Bioquímica Moletabólica

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UNIVERSIDADE PAULISTA - UNIP
CURSO: FARMÁCIA
RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA DE BIOQUÍMICA METABÓLICA
ALUNA: CLAUDINÉIA CRISTINA VIANA DOS SANTOS
RA: 2129422
COSMÓPOLIS- SP
2022
INTRODUÇÃO
A Bioquímica Metabólica trata química da vida e dos processos metabólicos, catabólicos e anabólicos do corpo humano.
A bioquímica estuda as estruturas moleculares, e os processos químicos, só que essas e estes processos estão relacionados a vida.
BIO = VIDA QUÍMICA = BIOQUÍMICA
Então Bioquímica nada mais é que a estrutura de todos os processamentos químicos que existem no corpo relacionado a nossa vida. E a interação que existe no metabolismo energético vinculado a Bioquímica, por isso Bioquímica Metabólica. A vida depende reações bioquímicas então ela se tornou uma linguagem essencial na área da saúde. Então entender a bioquímica metabólica é fundamental para saber como o organismo reage as diversas situações do nosso dia a dia, e como que nós utilizamos essa energia para executar coisas da nossa vida.
De modo geral, ela consiste do estudo e estrutura da função metabólica de componentes celulares e virais, como proteínas (proteômica),enzimas (enzimologia), Carboidratos, lipídios, ácidos nucléicos ( biologia molecular) entre outros.
A espectrofotometria é uma técnica utilizada para medir o quanto uma substância química absorve a luz, ajustando a intensidade quando um feixe de luz passa através da solução da amostra. O princípio básico é que cada composto absorve ou transmite luz em certa amplitude de comprimento de onda. Assim, a medida também pode ser utilizada para medir a quantidade de uma substância química conhecida. 
O procedimento utiliza a propriedade das soluções de concentrar ou conduzir a luz para quantificar reações. Na prática a quantidade de luz concentrada ou conduzida é proporcional a concentração da substância em solução. Quanto uma impressão digital, saber a cor absorvida, nos permite identificar materiais diferentes.
Quanto mais agrupada for a solução, maior será a entrada de luz. Por outro lado, a cor da solução é definida pela cor da luz transmitida.
AULA 1 ROTEIRO 1
TÍTULO DA AULA: DETERMINAÇÃO DA GLICEMIA
Para a realização da análise foram utilizados os seguintes materiais:
· Espectrofotômetro
· EPI’s
· Banho maria
· Tubos de ensaio
· Micropipetas
· Pipeta graduada
· Ponteiras
A glicose é um monossacarídeo, ou seja, um carboidrato simples que apresenta fórmula molecular C₆H₁₂O₆ . Ela é composta por 6 carbonos, sendo assim, um tipo de hexose. Essa molécula é polar e não é capaz espalhar-se pela membrana plasmática.
Ao deglutir, o seu corpo quebra os carboidratos em glicose e depois conduz para as células através da corrente sanguínea, e ela é transformada em energia. No entanto, para usar a glicose, o corpo precisa de insulina, que é um hormônio produzido pelo pâncreas. 
