Leucócitos e Leucograma

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DIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO 
 Leucócitos e Leucograma 
 Os leucócitos ou glóbulos brancos fazem 
 parte do sangue juntamente com os eritrócitos e 
 plaquetas. São produzidos na medula óssea a partir 
 de uma célula tronco que vai repopular a medula. A 
 capacidade proliferativa depende de estímulos 
 apropriados de hormônios estimuladores da 
 leucopoiese. 
 Exercem papel de defesa do organismo, 
 combatendo microrganismos, como fungos, 
 bactérias, vírus, além de apresentarem ações contra 
 parasitas e outros antígenos. Podem também 
 apresentar ações indesejadas como em doenças 
 autoimunes e imunomediadas. 
 →Classificação morfológica 
 Os leucócitos são classificados em 
 polimorfonucleares e mononucleares. Os leucócitos 
 polimorfonucleares têm núcleo condensado e 
 segmentado. São células comumente referidas como 
 granulócitos porque elas contém grande número de 
 grânulos citoplasmáticos que são lisossomas, 
 contendo enzimas hidrolíticas, agentes 
 antibacterianos e outros compostos. São três tipos 
 de granulócitos, os neutrófilos, eosinófilos e 
 basófilos, que são diferenciados a partir das 
 características de coloração de seus grânulos. 
 Os mononucleares são classificados como 
 monócitos e linfócitos. Podem apresentar grânulos 
 mas sempre em menor quantidade. 
 →Granulopoiese 
 A granulopoiese envolve a produção de 
 neutrófilos, basófilos e eosinófilos, tendo origem de 
 um único precursor celular, o promielócito, e 
 demora cerca de 5 a 7 dias para formar células 
 maduras. A formação dessas células ocorre na 
 medula óssea, sob estímulo apropriados, uma célula 
 pluripotente origina células progenitoras que 
 produzem os granulócitos. 
 Esta célula com potencial de produção é 
 conhecida como Unidade Formadora de Colônia 
 Granulocítica-Monocítica (UFC-GM), sendo que 
 seu estágio inicial é bipotencial. Após estímulo a 
 UFC-GM, diferencia-se em células uni potencial 
 UFC-G e UFC-M. Essas células uni potencial são 
 morfologicamente identificáveis e são precursores 
 dos mieloblastos, que vão se dividir e maturar-se 
 formando granulócitos sanguíneos específicos. 
 Existem também os progenitores celulares distintos 
 para eosinófilos (UFC-Eos) e basófilos (UFC-Bas). 
 → Monocitopoiese 
 O monócito é uma célula que descende da 
 célula progenitora bipotencial (UFC-GM), que pode 
 produzir neutrófilos ou monócitos. O Fator 
 Estimulador de Colônia Monocítica (FEC-M) é 
 responsável pela diferenciação de UFC-GM em 
 UFC-M e na proliferação dos precursores 
 monocíticos (monoblasto e pró-monócito) em 
 monócitos. O monoblasto divide-se uma vez e o 
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 pró-monócito uma ou duas, já o monócito 
 dificilmente se divide na medula óssea. 
 →Linfopoiese 
 Os linfócitos são produzidos na medula 
 óssea, nos órgãos linfóides como o timo, linfonodos 
 e baço, além dos tecidos linfóides viscerais, que 
 incluem as placas de Peyer, tonsilas e apêndices. 
 A formação de linfócitos inicia durante a 
 vida intra-uterina, onde a célula tronco 
 pluripotencial indiferenciada origina-se no saco 
 vitelino e posteriormente no fígado,baço e medula 
 óssea fetais. A partir de estímulos do 
 micro-ambiente e outros, os progenitores linfóides 
 continuam colonizando os órgãos linfóides 
 primários (Bursa de Fabricius nas aves ou medula 
 óssea nos mamíferos, e o timo). 
 Nestes orgãos duas populações funcionais e 
 fenotipicamente distintas de precursores linfocíticos 
 desenvolvem-se. Estas células então migram para 
 os órgãos linfóides secundários ou periféricos 
 (como linfonodos e baço). Assim, a partir de 
 antígenos apropriados ocorre a proliferação de 
 subséries imunocompetentes de linfócitos T ou B. 
 O tempo de produção dos linfócitos é 
 estimado entre 6 e 8 horas, e em alguns casos 
 podem levar menos de 2 horas. O número de 
 mitoses envolvidas variam com o tipo celular (6 a 
 8h para células T e 2 a 3h para B). A linfopoiese é 
 estimulada por exposição antigênica e deprimida 
 por corticóides, hormônios sexuais e má nutrição. 
