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1 Hematologia Eritrograma Hemograma: Formado por: Eritrograma (hemácias) Plaquetograma (plaquetas) Leucograma (leucócitos) Eritrograma: Nesse exame é avaliado: Nº de células Hematócrito (%) Morfologia Sangue: tecido conjuntivo especializado, com matriz extracelular líquida. Composta por elementos fgurados (células) e plasma (m.e.c). Células do sangue: glóbulos vermelhos (eritrócitos ou hemácias), os glóbulos brancos (leucócitos) e as plaquetas. Composição do plasma: -Solução aquosa com 10% de elementos dissolvidos: -Proteínas plasmáticas: Albuminas Globinas Lipoproteínas -Proteínas da coagulação (ex: protrombina, fibrinogênio) -Eletrócitos (1%) – Na+, Cl-, HCO3- -Gases dissolvidos (02, CO2) -Nutrientes (glicose, vitaminas, aminoácidos, lipoproteínas) - Catabólitos - Hormônios -Compostos nitrogenados (creatina, ácido úrico, ureia) Porque examinamos o sangue? Estado geral Diagnóstico (auxilia no diagnóstico) Habilidade de combater a infecção História clínica e outros exames são fundamentais para o diagnóstico Alguns achados são inespecíficos e comuns para diversas patologias. Coleta: Anticoagulante: edta (ácido etilenodiamino tetra-acético), citrato, heparina Temppo de espera do exame Esfregaço com sangue fresco Conservação ( melhor fazer o exame assim que coletado, exame pode ficar geladeira mas não pode ser cogelado, pode ser analizado em até 24h). Geovanna Ponte 2 - EDTA: melhor anticoagulante para mamiféros. - Citrato: específico para avestruz. - Heparina: roedores e reptéis Coleta de amostras: Sangue: Local: preferencialmente veia jugular Suíno: veia cava anterior ou veia da margem da orelha. Coelho: veia da margem da orelha Cães com pescoço curto, grosso e muito peludo: veia cefálica. Bovinos: veia da coccígea Veia jugular: meio mais eficaz de melhorar a qualidade das amostras. Proporção de sangue e anticoagulante deve ser proporcional. Equipamentos: agulhas descartávies 20 G melhor (0,9 x 40mm) 19 G grandes volumes (1,1 x 40mm) 21 G cães e gatos muito pequenos (0,8 x 40mm) Agulhas menores: hemólise Agulhas maiores hematomas Tipos de equipamentos: tubos com tampas de borracha: padrão de cores indicam qual anticoagulante/ preservativo. EDTA: hematologia teste de plasma Citrato: Heparina: obtenção de plasma mensuração de glicose Fluoreto: Sem aditivo: obtenção de soro Tubo à vácuo (“vacutainer”): Tubos com tampa de borracha: padrão de cores qual o anticoagulante/preservativo. Método: venopulação com agulha de 2 pontas, adaptador e tubo à vácuo. Vantagens: menor chance de coagular, não requer seringa, seguros. Desvantagens: caro, mais sujeito a hemólise (tubelência); inadequando para pequenos animais (colabamento de veias). Seringas plásticas para coleta de sangue “manovette’: Confotáveis de aspirar e contêm anticoagulante. Se convertem em tubos de coleta Vantagens: barato, sem necessidade de agulhas especiais, amostras não coagulam, não há vácuo para perder ou hemolisar o sangue, método de escolha para equinos e para rebanhos. Desvantagens: pouca variação de tubos pediátricos Seringas conversíveis/ tubos a vácuo “S- monovette”: Sistema de escolha na medicina humana. Requer agulhas de ponta dupla Não suja as mãos com sangue É o mais caro Pouca disponibilidade de tubos pequenos Coleta de sangue: A “origem de coleta” recomenda segundo a CCLS (Committee for Clinical Laboratory Standard), quando há necessidade de se coletar árias Geovanna Ponte 3 amostras de um mesmo paciente, durante uma mesma punção é a seguinte: Tubo para hemocultura (quando houver); Tubo sem aditivo (soro); Tubo com citrato (coagulação); Tubo com heparina (para plasma); Tubo com EDTA (hematologia); Tubo com (glicemia). fluoreto de sódio Exame hematológico: Primeira premissa: snague obtido e transferido para o tubo com anticoagulante não tenha coágulo. Segunda premissa é conservar sempre a proporção entre sangue e anticoagulante. - O excesso de