 A glicose, principal fonte de energia celular, é conduzida na maioria das células por difusão facilitada, através de proteínas transportadoras presentes na membrana plasmática. Está determinada a existencia de urna familia de transportadores (GLUT1-GLUT7), com propriedades funcionáis e distribuição tecidual distintas. Por outro lado, em epitelios intestinal e tubular renal, o transporte é contra gradiente e ligado ao Na+ na membrana apical das células através de cotransportadores (SGLT1-SGLT2), com posterior difusão para o intervalo através de GLUTs presentes na membrana basolateral. As alterações fisiopatológicas do transporte de glicose passaram a ser analisadas através da análise dos transportadores, visando futuras abordagens preventivas ou terapêuticas. Uma alteração em um aminoácido do SGLT1 já foi descrita na malabsorção de glicose/galactose. Na glicosúria renal familiar, a presença do SGLT2 e do SGLT1 parece ser essencial, seja por perda da capacidade de transporte, seja por diminuição na combinação do transportador. A síndrome de De Vivo, descrita em recém-nascidos com quadro convulsivo, e hipoglicorraquia na vigência de normoglicemia, foi atribuída a uma redução no conteúdo de GLUT1, nas células endoteliais da barreira hematoencefálica. Extensas investigações têm sido coordenada para avaliar o papel do GLUT4 em alterações de sensibilidade insulínica, tais como diabete melito tipo 2 (DM2). Os estudos revelam que no DM2, o GLUT4 reduz-se tocantemente o que desempenha um importante papel na resistência insulínica. Na obesidade, o conteúdo de GLUT4 não está diminuído enquanto a sensibilidade à insulina estiver preservada. É plausível propor-se que a modulação do GLUT4 seja gerada por uma conjunção de fatores que expressam a sensibilidade celular à insulina. Além disso, o DM altera o conteúdo de GLUT 1 e GLUT2 no túbulo renal, mas o papel dessa modulação no processo de reabsorção da glicose ainda é desconhecido. (MACHADO.Ubiratan.Fabres)
Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia 42, 413-421, 1998.
Para a prática do procedimento de análise, foi usado o Kit Labtest de sistema enzimático colorimétrico, com o principio de glicose oxidase. Começamos identificando 3 tubos de ensaio com as letras B (branco), T (teste) e P (padrão), em seguida, com o auxílio da pipeta , foi adicionado 1ml do reagente de cor em cada um dos tubos. E em seguida foram adicionados 10ul de solução padrão no tubo identificado com P e 10ul de amostra no tubo identificado como T. Então homogeneizamos por agitação e levamos para banho Maria á 37°C.
Os reagentes de cada tubo foram transferidos para cubetas e cada uma simultaneamente identificada conforme a mesma ordem, logo em seguida, levadas ao espectrofotômetro para procedimento de leitura, utilizando a amostra B para zerar o aparelho e as amostras P e T para leitura de absorbância em comprimento de onda de 510nm, valores obtidos e anotados e então calculados da seguinte forma:
Glicose (mg/dL) =    Absorbância da amostra     x 100
                                  Absorbância do padrão
O resultado foi:
Glicose (mg/dL) = 2,820 x 100 = 118,13
 2,387
 
 Espectrofotômetro 
Tubos de ensaio com as amostras em Banho Maria a 37°C 
Questões
(01) Homem de 50 anos, 70 kg, altura 1,60 m, portador de dislipidemia, sem histórico familiar de DM. Relatou em consulta um serviço de emergência polidipsia, poliúria, cansaço e cãibras. No exame físico, verificou-se pele seca, “acantosis nigricans” no pescoço, normotensa e perda de 8 quilos em um mês. Notou-se hálito cetônico. Discutir como que o exame de glicemia poderá nortear a consulta médica.
Resposta: Nesse exame o médico irá constatar a possibilidade de a pessoa estar pré-diabética ou com diabetes. Todos sintomas de diabetes mais hálito cetônico, se dve a necessidade do corpo consumir glicose da gordura, devido a falta de insulina. O exame ajudaria a indicar a falta de insulina.
(2) GFD, feminino, 30 anos, acima do peso correto para sua altura, foi fazer a segunda consulta após ter engravidado. Feito o exame de glicemia em jejum que teve como resultado 150mg/dl. Discutir o possível diagnóstico e sua futura dieta alimentar e estilo de vida.
