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@gabimed.vet 1 Fisiopatologia da Reprodução do Macho Tecnologia do sêmen → Pra ver se o touro é fértil → Composto por algumas etapas o Libido o Habilidade de monta o Dominância social. PROCESSAMENTO E CONGELAMENTO DE SÊMEN BOVINO → Atualmente muito bem desenvolvida → Promoveu de maneira intensa o processo de melhoramento genético do gado de corte e leite em todo mundo. → Objetivos: o Colher o sêmen para andrológico o Avaliar motilidade, vigor o Colher o sêmen para vender AVALIAÇÃO ANDROLÓGICA Constituída pela parte de sistema genital Exame semiológico da estrutura e função do trato genital masculino INFERTILIDADE → Redução temporária ou permanente da capacidade de conceber e produzir descendentes viáveis → Pode manifestar o À cópula (incapacidade couendi) o Ausência de fertilização (incapacidade generandi) → Avaliação do potencial reprodutivo o Avaliação andrológica o Teste de comportamento sexual o Manejo → Manejo inadequado: baixo desempenho reprodutivo → A infertilidade em cães e gatos → Falha reprodutiva em determinadas raças caninas: alto índice de cruzamento consanguíneo IDENTIFICAÇÃO → Idade do animal → Dado importante → Anomalidades hereditárias e/ou congênitas o Ex: criptorquidismo → Animais idosos: o Tumores testiculares (especialmente no cão) o Diminuição da qualidade do sêmen o Diminuição da libido o Capacidade física e funcional para reprodução comprometida. AVALIAÇÃO ANDROLÓGICA DE BOVINOS → Exames físicos e clínicos: o Avaliação da libido o Membros (principalmente membros posteriores) o Pênis o Palpação retal (volume das glândulas anexas) o Exame dos testículos (biometria testicular) o Epidídimos o Prepúcio → Exames com resultados negativos (laboratórios credenciados) o Brucelose o Tuberculose o Campilobacteriose o Tricomose o Leptospirose o IBR o BVD o Tipagem sanguínea para comprovação de paternidade o Reprodutores que chegam são submetidos à quarentena em local isolado → Touros doadores de sêmen que sejam precoces sexualmente → Apresentar sêmen congelável com pouca idade MEDIÇÃO DE PERÍMETRO ESCROTAL → A produção dos espermatozoides está relacionada com o tamanho dos testículos SÊMEN @gabimed.vet 2 Fisiopatologia da Reprodução do Macho → É a suspensão liquida contendo sptz e secreções dos órgãos acessórios do TGM → Plasma formado por substancia liquida → Elementos figurados: sptz e células diversas → Elementos não figurados: água, substancias orgânicas, sulfato → Plasma seminal: porção liquida no ato da ejaculação → A composição varia de acordo com cada espécie, permitindo ou não uma maior congelabilidade no sêmen. PLASMA SEMINAL → Bulbo uretrais o Fração 3: fosfolipases nos PR o Carotenoides: riboflavina nos ruminantes → Vesícula seminal: o Fralção 5 nos PR → Próstata: o Única glândula no cão o Prostaglandina → Função de manter o sptz viável → Composição: há muita variação na composição e pouco se sabe sobre as funções específicas de cada substâncias → Água: função hidrodinâmica → Frutose: energia para metabolismo do sptz → Proteinas e aminoácidos: ação protetora, neutralizando o efeito dos metais pesados e prevenindo a aglutinação das células → Ergotioneína: função protetora e manutenção da motilidade → Prostaglandina: facilitam o transporte dos sptz no TRF → Potássio e magnésio: favorecem a viabilidade espermática → Zinco: sua falta afeta a morfologia espermática → Fosfato → Citrato → Enzimas Fragilidade da membrana Osmoralidade ESQUEMA DA IA Macho – coleta de sêmen – avaliação e etc. IDADE PARA INICIAR Comercializar: conforme passa o tempo, melhora a qualidade Treinar o animal desde jovem com a coleta. COLETA Vagina artificial para comercializar → Comprimento: 26cm no caso de touros jovens e 30-40cm no caso de touros adultos → Temperatura da água: cerca de 40ºC Manequins: → Vivo: fêmeas, machos, machos castrados → Mecânicos: dispositivos apropriados e inertes o Vantagens: proporcionar estabilidade → Desviar o pênis antes de encostar na femea para não contaminar → Eletroejaculador Massagem das