anticoagulante pode acarretar: Destruição das plaquetas com reesultads falsos (plaquetopenia). Degeneração citoplasmática dos neutrófilos, com presença de corpúsculos intracitoplasmáticos que não se pode reconhecer se são bacterianas ou de outra etiologia. Vacuolização de monócitos Descutrição e lise das hemácias com resultados falsos de hemoglobina e hematócrito. Uso de anticoagulante mais indicado: EDTA remve o cálcio necessario à coagulação e é o anticoagulante mais indicado para contagens de células sanguíeas porque tem mínimos efeitos sobre as células. Obs: o citrato é o anticoagulante mais indicado para o hemograma de algumas espécies (Ex: avestruz). Pontos importantes: A amostras deve ser enviado ao laboratório rapidamente, o contato prolongado com o EDTA (principalmente à temperatura ambiente) pode induzir e alterar os resultados das contagens (ex: pseudotrombocitopenia). Se caso não for possível o envio dentro de um curto período, preserve sua amostra a uma temperatura de 4 C até no máximo 24 horas. O esfregaço sanguíneo deve ser feito até no máximo 3 horas após a colheita. Manter sempre a proporção de sangue e anticoagulante correta para obter qualidade e quantidade de volume necessário ao exame. Hemogenizar cuidadosamente o tubo com sangue por inversão, por 15 vezes, logo após a coleta para evitar o processo de coagulação. Hematopoese: Hematopoiese consiste no processo de divisão, diferenciação e maturação celular, desde a célula mais primitiva – célula estaminal – até aos diferentes tipos de células sanguíneas. Estes processos estão dependentes de diferentes genes existentes nas células. A célula estaminal, ou célula pluripotencial, tem a capacidade de se dividir, e assim de se auto- renovar, bem como de se diferenciar nos vários tipos de células. As células do sangue têm um tempo de vida limitado e necessitam de se renovar de forma continuada e constante; em algumas situações pode haver necessidade de aumentar a produção, como por exemplo quando há uma perda de sangue ou, no caso de uma infecção, em que são necessários mais globulos brancos. A produção das células é controlada pelos diferentes factores de crescimento. Geovanna Ponte 4 Originam-se do mesênquima do saco vitelino (ilhotas eritrblásticas). Pré-natal = fígado, baço, timo, linfonodos e início da medula óssea. Após 21 dias fígado, baço e medula Extravascular em mamíferos e intravascular em aves. A medula é hematopoiética do nascimento até a morte. O baço e o fígado mantém seu poder hematopoiético. Células totipotentes: Equilíbrio entre a formação e destruição das células Células multipotenciais Células oligopotenciais Células unipotenciais Linhagem celular A mais primitiva celúla tronco hematopoiética pluripotencial. Tem a capacidade de renovar-se. Maturação dos eritrócitos (hemácias): Envolve síntese de hemoglobia e (em algumas espécies) formação do disco bicôncavo. Blasto: jovem Eritroblasto pró-eritroblasto eritroblasto policromático eritroblasto ortocromático eritrócito. Eritrócitos: Hemoglobina determina a acidofilia. Expectativa de vida de meses 3-4 meses. Anisocitose (diferente tamanhos de células), poiquilocitose (formas diferentes). Meta-hemoglobina redutas (ou pecilocitose) Anidrase carbônica CO2 + H2O -> HCO3- + H+ Destruição intravascular e extravscular pelos macrófagos do baço, medula e fígado. Policromatofilia: hemácias com cores diferentes. Hemoglobina: Importante para carrear 02 e Fe Aproximadamente400.000x10^3 de moléculas de Hb estão presentes na hemácia e compreente 90% do seu peso seco. É um conjungado proteíco de heme e com globina de P.M: 64,458 d. Cada grama de Hb contém 3,3 mg de Fe e correia 1,34 ml de 02. Geovanna Ponte 5 Tipos: embrionária, adulta e infantil. Degradação: As hemácias são degradas e a Hb livre fica de 1 a 7h livre a mesma é oxidada e excretada pelos rins e destruída. Ciclo da hemoblobina Produção: A produção acontece na medula óssea sob o controle do hormônio