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HEMATOLOGIA - LEUCOGRAMA Hemograma Indicações diagnostico/prognostico Patologias do circulatório, reprodutivo, tegumentar, hematopoiético, respiratório, digestivo, renal, muscular(miopatias que causa lesão significativa no músculo do animal, utiliza uma enzima de marcador específico - bioquímica clínica), nervoso, imunológico, hematopoiético, sistema imunológico (parvovirose). contra indicações Uso separado do Exame clínico Exame físico antes da solicitação do exame Posologia Quanto tempo para repetir o hemograma? Indicação para o leucograma ● Pode ser solicitado somente o leucograma Apresentação Hemograma completo { Eritrograma - é formado pelo VG OU HT(%), hemoglobina, hemácias [ cálculo dos índices hematimétricos ] - contagem de proteínas totais, contagem de reticulócito (exame a parte), aglutinação em salina ( suspeita de anemia hemolítica) { Plaquetas { Leucograma - Contagem total de leucócitos, valores relativos e absolutos e fibrinogênio Diluente utilizado para contagem - líquido de turck Contagem diferencial de leucócitos ( na lâmina em 100 células), são contados os neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfocitos, monocitos ( pode aparecer mielocitos, metamielocitos, bastonete) Respostas leucocitárias nos animais domésticos - Os leucócitos aparecerem em processos infecciosos e doenças infeciosas Leucograma Leucócitos - São as células brancas do sangue, são células de defesa - Sao divididos em granulócitos - (pmn), e células mononucleares - Granulócitos ( neutrófilos, basófilos [ equinos], eosinófilos) - Mononucleares ( linfócitos e monócitos) - não tem segmentação nuclear - Carnívoros : relação N:L > 1 ( a relação tem que ser maior que 1, ou seja em um hemograma completo na leucometria a quantidade de neutrófilos tem que ser maior que linfócitos) - Equinos: relação N:L ~ 1 ( A relação de neutrófilos e linfócitos e semelhante a 1 - a quantidade de neutrófilos é quase a mesma que linfócitos) - Ruminantes: relação N:L < 1 ( a relação neutrófilo e linfócito é menor que 1 - Os bovinos sempre tem mais linfócitos que neutrófilos ) CONCEITO DE NÚMERO RELATIVO E NÚMERO ABSOLUTO - Contagem diferencial de 100 células, o aparelho conta porcentagem. - Nunca interpreta leucograma por valor relativos - Transformar números relativos e absolutos EX: 25%( linfócitos) /100 x 10.000 - EX: 4% ( eosinófilos) / 100 x 10.000 ( N de leucócitos totais) - 1 caso para mais - Leucocitose, acima do valor de referência - 1% ( bastonete) 1 / 100 x 20.000 = 800 - 2 caso para menos - Leucopenia - 1 / 100 x 3.000 = 30 - Leucócito em maior quantidade = neutrófilos (então a leucocitose é por neutrofilia) Granulocítica para o leucograma Medula óssea Compartimento de Maturação = ( leucócitos ) metamielócitos e bastonetes Compartimento de armazenamento ( reserva) = bastonetes e segmentados Compartimento de ( proliferação) multiplicação [não devem sair da medula óssea] = mieloblasto, promielócito, mielócito ( são células precursoras) Ex vaso, lúmen do vaso e pool marginal ( fica na parede interna) / pool circulante , ficam no lúmen do vaso, quando tem uma injúria tecidual, elas migram para o tecido. Regulação da mielopoiese ( granulopoiese ) - Fatores estimulatórios - Unidades formadoras de colônia = GM-CSF, G-CSF, M-CSF ( granulocíticas monocíticas, granulocitica ou monocítica - Citocinas = Interleucinas - [ IL-1 ( Anemia da inflamação), IL-3,IL-4 e 5 ( eosinofilos e basofilos), IL-6 ( Iniciam as mitoses celulares / diminuem o tempo de maturação e trânsito/ aumenta a mobilização de leucócitos maduros na medula óssea ), - Fatores quimiotáticos - Vão para o local da lesão e estimulam a produção de células de leucócitos - IFN interferon = relacionado com a defesa imunológica do animal ex suspeita de cinomose, o clínico passa um imunomodulador, que estimula o sistema a produzir leucócitos - TNF fatores de necrose tumoral - PAF fatores de crescimento plaquetário - Complemento = proteínas do sistema complemento - Ocorre a migração no local da lesão para estimular a migração de leucócitos para o local da injúria tecidual - Liberação de alguns leucócitos do pool reserva ( que fica na medula) chega em poucas horas - Aumento da produção em 2 a 4 dias para subir na circulação - Aparecimento das novas células no sangue, 5 dias, novos leucócitos incorporados no sangue periférico - Inflamação de tec. subcutâneo ou tecidos internos - Maior resposta que Trato Urinário Inferior, Tecido Cutâneo, Superficial ou SNC - Tecido cutâneo superficial ex vacina aplicada de qualquer jeito pode evoluir para um granuloma ou fístula e forma o abscesso acumulando pus ( a aplicação causou uma reação), riscos de septicemia a entrada de bactérias na circulação e a bactéria preferem sangue. Linfopoiese ● Produção fetal na medula óssea ○ Influência do Timo ou “tecidos bursa-equivalente" exame de filhote pode ter um linfocitose ● Pós natal ○ Baço, linfonodos e outros tecidos linfóides. ex Linfócito pode esta aumentado ● Recirculação constante ○ Fase adulta o timo involui e os outros órgão linfóides param a produção de linfócitos ficando só a medula óssea levando para circulação e passam pelos: ○ Vasos ○ linfonodos e vasos linfáticos ○ ducto torácico VIDA MÉDIA DOS LEUCÓCITOS Sangue Tecido Neutrófilos 4 a 6 horas 1 a 4 dias Eosinófilos, basófilos Menos de 1 dia Semanas a meses Monócitos Menos de 1 dia Semanas a meses Linfócitos Dias a anos Recirculação (1 a 2 dias) Data: 05/01/22 Funções dos leucócitos Neutrófilos - São a primeira linha de defesa - Qualquer início de infecção, são as primeiras que migram para o local da lesão - Fazem fagocitose de bactérias até um determinado nível - Também fagocitam fungos, leveduras, parasitas ( Ex erliquiose em equinos ela parasita neutrófilos em equinos) e vírus ( inclusões víricas ex: corpúsculo de lents). - Função de citotoxidade celular, Ex lisossomos que produzem enzima digestivas que vão tentar destruir o patógeno através da produção de enzimas proteolíticas - Exemplo mostrado na imagem - infiltrado inflamatório predominantemente neutrofílico, neutrófilos com certo grau de degeneração após fagocitose e citotoxicidade ativados. No citoplasma é possível observar fagocitose de bactérias. - Animais hepatopatas com abdômen cheio de liquido, após punção do líquido peritoneal é observado um líquido predominantemente neutrofílico Fase dos neutrófilos até o momento da fagocitose - Rolamento = vai atrás do agente infeccioso - Adesão = ligação dos receptores dos neutrófilos e do agente infeccioso mandando mensagem molecular para outros leucócitos irem. Nem sempre os neutrófilos conseguem combater totalmente - Migração = de leucócitos para o local, que ocorre devido a quimiotaxia - Fagocitose Eosinófilos e Basófilos - Também são leucócitos granulócitos segmentados - Fagocitose - Defesa contra helmintos ( produção de IgE ) - Degranulação de mastócitos e basófilos ( ECF-A) - Modulação da resposta inflamatória - Os grânulos possuem histamina ( histaminase ) e liberam para fora da célula e causa reação de hipersensibilidade. - Fagocitose de complexos antígeno-anticorpo - Inibe degranulação de mastócitos e basófilos - Em casos de verminoses para equinos é observado um aumento de basófilos é uma basofilia. Basofilia citoplasmática é um aparecimento de vacuolização citoplasmática, e ele fica azulado. - Imagem abaixo - Eosinófilo de cão - Eosinófilo de de bovino tem grânulos robustos e alaranjados - Eosinófilo de gato, bem pontilhado - Eosinófilo de equino Linfócitos - Estão relacionados com a defesa imunológica do organismo - Imunidade celular ( linfócitos T) - Rejeição tecidual, hipersensibilidade tardia( demora aparecer, ex alergia ), organismo intracelulares, neoplasia - Imunidade humoral ( linfócitos B e plasmócitos ) - Recirculam, vida média de meses a anos - Em um linfócito normal quase não se observa um citoplasma. Monócitos - Possuem uma melhor atividade de fagocitose - Monócito