ampolas através da palpação retal Sêmen ralo com volume e concentração diminuídos SPTZ → Produzidos nos túbulos seminíferos do testículo → Cabeça o Forma de pêra: contem o núcleo e material genético → Macho: responsável pela definição do sexo → Acrossomo: extremidade anterior da cabeça → Colo: conecta a cabeça com a cauda → Cauda: 10/10/22 COMPONENTES BIOQUÍMICOS DO ESPERMATOZOIDE → Ácidos nucleicos, proteínas e lipídeos; → Cromatina nuclear: É composta de DNA e de proteína; → Cauda: Proteínas estruturais, enzimas e lipídeos; → Núcleo: Composto de cromatina condensada e o DNA é estabilizado por protaminas; → Proteínas nucleares: Importante para a condensação e estabilização do DNA; São mantidas juntas pela ligação sulfídrica; @gabimed.vet 3 Fisiopatologia da Reprodução do Macho → Ligação sulfídrica: Aumenta à medida que as células passam através do epidídimo; → Membrana mitocondrial: Rica em fosfolipídeos; → Fatores que afetam a sobrevivência espermática → Temperatura; Choque do frio; Metabolismo espermático e PH; Luz; Oxigênio e agitação; Pressão osmótica; Metais pesados; Bactérias; ANÁLISE DO SÊMEN ANÁLISE MACROSCÓPICA: → Volume: 0,5 a 10 ml; → Aspecto: Cremoso ou leitoso; → PH: 6,5 – 6,9 → Odor: característico, sui generis (provém do fosfato de espermina) → Odor cítrico: Presença de urina no sêmen → Odor pútrido: Presença de bactérias → Cor: branco-marmóreo; → Amostras translúcidas possuem poucos espermatozoides → Sêmen com aparência coagulada (contendo grumos) indica infecção do sistema reprodutivo; → Sêmen amarelo: Pigmento riboflavina (não confundir com urina); → Sêmen avermelhado: Sangue (pode haver algum ferimento na uretra, na parte externa da glande ou nas glândulas anexas); → Marrom: Sangue “velho” com degradação celular, alguma lesão antiga; → Amarelado anormal: Pus ou urina → Esverdiado: Presença de pus (infecção) ANÁLISE MICROSCÓPICA → Turbilhonamento: Movimento de massa; → Motilidade: Células vivas e móveis; Sêmen diluído; → Os espermatozoides devem possuir movimento retilíneo progressivo; → Vigo: propulsão e velocidade do espermatozoide; O diluente pode interferir; → Densidade: É obtida através da espectrofometria ou contagem pela câmara de Neubauer; → Concentração espermática: Refere-se ao número de espermatozoides por ml de sêmen; → Exigência do MAPA: 6 milhões de espermatozoides por dose; CONCENTRAÇÃO ESPERMÁTICA → Diluição da amostra para determinação da concentração espermática: o Touro – 1200 (1:100) o Carneiro e bode – 1300,1400,1500 o Suínos, equinos e caninos - 1:20 → Concentração espermática juntamente com o volume é indicador da quantidade de fêmeas a serem inseminadas; TERMOS TÉCNICOS DA ANÁLISE MICROSCÓPICA : → Azoospermia: apenas líquido de glândulas anexas → Oligospermia: volume do ejaculado abaixo do normal; → Teratozoospermia: porcentagem elevada de espermatozoides anormais → Aquinozoospermia: espermatozoides imóveis CLASSIFICAÇÃO DA MORFOLOGIA ESPERMÁTICA → O sêmen da maioria dos machos apresenta alguns espermatozoides anormalmente formados → Essa proporção não pode exceder mais que 20 % ANORMALIDADES MORFOLÓGICAS: → Primárias: Falhas na espermatogênese; → Secundárias: Falhas que ocorrem no momento da passagem dos espermatozoides pelo epidídimo; → Terciárias: Danos que ocorrem durante ou após a ejaculação; Manipulação inadequada do sêmen; → Defeitos maiores: Qualquer anormalidade relacionada com infertilidade ou condição patológica do testículo ou epidídimo. → Defeitos menores: Podem causarinfertilidade, porém é menos provável. → Acrossomo (defeitos maiores) → Enrugado; → Contorno anormal; → Destacado; NAR: NORMAL APICAL RIDGE – Acrossomo normal DAR: DEFECTIVE APICAL RIDGE – Irregularidades observadas na margem anterior do cromossomo. MAR: MISSING APICAL RIDGE - Não se detecta estrutura Knobbed sperm (grânulo persistente do acrossomo): Formado na espermiogênese, pode causar infertilidade @gabimed.vet 4 Fisiopatologia da Reprodução do Macho CABEÇA (DEFEITOS MENORES) : → Diadem defect (vacúolos no meio da cabeça): → Invaginação da membrana