eritropoetina (EPO). As células justaglomerulars renais produzem eritropoietina em resposta ao decréscimo do fornecimento de oxigênio (como na anemia e hipóxia) ou aumento dos níveis de androgênios. Hemoglobia: Importante para carrear O2 e Fe2+ Hemoblobina presente na hemácia e compreende 90% do seeu peso seco. É um conjunto proteíco (heme + globina), está dentro das hemácias. Globina lisada -> aa -> novas proteínas Heme e Fe reutilizados Billirubina se lia a albunina (BI ou não conjungada) > fígado > conjungada ác. Glicurônico (BD ou conjugada) > hidrossolúvel Bile > fezes > urolinina e extercobilina > urina e urobilinogênio. Anemia: Diminuição do número de hemácias, da qauntidade de hemoglobina e da porcetagem de hematócrito. Def.? Quem sabe? Raramente se trata de uma doença primária, geralmente trata-se um processo secundário. Sinais clínicos? Classificação: De acordo com PATOFISIOLOGIA: Anemia relativa: ocorre em fêmeas gestantes e neonatos após fluidoterapia -.> super hidratação Anemia absoluta: deve ser investigada clinicamnte, ocorre por: Hemorragia aguda o crônica, hemólise, intra e extracelular. Aplasia ou hipoplasia seletiva ou generalizada de medula, incluindo deficiência, defeito na utilização de nutrientes essenciais para produção de hemácias. De acordo com a resposta MEDULAR: Regenerativa: medula responde produzindo e liberando células jovens (aumento de reticulócitos), exceto em equinos. Equinos não formam reticulócitos. Não regenerativa: não existem reticulócitos, ocorrendo geralmente por lesões medulares, causandas por tummores, radiação e infecção. Morfologia: Sempre confirma no exame microscópico das hemácias. Classificação: O volume corpuscular médio (VCM) classifica as anemias em: Geovanna Ponte 6 Macrocíticas Microcíticas Normocíticas A concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM): Normocrômicas Hipocrômicas Não existe anemia hipercrômica, pois as hemácias possuem um limite para hemoglobina. Anemias: Índices hematimétricos: O volume corpuscular médio (VCM) classifica as anemias em: TAMANHO Macrocíticas (tamanho aumentado) Microcíticas (menores que o normal) Normocíticas (células normais) A concentração de hemoglobina corpuscular média (CHCM): COLORAÇÃO Normocrômicas Hipocrômicas Não existe anemia hipercrômica, pois as hemácias possuem um limite para hemoglobina. Anemia macrocítica e hipocrômica: Perda de hemácia com tamanho maior e coloração mais clara. É a remissão de perdas agudas de sangue ou hemólises agudas, onde o grau depende da severidade da anemia e da resposta medular frente a presença de reticulócitos. A reticulocitose como resposta da anemia aumenta o VCM e diminui o CHCM. Anemia normocítica e normocrômica: Ocorre por depressão seletiva da eritropoese em doenças crônicas como infecções, nefrite, uremia, neoplasias e certas alterações endócrinas. Nestes casos a resposta reticulocitária é ausente ou insignificante. Anemia microcítica e hipocrômica: Resulta de uma deficiência de ferro ou uma falha no uso de ferro na síntese de hemoglobina. A mudança morfológica das hemácias dependem do tempo de duração e da sveridade da anemia. Ocorrendo perda crônica de sangue, deficiência de cobre e piridoxina (Vit.B6). Anemia microcifica normocrômica e normocítica hipocrômica: São encontradas durante o desenvolvimentos das anemias por deficiência de ferro. Pode ter anemia por: Perda aguda e crônica de sangue Hemólise Por defeito Patofisiologia: 1. Perda aguda e crônica de sangue 2. Hemólise intra e extracelular 3. Por defeito e maturação e hipoproliferativa. Perda aguda de sangue: Incialmente os parâmetros se apresentam normais, após dois dias ocorre uma anemia normocítica e normocrômica. A Geovanna Ponte 7 reticulocitose inicia-se após aproximadamente 72 a 96 horas. As manifestações clínicas variam de acordo com o grau de hemorragia. O baço injeta eritrócitos na circulação para compensar a oxigenação, e os fluidos extravasculares movem-se