ativado, com citoplasma basofílico e bolotas brancas( vacuolização citoplasmática. - Se transformam em macrofagos em tecidos - Fagocitam microorganismos intracelulares ( fungos, vírus e certas bactérias) - Faz filtração de toxinas e bactérias ( fígado e pulmão) - Inflamação ( crônico) - Liberação de enzimas, IFN, IL-1, complemento(proteínas),PG (prostaglandinas), etc - Remoção de debris celulares Leucograma Leucócitos totais - Dependem de: - Espécie e idade do animal - Variação circadiana e sazonal - Condição fisiológica - Condição patológica - Nível de produção e liberação dos leucócitos pela medula óssea. - Relação entre o pool marginal (endotélio) e o pool circulante (lumen) - Vida média dos leucócitos na circulação - Migração para os tecidos - Tipo celular predominante. EX: Leucocitose causa por eosinofilia Leucocitose - Fisiológica - Excitação/medo - Exercício extremo - Gestação - Parto - Patológica - Inflamação, infecção - Leucograma de estresse - Necrose tecidual - Processos imunomediados . Ex anemias hemolíticas - Leucemia (altamente significativa), etc. 17/01/22 Leucopenia Diminuição do número global dos leucócitos - Depressão na produção de leucócitos por parte da medula óssea o que causa essa depressão são toxemia (picada de cobra), infecções virais ( são observados diminuição do número global de leucócitos e leucopenia , porém não é regra. - Causas de degeneração ( mielofibrose, mielonecrose ) a medula amarela com o passar da idade vai deixando de ser medula óssea vermelha e se torna medula óssea amarela predominando sobre a medula vermelha, e começa fibrosar causando diminuição do número de leucócitos globais ( ocorre uma diminuição da calcificação). - Depleção ( consumo, infecções agudas), Patologia de consumo são aquelas que destroem o que consomem rapidamente os leucócitos não dando tempo para medula de repor as células a tempo, ocorre em infecções agudas - Destruição (imunomediada - anemias hemolíticas imunomediadas de origem infecciosa ou não infecciosa, radiação - ela destrói as células de defesa, exemplo é a radioterapia em que o paciente fica com a imunidade baixa devido ao tratamento. - Marginação de neutrófilos ( septicemia, piometra quando não tratada a tempo, os neutrófilos ficam circulantes ) - Agentes químicos e físicos - Quimioterápico, antibiótico prolongado, administração de estrógeno, radiação, etc - Inflamações agudas ( para os bovinos e equinos a leucopenia é muito observada em inflamações agudas ) - Doenças virais . Ex cinomose - leucopenia por neutropenia ou uma leucopenia por linfopenia, porém não é regra. - Neoplasia hematopoiéticas - Infecções bacterianas graves ( endotoxemia, septicemia), antibioticoterapia que não resolve o problema e é utilizado muitos antibióticos e pode ser uma infecção bacteriana que envolve endotoxemia que evolui para uma septicemia. Leucograma - Variações numéricas de tipos celulares específicos - Aumento - Neutrofilia - Eosinofilia - Basofilia, aumento do número de basófilos ( não confundir com basofilia citoplasmática ) - Linfocitose ( cuidado com animal recém vacinado) - Monocitose ( Inflamação crônica ) - Diminuição - Neutropenia - Eosinopenia ( não tem significado laboratorial muito grande ) - ________ - Linfopenia - ________ monocitopenia não tem significado clínico. Situações de leucocitose e leucopenia Neutrofilia - Inflamação, infecção por algum agente - Necrose - Distúrbios imunomediados - Estresse, hiperadreno ( neoplasia de glândulas ou causas iatrogênicas ) - Leucemia Neutropenia - Inflamação aguda ( bovinos) - Infecções virais ( exame de cinomose leucopenia por neutropenia ) - Endotoxemias ( causam granulações tóxicas) - Intoxicação por drogas ( plantas tóxicas ) e causa iatrogênica por droga com uso indiscriminado de drogas - Leucemia Neutrofilia Normal - Leucocitose fisiológica, por estresse, há uma mobilização dos três compartimentos de proliferação, maturação e armazenamento, é feita correção e os valores voltam ao normal