Resposta: diagnóstico do DMG pode acontecer na primeira consulta do pré-natal a partir do resultado da glicemia de jejum (> 95mg/dl) ou na 24ª semana de gestação após a consumação do teste oral de tolerância à glicose (TOTG). Esse teste é concretizado com a ingestão de 75 g de glicose após 8h de jejum, bastando apenas um valor alterado para o diagnóstico ser confirmado (jejum até 92 mg/dl, 1h depois até 180 mg/dl e 2h depois até 153 mg/dl). As orientações nutricionais incluem evitar ganho de peso excessivo para reduzir os riscos de complicações fetais, Além disso, a dieta para diabetes gestacional deve apresentar uma distribuição equilibrada de micronutrientes como 40% a 55% de carboidratos, 15% a 20% de proteínas e 30% a 40% de gorduras, fracionadas de 5 a 6 vezes ao dia. O consumo de alimentos ricos em fibras deve ser priorizado, como cereais integrais,hortaliças e frutas com bagaço. O ingestão de açúcar simples de adição e de bebidas açucaradas precisa ser controlado na dieta para diabetes gestacional. As bebidas devem ser consumidas in natura e, caso não seja possível, o uso de adoçantes artificiais como stévia e sucralose é permitido. Já as carnes devem ser magras, ou priorizar por aves, peixes e proteínas de origem vegetal como feijão, lentilha, ervilha, soja e grão-de-bico. Os alimentos ricos em gordura, como frituras, molhos à base de laticínios, fast food e doces açucarados não devem ser consumidos. A prática de atividade física traz muitos benefícios e ajuda no controle do DMG. Isso porque os exercícios estão relacionados a um melhor estado de humor, bem-estar físico e psicológico. Eles também auxiliam em um trabalho de parto mais rápido e tranquilo, que deve ser realizado pela gestante com recomendação médica e acompanhado por profissional. (1)*
AULA 1 ROTEIRO 2: DETERMINAÇÃO DE GLICOSÚRIA
Para a realização da análise foram utilizados os seguintes materiais:
· Tira de teste para glicosúria
· Urina 
Glicosúria é a comparecimento de glicose (um tipo de açúcar) na urina. É uma condição comum aos pacientes que tem diabetes mellitus não controlada, e é muito comum em gestante, pela diminuição do liminar de excreção. A glicosúria pode ser devida à saturação da capacidade reabsortiva de glicose pelos túbulos proximais renais em caso de hiperglicemia (aumento na concentração da glicose no sangue) ou secundários a danos nos referidos túbulos (glicosúria de origem renal).
É muito importante para o diabético monitorar seus níveis de glicose no sangue. O exame de glicosúria é uma forma indireta de avaliar um aumento de glicemia (glicose no sangue). Esta prática é mais aceitada em decorrência de seu baixo custo, por ser menos agressiva e dolorida se confrontada à medição direta da glicemia que requer a perfuração, geralmente do dedo, para a obtenção do sangue a ser testado. Pode ser usado também quando não se tem acesso às formas mais eficazes de diagnóstico de elevação da glicemia. Fazer o auto monitoramento reduz entre 25 e 40% o número de internações por complicações por diabetes.
Nas pessoas saudáveis os rins trabalham como um filtro do sangue, retirando as substâncias inúteis ao organismo, eliminando-as pela urina e reaproveitando as necessárias, como a glicose, que continuam no sangue. (3)*
Para o procedimento foi utilizado o Teste da Tira REATIVA DE Urina da marca Uri Color Check. Então foi feita a imersão rápida da tira na amostra de urina, avaliando conforme a escala de cores fornecida pelo fabricante.
O resultado foi NEGATIVO, pois a glicemia era abaixo do limiar renal.
 
 Teste da Tira Reativa Resultado do Teste da Tira Reativa
QUESTÕES
(1) M.N.B., sexo feminino, 50 anos, obesa, faz controle para diabetes mellitus tipo 2. Apresentou A1c (hemoglobina glicada) de 8,5%, apesar da dieta e da medicação (metformina). Sua pressão arterial era de 160/95 mmHg, colesterol total (CL-T) 270 mg/dL, triglicerídeos (TG) 220 mg/dL, HDL 35 mg/dL e LDL 180 mg/dL. Esta paciente poderá ter glicosúria? Por quê? Quais as possíveis condutas médicas?