 → Avaliação do Leucograma 
 Feito a partir da contagem de leucócitos 
 totais podendo ser manual (com diluição em líquido 
 de Turk e utilizando Câmera de Neubauer). 
 Também deve ser feito o diferencial de leucócitos 
 (contabilizando 100) fazendo ainda a avaliação 
 morfológica. 
 ● Conceitos 
 Indicam aumento: citose (leucocitose, 
 linfocitose, monocitose..) e filia (neutrofilia, 
 eosinofilia, basofilia). 
 Indica diminuição: penia (leucopenia, 
 neutropenia, linfopenia, eosinopenia). 
 ● Fatores fisiológicos que influenciam a 
 resposta leucocitária 
 ○ Espécie e raça 
 ○ Idade (maiores contagens nos 
 filhotes) 
 ○ Variação circadiana (avaliar 
 preferencialmente no início da 
 manhã) 
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 → Neutrófilos 
 São a primeira linhagem de defesa do 
 organismo, sendo que os neutrófilos maduros 
 emergem na circulação em torno de 3 a 5 dias no 
 cão, e de 4 a 6 nos bovinos, permanecendo cerca de 
 10 horas na corrente sanguínea. Apresenta uma 
 grande reserva medular que pode suprir o cão por 
 cerca de 4 a 8 dias. 
 Auxiliam na resposta inflamatória devido a 
 seu papel de quimiotaxia positiva em tecidos com 
 inflamação e também realizam fagocitose de 
 organismos lesivos e outros materiais estranhos. 
 Após ser feito a fagocitose, os grânulos 
 lisossômicos fundem-se aos fagossomos para 
 conseguir eliminar os microrganismos e degradar o 
 material por digestão enzimática. 
 Os neutrófilos apresentam núcleo 
 segmentado e citoplasma incolor a um discreto 
 vermelho. 
 A liberação de neutrófilos na corrente 
 sanguínea é influenciada por vários fatores, 
 incluindo microambiente medular, localização 
 anatômica, propriedades celulares como a 
 deformabilidade, fluxo nos sinusóides medulares, 
 fatores de liberação celular e fatores 
 neuro-hormonais. As células maduras são as 
 primeiras a migrar através das junções 
 intercelulares dos sinusóides medulares, pois 
 possuem maior capacidade de deformabilidade e 
 motilidade. 
 O compartimento marginal consiste em 
 neutrófilos aderidos nas paredes de capilares e 
 pequenos vasos sanguíneos localizados 
 principalmente no baço e pulmões. Esse 
 compartimento varia de acordo com as espécies, 
 sendo que o cão, bovino e eqüino possui no 
 marginal metade dos neutrófilos vasculares, 
 enquanto que no gato esta reserva chega a 2,5 vezes 
 o compartimento circulante. O compartimento 
 marginal pode ser mobilizado rapidamente sob a 
 influência de epinefrina e corticóides endógenos 
 liberados por estímulos fisiológicos ou patológicos 
 como estresse, exercício, traumas e infecções 
 Os fatores que estão envolvidos na 
 marginação dos neutrófilos incluem: C5a, 
 prostaciclina (PGI2) produzidas pelas células 
 endoteliais das paredes dos vasos e, com maior 
 importância, alguns componentes dos grânulos dos 
 neutrófilos, incluindo moléculas de adesão dos 
 leucócitos. A adrenalina diminui a aderência dos 
 neutrófilos por aumentar a produção de AMP 
 cíclico. 
 ● Neutrofilia 
 É o aumento dos números de neutrófilos no 
 sangue periférico. Podendo ser reativa (leucogramaDIAGNÓSTICO LABORATORIAL VETERINÁRIO 
 inflamatório) em casos de infecções/inflamações 
 locais ou sistêmicas, necrose tecidual, doenças 
 imunomediadas e neoplasias. Por desordem 
 proliferativa em casos de leucemias mielóides ou 
 fisiológica em respostas a epinefrina e corticoides 
 ou em decorrência de estresse e exercício. 