Inflamação aguda - Os compartimentos de proliferação e maturação são tocados, vão do lúmen dos vasos para os tecidos Inflamação crônica - Mobilização dos três compartimentos de proliferação, maturação e armazenamento Cortisol - Animais que passaram por um estresse muito agudo, prol. e mat. Neutrofilia fisiologica - Leucocitose por estresse, prol,mat e armaz. *O gato tem mais neutrófilos no compartimento marginal. *Leucocitose fisiologica - gato Leucocitose com 200.000 leucócitos totais de um cão - reação leucemóide ( confirmar através de esfregaço sanguíneo, quantidade de células precursoras da medula em uma quantidade maior que as maduras) realizar um mielograma para saber a classificação da leucemia. *CÃO - Nos processos inflamatórios agudos é observado leucocitose por neutrofilia, mas o cão tem um I.A mas apareceu neutropenia então o animal tem uma reserva medular moderada a alta e a capacidade de de resposta é rápida porém no leucograma não se observa neutrofilia mas sim neutropenia então a interpretação é uma lesão grave porque mesmo o animal tendo uma boa resposta boa e rápida os neutrófilos não estão chegando a circulação então a causa primária que está causando a lesão é grave. *Bovino - É um achado comum porque diferente das outras espécies em um bovino normal no hemograma completo é observado uma maior quantidade de linfócitos e uma menor de neutrófilos na contagem de 100 células. Ex animal saudável em um exame de rotina. Embora seja comum, é grave. A imagem a seguir é importante para entender os desvios. *Mieloblasto, célula precursora de neutrófilo. *Neutrófilo hipersegmentado significa que a função está muito diminuída, é velha que não desempenha a função de um neutrófilo maduro. Metamielócito Imagem de um metamielócito, para não confundir comparar com um neutrófilo normal, o metamielócito é maior com um núcleo em forma de feijão e uma discreta basofilia citoplasmática Bastonete Quando tem um aumento no número de bastonetes no leucograma é uma leucocitose por neutrofilia com desvio à esquerda regenerativo Desvios - Desvio a esquerda ( presença de células jovens que se sobrepõe a célula madura) - Regenerativo: - Leucocitose com neutrofilia e predomínio de formas maduras. - Leve : tem bastonetes - Moderado : Bastões e metamielócitos - Intenso : bastonete, metamielócitos, mielócitos e em casos graves as células precursoras. - A resposta medular é adequada à inflamação, em casos de desvio à esquerda regenerativo. - Degenerativo: predomínio de formas jovens, normal ou leucopenia. - Nesse caso é classificado como desvio a esquerda degenerativo, porque o animal está com o leucócito normal ou diminuído mas a um predomínio de formas jovens. - Resposta inadequada a inflamação - Depleção da medula óssea (Resposta aguda em bovinos) - Em casos graves, exaustão da medula óssea ( não consegue nem produzir as unidade formadoras de colônia - difícil identificação, recomendado um mielograma) - Imagem - Metamielócito, segmentado, bastonete. Desvios Desvio a direita ( hipersegmentados) - é um neutrófilo hipersegmentado quando tem mais de cinco lobulações. - O animal normal, e nao tem comprometimento, casos de Corticoide endógeno ( estresse ) ou exógeno ( corticoides terapia por tempo prolongado) - O uso de corticoide prolongado causa imunossupressão. - Resolução do processo com diminuição da quimiotaxia e da migração, são substâncias produzidas para atrair o aporte de leucócitos maduros para o local da lesão. - - Corpúsculos de Barr ( cromatina sexual ), no núcleo dos neutrófilos no esfregaço sanguíneo, no macho não aparece essa cromatina sexual. É como um apêndice Resposta leucocitária de bovinos Leucócitos : 8.000 (normal) Bast: 0 Neu: 2.200(normal) Linf: 4.600(normal) Eos: 700(normal) Mon: 500(normal) 6-24h depois aparece com leucócitos totais 2.000, ele está leucopenia, das 24-48h é observado uma leucopenia com desvio à esquerda, 3-4 dias leucócitos normal ou leucocitose com neutrofilia. Comparação da resposta