Resposta: Sim esta paciente poderá ter Glicosúria. Porque a glicose na urina aparece se a quantidade de glicose no sangue excede a capacidade de reabsorção renal pelos transportadores de glicose e sódio. O tratamento da glicosúria muda muito de acordo com a causa do problema, mas como na maior parte das vezes é uma alteração gerada pela diabetes, é comum que a pessoa precise fazer alterações na dieta, usar medicamentos antidiabéticos ou insulina.
(2) P.L foi fazer Check up de rotina e no exame de urina foi demonstrada a presença de proteínas (microalbuminúria), além de apresentar glicosúria. Discutir a relação destes dois achados. 
Resposta: Microalbuminúria, é quando pequenas quantidades de albumina são descobertas na urina, podendo significar que a lesão renal ainda está inicial ou uma albuminúria situacional, que acontece após exercício físico intenso e em infecções urinárias. O tratamento para albuminúria depende da sua causa e é feito de acordo com a orientação do nefrologista. Em geral, os pacientes que exibem microalbuminúria respondem de forma satisfatória aos medicamentos prescritos para a doença de base. Já em casos mais graves, pode ser necessária a reposição de proteína.
AULA 1 ROETIRO 3: DETERMINAÇÃO DE COLESTEROL TOTAL NO SANGUE
O colesterol é um composto adiposo utilizado para produzir as membranas celulares e de alguns hormônios. Existem diferentes tipos - HDL, LDL e VLDL -, sendo que o organismo produz a maior parte do que precisa. Porém, o colesterol também é encontrado em alimentos de origem animal, como ovo, carne e leite.
Lipoproteínas de baixa densidade (LDL) ou colesterol “ruim” - pode prender-se nas paredes das artérias desenvolvendo placas de gordura. Com o passar do tempo, é possível que elas atrapalhem ou evitem a passagem do sangue provocando angina (dor no peito) ou até mesmo um infarto (ataque cardíaco). Quanto mais elevado o nível de LDL, maior é o risco de desenvolver uma doença cardíaca. Para a maioria das pessoas, o ideal é que a taxa de LDL fique abaixo de 130 mg/dl.
Lipoproteínas de alta densidade (HDL) ou colesterol “bom” - ajuda a retirar o excesso de colesterol do sangue. Quanto mais alto os níveis de HDL, menores são os riscos de desenvolver uma doença cardíaca. O ideal é que a taxa de HDL seja superior a 40 mg/dl.
Lipoproteína de densidade muito baixa (VLDL) - este é um tipo de colesterol que carrega mais triglicérides, outro tipo de gordura presente no sangue, do que colesterol. Os níveis mais altos de VLDL podem causar acúmulo de gordura nas artérias, o que também aumenta os riscos de doenças cardíacas.
Colesterol alto é uma das principais causas de problemas cardíacos no país. O colesterol elevado não provoca sintomas, então não deixe para se cuidar só depois de alguma complicação. E quem pensa que esta é preocupação somente dos adultos está muito enganado. Cada vez mais crianças também estão sofrendo desse mal. (MARTINEZ, Tania L. Rocha) Arq Bras Cardiol, v. 80, n. 6, p. 631-4, 2003.
Um estilo de vida mais saudável pode ajudar a reduzir a taxa do colesterol. A prática de exercícios físicos pode elevar a concentração de HDL no sangue e diminuir a de LDL.
Para o procedimento foi utilizado:
· Kit de determinação de colesterol
· Soro 
· Cubetas
· Papel absorvente
· Pipetras automáticas 
· Tubos de ensaios
· Estante
· Espectrofotômetro
Procedimento 
Soro: 0,25 ml
Precipitante: 0,25 ml
Foi tomada 3 tubos de ensaio e procedido da seguinte forma:
Foi preciso agitar vigorosamente durante 30 segundos, a agitação e necessária para obtenção de resultados consistente.