 ● Neutropenia 
 É a diminuição do número de neutrófilos no 
 sangue. Ocorre devido a uma demanda/consumo 
 excessivo das células em casos de 
 inflamação/infecção aguda muito grave. Por 
 diminuição da produção quando exaustão da 
 medula, ocorrendo em casos de, infecções 
 bacterianas graves persistentes, hipoplasia medular 
 (reversível ou irreversível) e leucemias. Ou ainda 
 em decorrência de uma produção ineficiente em 
 animais com leucemias e FeLV. 
 ● Desvios à esquerda 
 O desvio à esquerda ocorre quando há um 
 aumento do número de neutrófilos bastonetes 
 (imaturos). Sendo classificado quanto: 
 ● A intensidade → Leve (até 
 bastonetes), Moderado (até 
 metamielócitos) e Intenso 
 (mielócitos). 
 ● De acordo com a 
 gravidade/proporção da resposta→ 
 regenerativo ou degenerativo. 
 O desvio à esquerda regenerativo está 
 associado a Leucocitose com neutrofilia e/ou 
 predomínio de formas maduras (o número de 
 neutrófilos imaturos encontra-se abaixo do número 
 de neutrófilos maduros). É significativo uma 
 resposta adequada da medula à inflamação. 
 Já o desvio a esquerda degenerativo está 
 associado a leucócitos normais ou leucopênico, 
 ocorrendo o predomínio de formas imaturas de 
 neutrófilos na corrente sanguínea. Significativo de 
 uma resposta inadequada de medula a inflamação, 
 devido a depleção da medula óssea. Entretanto, em 
 bovinos o desvio à esquerda degenerativo é comum 
 durante o estágio inicial de doenças infecciosas ou 
 inflamatórias hiperagudas a agudas. Isso ocorre, 
 provavelmente, devido ao compartimento de 
 reserva da medula óssea de bovinos ter um 
 suprimento limitado de neutrófilos maduros. 
 ● Hipersegmentados 
 Significativo de desvio a direita, onde 
 ocorre um aumento de neutrófilos 
 hipersegmentados, com mais de 5 lobulações. 
 Geralmente resultante de uma inflamação crônica 
 (resposta adequada) ou em decorrência do uso de 
 corticoides que levam a diminuição da quimiotaxia 
 e migração. 
 → Eosinófilos 
 São produzidos na medula óssea 
 principalmente, mas também em outros órgãos 
 como timo, baço, linfonodos cervicais. Levam de 2 
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 a 6 dias para serem produzidos e adentram a 
 circulação aproximadamente 2 dias após. Ficam 
 pouco tempo no sangue circulante, 
 aproximadamente 30 minutos, após entram no 
 tecido alvo e não retornam para a circulação. 
 Os eosinófilos apresentam núcleo 
 segmentados e sua característica padrão é a 
 presença de grânulos intracitoplasmáticos 
 vermelho-alaranjados. 
 C- Eosinófilos de cão 
 F- Eosinófilos de felino 
 E- Eosinófilos de equino 
 B- Eosinófilo de bovino 
 Essas células atuam na modulação da 
 inflamação devido a suas propriedades 
 anti-histamínicas e anti-inflamatórias, seus grânulos 
 também apresentam substâncias que inibem as 
 propriedades de indução de edema como a 
 serotonina e bradicinina. 
 Também atuam na defesa contra parasitas, 
 devido a presença de proteínas que se ligam e 
 causam danos às membranas dos parasitas, 
 responsáveis por promover uma defesa contra 
 estágios larvais da infestação parasitária 
 Ainda, agem na regulação da resposta 
 alérgica devido aos seguintes funções: 
 ● Os eosinófilos podem fagocitar complexos imunes e 
 grânulos dos mastócitos; 
 ● As prostaglandinas (PGE1 e PGE2) e zinco dos 
 eosinófilos inibem a liberação de histamina, 
 serotonina e FAP dos mastócitos; 
 ● Os eosinófilos contém fatores que inibem o 
 fornecimento de histamina pelos mastócitos; 
 ● A histaminase dos eosinófilos inativa a histamina 
 livre; 
 ● A fosfolipase C dos eosinófilos inibe a liberação FAP 
 pelos mastócitos 
 ● Eosinofilia 
 É o aumento do número de eosinófilos no 
 sangue. A eosinofilia comumente acontece como 
 resposta a parasitismo (fase tecidual), 
 hipersensibilidades alérgicas (ex. dermatite alérgica 
 a pulgas, alergias inalatórias ou síndrome asmáticas, 
 síndrome hipereosinofílica felina e gastroenterites 
 que podem ter componentes alérgicos) ou em 
 resposta à histamina de mastócitos (como na pele, 
 trato respiratório, trato gastrointestinal), ou em 
 casos de granuloma/gastroenterite eosinofílica. 