leucocitária, é mais lenta. Linfócitos - Avaliaçãoquantitativa e morfológica - Variação entre as espécies - Linfócito anormal tem uma quantidade maior de citoplasma, é um linfócito reativo, outra morfologia o citoplasma fica da mesma coloração que o citoplasma do monócito e às vezes pode apresentar vacuolização citoplasmática. - Em um linfócito normal quase não observa um citoplasma Linfocitose (aumento) - Fisiológica ( especialmente em felinos) - Animais jovens que ainda não foram desmamados vão apresentar linfocitose. - Hipoadrenocorticismo - Estimulação antigênica ( o animal tem contado mas não fica doente) - Vacinação - Doenças virais (animal coinfectado) - Doenças imunomediadas ( anemias hemolíticas e outras doenças infeciosas ) - *Nas 4 situações acima são observados linfócitos reativos - E nas leucemias além da reatividade dos linfócitos são observados; - Linfócitos atípicos: são células precursoras apresentando critério de malignidade nuclear e citoplasmática. - Linfocitose é acentuada - Nas leucemias são observados leucocitose por linfocitose ou por monocitose, deve ser feito o mielograma para classificar a leucemia. Linfopenia - Estresse, o animal pode ter uma diminuição na contagem absoluta desses linfócitos - Corticoterapia, o animal desenvolve linfopenia porque o corticoide é um potente imunossupressor. - Hiperadrenocorticismo - IRC ( insuficiência renal crônica) - Doenças virais, leucopenia por linfopenia é um achado comum na cinomose em um animal mono infectado - Drogas / radiação ( a radiação mata células cancerígenas e normais ) o linfócito B que produz anticorpos então se for destruído vários linfocitos productores de linfocitos o animal fica propenso a doenças - Perda ( ruptura de vasos linfáticos que é por onde as células de defesa, quilotórax - é uma ruptura ou uma obstrução de ducto torácico por conta de traumas, é observado em malformações de vasos linfáticos que pode ser congênito e em alguns tumores, ocorre efusões, é feito drenagem dessas efusões pleurais) Eosinófilos - Assim como os basófilos estão presente nos processos de hipersensibilidade e nos processos verminoticos Eosinofilia - Inflamação: pele, trato respiratório, digestivo, peritônio, útero (piometra) - Parasitismo - dirofilariose - Reações de hipersensibilidade - Síndromes hiper eosinofilicas ( paciente com câncer, síndrome paraneoplásica - a diarreia de um animal com verminose é diferente de um animal que está com neoplasia. - Granuloma eosinofílico ( gato ), normalmente tem uma característica do tipo eosinofílico - Enterite Eosinofílica - Pneumonia eosinofílica ( decorrente de fungo e parasita ) - Mastocitoma, linfoma - Hipoadrenocorticismo - Leucemia eosinofílica (rara) Eosinopenia - Estresse - Hiperadrenocorticismo - Corticoterapia - Inflamação, infecções agudas - Eosinopenia absoluta com um animal com ótimo estado de saúde o resultado laboratorial não é significativo Monocitose - Inflamação aguda/crônica - Necrose tecidual ( porque a necrose é um processo crônico) - Anemias hemolíticas - Doenças granulomatosas, supurativas, imunomediadas ( Lúpus eritematoso sistêmico) - Parasitas - Efeito esteróide ( criadores de cão de briga) - Leucemias Monocitopenia - Não tem significado clínico Monócito ativado fica um pouco maior de tamanho o citoplasma fica mais basofílico e a presença de vacuolização citoplasmática Basofilia ( aumento) - São mais comuns em equinos - Não confundir com basofilia citoplasmática - Associado a eosinofilia - Reações de hipersensibilidade - Alta carga parasitaria Basopenia - Não tem significado importante Imagem acima esfregaço de um equino ( grânulos grandes, a hemácias tem rouleaux eritrocitário, hemácias empilhadas, importante verificar o estágio de desidratação) Basófilo tem granulação arroxeada Eosinófilos têm grânulos alaranjados *Rouleaux em cão quando amostra não está hemolisada ou o animal está desidratado Cão - gato - neutrófilos no centro Alguns tipos específicos de resposta leucocitária