Então foi centrifugado a 3.500 rpm por 15 minutos para obter um sobrenadante límpido. Em seguida foi pipetado o sobrenadante logo após a centrifugação, tomando o máximo de cuidado para não ressuspender o precipitado, a sim evitando falsos resultados. Colorimetria, foi utilizado o Reagente 1- Colesterol Liquiform-Labtest (ref.76).
Foi misturado então e incubado em Banho-maria a 37°C durante 10 minutos, com o nível da água superior ao nível do reagente nos tubos de ensaio. Foi determinada a absorbância do teste e padrão em 500nm e acertado o zero com o branco. O procedimento sugerido para a medição é apropriado para fotômetros cujo volume mínimo de solução para leitura é igual ou menor que 1,0 mL. O procedimento feito para a medição foi o espectrofotômetro e não fizemos colesterol total, apenas HDL e o resultado foi o seguinte:
 
 Resultado colesterol
 
Questões
(1) Um paciente de 60 anos procura o médico endocrinologista para acompanhamento de seu tratamento de diabetes mellitus tipo 2. Parou de fumar há pelo menos 30 anos. Já faz uso de metformina e atorvastatina. Sua PA: 138x84 mm HG, está acima do peso para o seu biótipo e tem cintura 140 cm. Seus exames mais recentes apresentam:
Glicose: 116mg/dl
HbA1c: 6,1%
Colesterol total: 220 mg/dl
HDL: 36mg/dl
LDL colesterol: 98 mg/dl
Triglicérides: 360 mg/dl
TGO: 45 mg/dl
TGP: 56 mg/dl
TGP: 56 mg/dl
Ureia: 23 mg/dl
Creatina: 1,1 mg/dl
Quais as metas que este paciente deve alcançar e por quê? Discutir síndrome de resistência á insulina por obesidade.
Resposta: A oposição à insulina acontece quando a ação desse hormônio, de levar a glicose do sangue para o interior das células, está diminuída, fazendo com que a glicose se acumule no sangue, dando origem a uma diabetes.
A insulina é um hormônio anabólico, produzido no pâncreas pelas células beta. É um polipeptídio responsável pela redução da glicemia ao gerar a entrada da glicose nas células e é capaz de regular vários processos metabólicos. A resistência à insulina, distinta pela diminuição ou perda da competência da insulina em instigar a utilização da glicose, pode ocorrer por alguma ausência no receptor de insulina ou por alguma alteração no mecanismo de sinalização. O aumento da glicemia leva ao quadro de diabetes mellitus tipo 2. É o tipo de diabetes mais comum e está coligado ao sedentarismo e a dieta hipercalórica, que ocasionam a obesidade. A obesidade é uma doença multifatorial unificada com o aumento do risco de outras patologias crônicas e exerce importante função na produção de adipocinas pró e anti-inflamatórias. As proteínas pró-inflamatórias tomar parte da inflamação sistêmica, levando o desenvolvimento da resistência a insulina e logo a hiperinsulinêmica, que muitas vezes está associada à obesidade. Esta agregação leva à vasoconstrição, retenção de sódio e acionamento do sistema simpático, que predispõem à hipertensão arterial. Estas comorbidades formam a Síndrome Metabólica.
(2) Apesar de ser considerado maléfico para a saúde, o colesterol é uma importante molécula para o nosso organismo. Discorra sobre a importância do colesterol para as células.
Resposta: Ele é um componente importante da membrana plasmática das células, das membranas das organelas celulares e da bainha de mielina dos neurônios, atua como precursor dos sais biliares e da vitamina D e também é utilizado na síntese de alguns hormônios.
AULA 2 ROTEIRO 1
DETERMINAÇÃO DE TG NO SANGUE
Triglicérides são gorduras presentes na corrente sanguínea e tem relação direta com a síndrome metabólica, como obesidade, diabetes e resistência insulínica, risco cardiovascular, hipertensão arterial e dislipidemia, incluindo a hipertrigliceridemia. Os níveis normais de triglicérides mudam de acordo com a faixa etária e também com o tempo de jejum. Níveis baixos de triglicerídeos não são críticos para o organismo. Já níveis acima de 150 mg/dL, representam triglicérides elevados em adultos e, portanto, necessitam ser tratados com melhora dos hábitos de vida, abrangendo dieta mais saudável, prática de atividade física regular e diminuição da ingestão de bebidas alcoólicas. Em crianças e adolescentes os níveis de normalidade são mais baixos.