 Ainda pode se encontrar aumento de 
 eosinófilos em casos de terapia com determinadas 
 drogas, no período de estro em cadelas, 
 hipoadrenocorticismo, predisposição racial e 
 desordens purulentas. 
 A ausência de eosinófilos não exclui suas causas 
 → Basófilos 
 A produção de basófilos ocorre também na 
 medula óssea como os demais granulócitos. 
 Apresentam função desconhecida mas contêm 
 grânulos de histamina e heparina, além de 
 imunoglobulina na membrana citoplasmática, 
 agindo portanto no início de processos 
 inflamatórios. 
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 As concentrações de basófilos na corrente 
 sanguínea são muito baixas, sendo difícil encontrar 
 na contagem diferencial de rotina. Apresentam 
 núcleo segmentado e sua característica são os 
 grânulos intracitoplasmáticos azul/roxo. 
 C- cão 
 F- felino 
 LA- grandes animais 
 ● Basofilia 
 O aumento de basófilos no sangue é 
 incomum, mas podem ocorrer em casos de reações 
 alérgicas e parasitismos e em casos de leucemia 
 basofilica. 
 Geralmente é acompanhada de eosinofilia, 
 porém não apresenta grandes significados 
 (basofilia). 
 → Linfócitos 
 São produzidos na medula óssea, nos órgãos 
 linfóides como o timo, linfonodos e baço, além dos 
 tecidos linfóides viscerais, que incluem as placas de 
 Peyer, tonsilas e apêndices. O tempo de produção 
 dos linfócitos é estimado entre 6 e 8 horas, e em 
 alguns casos podem levar menos de 2 horas. A 
 linfopoiese é estimulada por exposição antigênica e 
 deprimida por corticóides, hormônios sexuais e má 
 nutrição. 
 Os linfócitos exercem diferentes funções e 
 possuem receptores de membrana para o 
 reconhecimento de antígenos. Existe uma 
 população de linfócitos que não expressam 
 receptores de antígenos em suas membranas, as 
 células exterminadoras naturais (Natural Killer), 
 que são derivadas da medula óssea e possuem 
 habilidade de lisar certas linhagens de células 
 tumorais sem prévia sensibilização. 
 As principais funções dos linfócitos incluem 
 a imunidade humoral, imunidade celular, regulação 
 imune, atividade citotóxica e vigilância imune e 
 secreção de linfocinas. 
 Os linfócitos são reconhecidos por 
 apresentar núcleo de arredondado a oval e 
 quantidade mínima de citoplasma claro, quase 
 incolor. 
 ● Linfocitose 
 O aumento de linfócitos no sangue pode 
 ocorrer em decorrência de fatores fisiológicos, em 
 casos de estresse e medo, decorrentes da coleta 
 devido a liberação de adrenalina (transitória). 
 Também em decorrência de uma reação 
 infecciosa/inflamatória crônica, devido à 
 estimulação antigênica crônica ou em casos de 
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 Leishmaniose, erliquiose, brucelose, leucosebovina. Também pode ocorrer um aumento devido a 
 reações pós vacinais. 
 Pode-se encontrar também uma leucocitose 
 em animais com hiperadrenocorticismo, e em 
 animais jovens (fisiológico). Há também a 
 possibilidade de ocorrer em decorrência de uma 
 neoplasia linfóide ou linfoma (Linfócitos acima de 
 > 12.000 cães e > 20.000 gatos). 
 ● Linfopenia 
 A diminuição dos linfócitos pode ocorrer 
 em casos de inflamação aguda, devido a migração 
 de células para o tecido inflamado ou pelo 
 direcionamento aos tecidos linfóides. Também por 
 infecções virais agudas onde ocorre a migração dos 
 linfócitos e posteriormente sua destruição. 
 Também pode ocorrer devido ao uso de 
 corticoides pois estes causam lise, destruição e 
 ainda inibem a produção de linfócitos. Diminuição 
 por perda de linfa em casos de enteropatias ou 
 quilo. 
 Em animais idosos também pode se 
 encontrar uma linfopenia discreta. 
 → Monócitos 
 São consideradas células intermediárias de 
 um processo contínuo de maturação. Eles migram 
 para o interior dos tecidos, onde continuam o 
 desenvolvimento até a forma de macrófagos. 