para o espaço intravascular. A reticulose é vista após o 3º dia de hemorragia. Perda crônica de sangue: Geralmente é uma anemia ferropriva (baixos níveis de ferro) portanto é microcítica e hipocrômica. Anemias hemolíticas: Ocorre quando a meia vida da hemácia é reduzida, devido a defeitos na célula ou alterações microvasculares. Pode ser intravascular (hemoglobinemia, hemoglobinúria e icterícia) ou extravascular. São geralmente regenerativas, de origem infecciosa ou não-infecciosa. Normalmente macrocíticas hipocrômicas. Anemia hemolítica imunomediada (AHIM): Normal em cães e gatos, devido a dirofilariose, linfoma, lúous eritematoso, drogas ou medicamentos. Ocorre a presença de esferócitos, células fantasmas e auto aglutinação. Anemia hemolítica por corpúsculo de heinz: Compostos oxidantes na circulação agem na hemoglobina que precipita. Ocorre por exemplo, pela ingesão de cebola e acetominofeno (paracetamol). Podem ser encontrados excentrócitos (palidez fora do centro da hemácia). Comum em gatos no caso de diabetes melitus, doenças hepáticas, hipertireoidismo. Obs: nem todo animal com cinomose pode apresentar corpúsculo de lentz, mas todo animal com o corpúsculo tem cinomose. Anemias hemolíticas: Infecção de hemobartonela felis e H. Canis; Babesiose; Deficiência de piruvato quinase; Deficiência de fosfofrutoquinase; Hemólise mecânica. Anemia por defeito de maturação: Padrão não regenerativo (ausência de policromasia reticulocitose). Produção de hemácias ineficientes Classificadas por defeito de maturação nuclear citoplasmática. Anemias com hipoplasia medular generalizada: A citotoxidade generalizada pod ser ocasionada por: Agentes infecciosos: vírus da leucemia felina ou erliquiose. Geovanna Ponte 8 Tóxicos: estrógenos e quimioterápicos. Anemias mielotísticas: doenças neoplásicas (leucemias) ou não neoplásicas (mielofibrose que ocorre na radiação ou na intoxicação por estrógeno). Anemias regenrativas: A produção pela medula óssea é aumentada, presença de policromatofilia (hemácias jovens) e aumento e reticulócitos. Sempre que houver aumento de policromasia deve-se indicar a contage de reticulócitos. Anemias não regenrativas: Ocorem por perda sanguínea ou hemólise, apresentam células normocíticas e normocrômicas. Policitemia: Relativa: aumento do Ht sem o aumento de hemácias. Absoluta: aumento do Ht por aumento verdadeiro no número das hemácias (aumento de produção). Análise microscópica das hemácias: Anisocitose: Corantes como Leishman, Giomsa, Panótico, Rosenfeld, que possuem corantes ácidos (eosina) e basicos (azul de metileno). Estruturas com compostos básicos ligam-se ao corante ácido ficando vermelho, como grânulos de eosinófilos. Estruturas ácidas ligam-se ao corante básico ficando azul como o DNA/RNA e grânulos de basófilos. Policromasia: Cores diferentes, checa-se com o CHCM, apresentando normocromia ou hipocromia. Poiquilocitose: Eritrócitos coom formas diferentes: Acantócitos Acuminócito Dacriócito Drepanócito Crenada Ovalócitos Knizócito Esquisócitos Esterócitos Corpúsculo de Heinz Eritrócitos com formas diferentes Acanócitos Forma de dedos de luvas, ocorre em doenças do fígado e do baço. Acuminócito Forma de fuso, normal em caprinos. Dacriócito Forma de lágrima, indica desordens mieloproliferativas. Target Cell Forma de alvo, indica deficiência de ferro, doenças do baço e do fígado. Drepanócito Forma de foice, rara. Geovanna Ponte 9 Crenada Forma de engrenagem de relógio, ocorre m linfoma, glomerulonefrite e cavalos após exercícios ou falha técnica. Ovalócitos Deficiênia na parede celular devido a falta de determinadas proteínas, sendo normal em aves, répteis e camelídeos. Knizócito Forma de cesta, resposta de anemias em cães. Estomatócitos Forma de boca, ocorre em cães com anemia crônica, mas é normal em bovinos e ovinos. Corpúsculo de Heinz Precipitação de hemoglobina, normal em felinos. Geovanna Ponte
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