O abuso de carboidratos, como massas, açúcares e bebidas alcoólicas, é a principal causa de hipertrigliceridemia. A falta de atividade física pode colaborar para o aumento dos níveis sanguíneos de triglicérides.
Há uma classe rara, a hipertrigliceridemia familiar, que é genética e não guarda relação estreita com a alimentação, mesmo podendo ser agravada por maus hábitos de vida. O aumento dos níveis de triglicérides ocorre por uma modificação genética e as taxas de triglicérides são muito elevadas.
A dieta para abrandar os triglicerídeos deve ser pobre em alimentos com açúcar e farinha branca, como pães brancos, doces, salgados e bolos. Esses alimentos são ricos em carboidratos simples, que beneficiam o aumento dos triglicerídeos no sangue. 
Para o procedimento foi utilizado:
· Kit de determinação de triglicérides
· Soro (normal ou patológico)
· Cubetas
· Papel absorvente
· Pipetas automáticas
· Tubos de ensaio
· Estante 
· Espectrofotômetro
Foi tomada 3 tubos de ensaio e procedido da seguinte forma:
Foi então na sequência bem homogeneizado e incubados os tubos durante 10 minutos a 37°C. Foi medida então a absorbância do Padrão e da amostra frente ao branco a 505 nm. A cor foi estável durante 25 minutos.
O resultado foi o seguinte:
Questões
(1) Confira as tabelas a seguir, com os valores de referência desejáveis de colesterol e TG, de acordo com a idade, pela sociedade brasileira de cardiologia, e discuta a necessidade de analisar colesterol não HDL e TG.
Resposta: 
(2) Paciente obeso, com diabetes mellitus tipo 2, relata consumo excessivo de álcool. Apresenta valores de triglicérides cronicamente acima dos 800 mg/dL. Observando-se as palmas, ao redor dos olhos, nos pés ou nas articulações, pode-se verificar xantomas ( depósitos subcutâneos de colesterol sob a forma de nódulos ou placas amareladas). Em um episódio recente foi diagnosticada pancreatite crônica, quando o nível de Triglicérides (TG0 estava superior a 1000 mg/dL. Como deverá ser a dieta ( restrição de gordura?) e controle dos outros fatores de riscos?
Resposta: O tratamento da pancreatite crônica pode ser feito com reposição de enzimas eficazes que suavizam a diarreia e a má digestão causada pela doença, assim como analgésicos para suavizar a dor abdominal. A pancreatite crônica não tem cura e na maioria das vezes é causada pelo consumo de bebidas alcoólicas ou por alterações autoimunes. É importante uma alimentação pobre em gorduras e de fácil digestão, como leite desnatado, clara de ovo, carne magra ou cereal integral, por exemplo. É muito importante não consumir substâncias tóxicas para o pâncreas, como bebidas alcoólicas e cigarro, por exemplo, pois elas podem desencadear novas crises e piorar a inflamação do pâncreas. Os fatores de riscos pode haver sangramento ou ruptura dos pseudocistos e aqueles que se aumentam podem causar dor ou bloquear o duodeno ou os dutos biliares. Por fim, as células do pâncreas que secretam insulina podem ser destruídas, o que leva a um aumento gradativo de diabetes.
Referências
1. MACHADO, Ubiratan Fabres. Transportadores de glicose. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia & Metabologia, v. 42, p. 413-421, 1998. 
2. MARTINEZ, Tania L. Rocha et al. Campanha nacional de alerta sobre o colesterol elevado: determinação do nível de colesterol de 81.262 brasileiros. Arq Bras Cardiol, v. 80, n. 6, p. 631-4, 2003.