 São responsáveis por fagocitar bactérias, 
 grandes microrganismos complexos, células 
 danificadas, debris celulares e partículas estranhas. 
 Essas células desempenham importante função 
 imunorreguladora por apresentarem o antígeno 
 processado aos linfócitos T. Essas células são 
 também responsáveis pela destruição fisiológica 
 dos eritrócitos, com reciclagem metabólica do ferro, 
 e pela maioria dos processos patológicos que 
 envolvem destruição eritrocitária. 
 Morfologicamente podem apresentar núcleo 
 de várias formas, incluindo oval, feijão, amebóide 
 ou ferradura (semelhante aos neutrófilos). São de 
 grande tamanho, com citoplasma acinzentado, 
 podendo conter grânulos ou vacúolos. 
 ● Monocitose 
 O aumento do número de monócitos no 
 sangue pode ocorrer em casos de 
 inflamação/infecção, pois ocorre um aumento na 
 produção de monócitos estimulado por citocinas e 
 pelo aumento da necessidade de macrofagos no 
 tecido alvo (devido a processos como necrose, 
 hemorragia interna, doenças granulomatosas e em 
 casos de hemólise). 
 A terapia com corticoides também pode 
 causar um aumento de monócitos circulantes 
 devido a marginalização, principalmente em cães. 
 Também pode ocorrer aumento em casos de 
 leucemia monocíticas (raras). 
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 → Condições especiais que afetam o 
 Leucograma 
 ● Leucocitose induzida por adrenalina 
 A leucocitose fisiológica ocorre como uma 
 resposta a adrenalina em resposta a excitação/medo 
 ou exercício físico, no qual o compartimento 
 marginal de neutrófilos (de marginalização de 
 neutrófilos maduros) e/ou linfócitos (em felinos e 
 equinos) são mobilizados para a circulação geral, 
 aumentando a contagem total de leucócitos (leve) e 
 o número de neutrófilo absoluto e/ou linfócitos. 
 Assim, uma neutrofilia e/ou linfocitose transitória, 
 podem se manifestar. Esta condição é comum em 
 animais jovens e geralmente é desencadeada por 
 distúrbios emocionais e físicos. Raramente o 
 número de monócitos e eosinófilos aumenta. 
 ● Leucograma de estresse 
 Leucocitose induzida por corticosteróide 
 (exógeno, em terapias) ou estresse – a leucocitose 
 pode ocorrer em condição de saúde (fisiológica) ou 
 nas doenças (patológicas), como no 
 hiperadrenocorticismo. 
 A liberação de glicocorticóide endógeno ou 
 administrado terapeuticamente causa consideráveis 
 mudanças hematológicas. Tipicamente produz 
 leucocitose causada por neutrofilia, usualmente sem 
 desvio à esquerda, linfopenia e eosinopenia. 
 Monocitose ocorre no cão. 
 A neutrofilia ocorre pela mobilização dos 
 neutrófilos segmentados do compartimento de 
 reserva da medula óssea e pela diminuição da 
 diapedese das células para os tecidos. A linfopenia 
 ocorre principalmente pela linfólise dos linfócitos T 
 sensíveis a esteróides no sangue e tecido linfóide, 
 ou pela marginação e sequestro dos linfócitos nos 
 locais extravasculares. 
 Eosinopenia ocorre principalmente pela 
 diminuição da saída destas células da medula óssea, 
 devido à interferência com o efeito quimiotático da 
 histamina nos eosinófilos. A causa da monocitose 
 permanece desconhecida. A resposta dos basófilos, 
 ao corticóide, é similar à dos eosinófilos, mas não é 
 reconhecida usualmente, porque os basófilos são 
 raros no sangue. 
 → Alterações morfológicas dos leucócitos 
 ● Neutrófilos 
 As alterações tóxicas podem ocorrer devido 
 a resposta medular acelerada, processos 
 supurativos/purulentos, geralmente devido a 
 resposta inflamatória. Ocasionando uma basofilia 
 citoplasmática, granulações tóxicas e corpúsculo de 
 Dohle. Podendo apresentar ainda a vacuolização 
 citoplasmática por outras causas. 
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 Pode ocorrer também alteração morfológica 
 (hipersegmentação) devido a retenção do neutrófilo 
 na circulação. 
 Ainda, pode-se encontrar alterações hereditárias, 
 entretanto são raras. 
 ● Monócitos 
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 ● Linfócitos 
 ● Inclusões virais e parasitas