plasmática; → Formado na espermiogênese e causado por agentes virais, estresse e degeneração testicular CABEÇA DEFEITOS MAIORES → Piriforme → Pequena → Gigante → Solta → Espermatozoide decapitado: Não há cabeça, apenas cauda. É hereditário e está relacionado com a degeneração e hipoplasia testicular. COLO DEFEITOS MAIORES → Implantação retroaxial: Degeneração testicular ou imaturidade sexual; → Gota citoplasmática proximal: Degeneração ou hipoplasia testicular, disfunção epididimária ou imaturidade sexual; A gota fica retida no colo; DEFEITOS MENORES → Implantação abaxial: Degeneração testicular ou imaturidade sexual. PEÇA INTERMEDIÁRIA (DEFEITOS MA IORES) → Forma de saca-rolha: degeneração testicular e touros idosos; → Flexão distal da peça intermediária: disfunção epididimária, estresse e insolação → Pseudogota: grânulos densos encobertos por mitocôndrias; Genético. CAUDA (DEFEITOS MAIORES) Cauda fortemente enrolada ou dobrada: Lesão na bainha mitocondrial durante a espermiogênese; Pode ser hereditário e manifesta-se no epidídimo; Comum na raça Jersey. CAUDA (DEFEITOS MENORES) → Cauda levemente enrolada ou dobrada: ocorrem no final da cauda → Gota citoplasmática distal: A gota não escorrega até o final e não se desprende; → Cauda dupla CLASSIFICAÇÃO DE FERTILIDADE → Acima de 500 milhões de espermatozoides por ml; → Mais de 50% de espermatozoides móveis com motilidade retilínea → Mais de 80 % de espermatozoides com morfologia normal → Falhando algum destes critérios, em amostras de três ou mais ejaculados, o touro é suspeito de infertilidade REPRODUTORES → Após realização dos exames: Os dados são analisados, interpretados e os reprodutores são classificados em: → Aptos ou satisfatórios para a reprodução; → Questionáveis: Devem guardar novos exames; → Inaptos ou insatisfatórios para a reprodução: Devem ser descartados DILUIÇÃO DO SÊMEN → Aumentar o volume e fracionar → Proteger os diferentes compartimentos celulares durante o resfriamento, congelação e descongelação → Garantir a nutrição adequada → Manter o balanço eletrolítico (PH e osmolaridade) → Inibição do crescimento bacteriano. DILUIDORES DE SÊMEN Gema de ovo: Atua na superfície da membrana plasmática e protege o espermatozoide durante o choque térmico e o resfriamento SOLUÇÕES COMERCIAIS → Leite esterelizado (desnatado e em pó) → Desvantagem: Dificuldade de visualização no microscópio; → Requisitos do diluidor → Não serem tóxicos → Mesma osmolaridade do plasma seminal → PH igual do sêmen CONSERVANTES Tipos de conservantes → Citrato de sódio: Em congelamento, atua no equilíbrio osmótico e evita o rompimento de células; @gabimed.vet 5 Fisiopatologia da Reprodução do Macho → Glicerol: Protetor de membranas; Muito utilizado e barato; → Glicose e frutose: como fonte de energia; → Tris: Tampão eletrolítico; → EDTA: Evita a aglutinação espermática; → Antibióticos: estreptomicina e penicilina; ENVASE 17/10/22 → Controle do período de resfriamento e equilíbrio o Modificações graduais na membrana plasmática e de fluxos iônicos: conferem às células maior resistência durante o congelamento. o O congelamento horizontal é mais homogêneo. → Envasamento mecânico em palhetas de 0,25ml ou 0,5ml → Sêmen diluído: é resfriado à 5ºC e depois congelado. CONGELAÇÃO CONGELAMENTO HORIZONTAL → Máquina: diminui a temperatura gradativamente → Caixa de isopor: suporte com palhetas deitadas em 3-4cm de nitrogênio líquido → Após 10-15 min.: imersão total no nitrogênio líquido → Vantagem: congelação homogênia CONGELAMENTO VERTICAL → Palhetas são colocadas num suporte, imersas no nitrogênio líquido (1cm) → Depois de 10 a 15 min.: imersão total no nitrogênio líquido → Desvantagem: congelação desigual DESCONGELAR → Descongelar as palhetas em banho-maria, 37ºC, por 10-15 segundos FALHAS NA DESCONGELAÇÃO → Descongelação lenta: recristalização (injúrias ao espermatozoide) → Descongelação à temperatura ambiente (na mão ou bolso do inseminador) ou na vagina: os espermatozoides poderão morrer.
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